BD Mycoplate MS Agar

INSTRUCCIONES DE USO –
MEDIOS EN PLACA LISTOS
PARA USAR
PA-254063.06
Rev.: Jan 2014
BD Mycoplate MS Agar
USO PREVISTO
BD Mycoplate MS Agar (agar MS BD Mycoplate) es un medio no selectivo para el cultivo de
hongos y la diferenciación de levaduras del género Candida según las características
morfológicas. En microbiología clinica, este medio no se utiliza para el cultivo de muestras, sino
para el análisis de cultivos puros de levaduras aisladas a partir de muestras clínicas para
determinar la formación de clamidosporas y otras características morfológicas.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO
Método microbiológico.
BD Mycoplate MS Agar se fundamenta en la base de levadura y nitrógeno, que es un medio
de definición química para los hongos. Está formado por una fuente de nitrógeno inorgánico,
varias otras sales minerales, aminoácidos esenciales, vitaminas y trazas de minerales. Está
enriquecido con glucosa como fuente de energía universal y asparagina. Se ha añadido agar
para mayor solidificación. También se le conoce como Agar para morfología de levaduras1-3. Se
ha demostrado que se puede detectar la formación de clamidosporas de Candida albicans en
este medio, lo que lo hace adecuado para la identificación presuntiva de esta especie de
levadura tan frecuente en entornos clínicos, y para la detección de otras características
morfológicas de la especie Candida, tal como seudomicelio y los tubos germinales1,2.
REACTIVOS
BD Mycoplate MS Agar
Fórmula* por litro de agua purificada
Glucosa
Asparagina
Sulfato de amonio
Fosfato monopotásico
Sulfato magnésico
Cloruro sódico
Cloruro de calcio
Monohidrocloruro L-Histidina
DL-Metionina
DL-Triptófano
Agar
Biotina
Pantotenato cálcico
Ácido fólico
10,0 g
1,5
5,0
1,0
0,5
0,1
0,1
0,01
0,02
0,02
15,0
0,002 mg
0,4
0,002
Inositol
Ácido nicotínico
Ácido p-aminobenzoico
Clorhidrato de piridoxina
Riboflavina
Clorhidrato de tiamina
Ácido bórico
Sulfato de cobre
Yoduro potásico
Cloruro férrico
Sulfato de manganeso
Molibdato sódico
Sulfato de zinc
2,0 mg
0,4
0,2
0,4
0,2
0,4
0,5
0,04
0,1
0,2
0,4
0,2
0,4
pH 5,6 ± 0,2
*Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
PRECAUCIONES
. Solamente para uso profesional.
No utilizar las placas si muestran evidencia de contaminación microbiana, decoloración,
deshidratación, agrietamientos o cualquier otro signo de deterioro.
Consultar los procedimientos de manipulación aséptica, riesgos biológicos y desecho del
producto usado en el documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO.
ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL
Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8 °C,
envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la congelación y el
PA-254063.06
-1-
calentamiento excesivo. Las placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la
etiqueta en el paquete) e incubarse durante los períodos de incubación recomendados.
Las placas de grupos de 10 placas ya abiertos pueden usarse durante una semana siempre
que se almacenen en un lugar limpio a una temperatura entre 2 y 8 °C.
CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO
Inocular las placas con las cepas mencionadas a continuación en una extensión de inoculación
por placa y colocar varias cubiertas esterilizadas sobre la zona con la muestra extendida.
Incubar durante 2 – 3 días a 25 – 28 °C. Después, examinar la placa al microscopio y verificar la
zona debajo de las cubiertas para determinar la presencia de clamidosporas con bajo aumento.
Cepas
Candida albicans ATCC 10231
Candida krusei ATCC 34135
Sin inocular
BD Mycoplate MS Agar
Crecimiento con clamidosporas
Crecimiento sin clamidosporas
De incoloras a beige muy pálido, levemente
opalescente
PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados
BD Mycoplate MS Agar (placas Stacker de 90 mm). Controladas microbiológicamente.
