Análisis filogenético de microalgas del genero Dunaliella (Chlorophyceae, Dunaliellales) Dunaliella (Chlorophyceae) … desde 1836 … 1836 - Turpin (Francia) “Globularia kermesina” 1837 - Dunal (Salinas de Montepellier, Francia) “Haematococcus salinus”, “Protococcus salinus” 1905 - Teodoresco (Bucarest, Rumanía) Diferentes hábitats Importancia de Dunaliella Dunaliella salina - carotenos (β-caroteno) Alimentos y suplementos dietéticos, piensos, cosmética - glicerol (farmacéutica, cosmética) Dunaliella tertiolecta – acuicultura Dunaliella acidophilla (pH 0-3) – estudios de transporte iónicos, homeostasis (pH) carotenos glicerol Taxonomia tradicional: caracteres morfológicos y fisiológicos (Género Dunaliella: 28 especies reconocidas) Dibujos y clave adaptados de Massyuk (1973) y Borowitzka y Siva (2007) Metodología Extracción ADN PCR Secuenciación FUENTE PROCESADO ANÁLISIS (n=157) Metodología ITS (Internal Transcribed Spacer) For 18s rDNA ITS1 5.8s ITS2 26s rDNA Rev Goff et al. (1994) J. Phycol. 30: 521-37 ITS2 Database http://its2.bioapps.biozentrum.uni-wuerzburg.de/ Softwares: 4SALE, ProfDistS, CBCAnalyzer Section Peirceinae Taxonomía Tradicional Assunção et al. J. of Applied Phycol. (2012): 24(4), 635-639 Section Dunaliella Subgenus Dunaliella Section Viridiae Section Tertiolecta Género Dunaliella Subgenus Pasheria Subgénero Pacheria Subgénero Dunaliella 3 Clados de D. salina + D. salina ITC5.105 “Janubio” 4 Clados de D. viridis + D. viridis var. palmelloides + D. viridis var. euchlora 1 Clado tertiolecta D. pseudosalina Assunção et al. Aquatic Systems. 2012: 8-2 Assunção et al. Phycol. Res. Accepted Section Peirceinae Section Viridiae Subgenus Dunaliella Section Dunaliella Section Tertiolecta Subgenus Pasheria Taxonomía tradicional Taxonomía molecular Assunção et al. Phycol. Res. Accepted Distribución geográfica (D. salina) ITS (Internal Transcriber Spacer) CC CC: Islas Canarias Lanzarote Fuerteventura Gran Canaria Mainland of Spain France Tunisia Israel Mongolia China Australia Mexico Chile subclade2 Dunaliella salina ITC5105 “Janubio” Dunaliella salina AC144 Dunaliella salina 9802 Dunaliella salina UTEX1644 0.99 Dunaliella salina CCAP19/25 Dunaliella salina CONC007 1.00 Dunaliella salina CONC001 0.97 Dunaliella salina ITC5118 “Île de Ré 01” Dunaliella salina ITC5122 “Île de Ré 05” Dunaliella salina ITC5119 Île de Ré 02” 0.83 Dunaliella salina CONC006 Dunaliella salina DCCBC1 1.00 Dunaliella salina CCAP19/18 0.97 Dunaliella bardawil nomen nudum [salina] CCAP19/30 1.00 Dunaliella salina ITC5114¨”La Tapa” Dunaliella salina CCAP19/12 Dunaliella bardawil nomen nudum [salina] ATCC30861 0.92 Dunaliella bardawil nomen nudum [salina] ITC5000 0.98 Dunaliella bardawil nomen nudum [salina] UTEX2538 Dunaliella salina Taggu 1.00 Dunaliella salina OUC66 “hd4” Dunaliella salina OUC38 “hd3” Dunaliella salina OUC36 “hd2” Dunaliella salina OUC21 “hd1” Dunaliella salina hd6 1.00 Dunaliella salina hd5 Dunaliella salina Yucatan Dunaliella salina ITC5107 “Añana” Dunaliella salina ITC5106 “Majo” Dunaliella salina ITC5104 “Guatiza” Dunaliella salina ITC5103 “Rio” Dunaliella salina ITC5102 “Tenefé” Dunaliella salina ITC5101 “Punta” Dunaliella salina ITC5100 “Vargas” 0.1 Dunaliella salina ITC5003 “BCA421” 0.80 subclade1 Otras Dunaliella species 35 cepas D. salina, 12 nuevos aislamientos, 8 aislamientos CC Assunção et al. Aquatic Systems. 2012: 8-2 CBC (Compensatory Base Changes): Discriminar species ESPECIE (unidad biológica): grupo de organismos capaces de entrecruzarse y de producir descendencia fértil ITS2 Database: http://its2.bioapps.biozentrum.uniwuerzburg.de/ CBC (Compensatory Base Change): estructura 2aria del ARN 4SALE, CBCAnalyzer *Prever la compatibilidad sexual entre 2 individuos (>1CBC entre 2 individuos = diferentes especies) (0CBC “ = ????) *Müller et al. 2007. RNA, 13:1469-1472; Coleman, 2009. Mol.Phyl. & Evolution 50:197-203 CBC (Compensatory Base Changes): Discriminar species Müller et al. 2007. RNA, 13:1469-1472; Coleman, 2009. Mol.Phyl. & Evolution 50:197-203 CBC (Compensatory Base Changes): Discriminar species D. viridis var. palmelloides CCAP11/34 D. lateralis (>3CBC) Diferentes grupos de D. viridis Diferentes grupos de D. salina (>cepas con >1CBC) D. salina ITC5105 (Janubio) (0CBC-2 cepas) D. acidophila D. pseudosalina … (>cepas con >1CBC) Assunção et al. J. of Applied Phycol. (2012): 24(4), 635-639 Assunção et al. Aquatic Systems. 2012: 8-2 Assunção et al. Phycol. Res. Accepted Conclusiones 1- Desacuerdo entre taxonomía tradicional y molecular 2- Subgénero Pascheria: Se propone que quede obsoleto. 3- Dunaliella salina: 3 grupos biológicos distintos. Cepa Canaria (ITC5105) originaria de las salinas “Janubio” de Lanzarote 4- Dunaliella viridis: 4 entidades biológicas distintas “D. euchlora” y “D. palmelloides” 5- Dunaliella pseudosalina: No pertenece a la sección Dunaliella 6- Sección Tertiolecta: Diferentes especies = misma secuencia 7- CBC: Útil y practico cuando funciona 8- No existe información geográfica 9- especies mal identificadas. GRACIAS