Material no suministrado
1. Microscopio con lente de aumento de 10 x y 40 x.
2. Medios de cultivo auxiliar, reactivos y el equipo de laboratorio que se requiera.
Tipos de muestras
Este medio no se utiliza para el cultivo de muestras, sino para el análisis de cultivos puros de
levaduras (es decir, aisladas previamente a partir de varias muestras incluidas muestras
clínicas) para determinar la formación de clamidosporas y otras características morfológicas.
Procedimiento de análisis
Utilizar cultivos puros de levaduras o colonias bien aisladas en placas con cultivos mixtos. Para
detectar la formación de clamidosporas y tubos germinales, aplicar la cepa de prueba en una
extensión en BD Mycoplate MS Agar. Colocar cubiertas esterilizadas en varias zonas de la
extensión. Incubar durante 2 – 3 días a 25 – 28 °C, examinar la placa al microscopio y
comprobar la zona debajo de las cubiertas con bajo aumento para determinar la presencia de
clamidosporas y tubos germinales. Si el resultado es negativo, continuar con la incubación y
repetir el procedimiento del microscopio descrito anteriormente.
Resultados
Si la prueba de los tubos germinales da resultado negativo después de 2 – 3 días de
incubación, puede excluirse la presencia de Candida albicans. La formación de clamidosporas y
tubos germinales indica la presencia de C. albicans. Si hay un seudomicelio (seudohifa) visible,
pero no se detectan tubos germinales, es probable la presencia de especies Candida diferentes
de C. albicans. Si ambas características son negativas, la cepa podría ser C. (Torulopsis)
glabrata o tal vez pertenecer a otro género de levaduras. Consultar la referencia para obtener
información acerca del aspecto de las clamidosporas, los tubos germinales o seudomicelio1.
Características morfológicas de la especie más frecuente de Candida
Especies
Candida albicans
C. tropicalis
C. krusei
C. (Torulopsis) glabrata
Clamidosporas
+
-
Tubos germinales
+
-
Seudomicelio
+
+
+
-
CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Este medio se utiliza para el estudio de las características morfológicas de las levaduras, en
especial las especies Candida.
PA-254063.06
-2-
BD Mycoplate MS Agar no es selectivo para los hongos. Por tanto, no está recomendado
como medio de aislamiento primario para hongos. Para el aislamiento selectivo de hongos,
deben utilizarse medios tales como BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin,
BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol o BD CHROMagar Candida .
Candida dubliniensis también da resultado positivo a los tubos germinales y produce
clamidosporas4. Las levaduras diferentes de las especies Candida podrían producir un
seudomicelio. Se recomienda la identificación bioquímica para todas las cepas que no producen
tubos germinales y para las cepas que no producen ni tubos germinales ni seudomicelio, o bien
para los resultados ambiguos. También se recomienda BD CHROMagar Candida para el
aislamiento selectivo de hongos y la identificación de las especies Candida más frecuentes.
No incubar BD Mycoplate MS Agar a una temperatura superior a 30 °C porque las
características morfológicas descritas anteriormente de hecho se producen a temperaturas
elevadas.
REFERENCIAS
1. Larone, D.H. 1995. Medically important fungi. A guide to Identification, 3rd edition. American
Society for Microbiology, Washington.
2. Anonymous. 1998. DIFCO Manual, 11th edition. DIFCO Laboratories, Division of Becton
Dickinson and Co. Sparks, MD, USA.
3. Atlas, R.M. 1993. Handbook of microbiological media. CRC Press, Boca Raton, USA.
4. Hazen, K.C., and S.A. Howell. 2003. Candida, Cryptococcus, and other yeasts of medical
importance. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken
(ed.). Manual of clinical microbiology, 8thed. American Society for Microbiology, Washington,
D.C.
ENVASE/DISPONIBILIDAD
BD Mycoplate MS Agar
Nº de cat. 254063
Medios en placa listos para usar, 20 placas
INFORMACIÓN ADICIONAL
Para obtener más información, diríjase a su representante local de BD.
Becton Dickinson GmbH
Tullastrasse 8 – 12
D-69126 Heidelberg/Germany
Phone: +49-62 21-30 50
Fax: +49-62 21-30 52 16
[email protected]
http://www.bd.com
http://www.bd.com/europe/regulatory/
ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection
BD, BD Logo and all other trademarks are the property of Becton, Dickinson and Company. © 2014 BD
PA-254063.06
-3-