FASE ANALITICA. CONTROL DE CALIDAD INTERNO Y EXTERNO

Fase analítica. Interferencias
analíticas. Control de calidad
interno y externo.
Shaila Rubio Arias
FIR 2º Análisis Clínicos
Establecimiento del proceso
analítico
– Cuando hablamos de proceso analítico nos
referimos a procedimientos, instrucciones,
materiales y equipamiento necesario para dar
los resultados analíticos.
– En este proceso hay dos partes:
• Procedimientos de medida
• Procedimientos de control
• En general, para cualquier magnitud biológica que
queramos establecer en el laboratorio hay que
determinar las necesidades médicas y seleccionar
un test que nos de información.
• Si existe un test de rutina, debemos evaluarlo y
asegurar que su rendimiento analítico es adecuado
y así poder proporcionar resultados útiles.
• Debemos participar en programas externos e
internos de controles de calidad.
• Actualizar nuestro conocimiento.
Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and Productivity of
Analytical Processes. James O. Westgard
Conocer la necesidad
médica
Reevaluar las
necesidades
Seleccionar y evaluar
los tests diagnósticos
Rediseñar
proceso
NO
Establecer los
requisitos de
calidad analítica
Rediseñar
proceso
Seleccionar y evaluar
el procedimiento
de medición
NO
Modificar
proceso
Resultados
Estimación de
los errores
SI
NO
Determinación de errores
de medición
Satisfacción de
los usuarios
NO
SI
Seleccionar
procedimiento de control
Resultados
control
SI
Implementar el
proceso
de análisis
Ejecutar el
proceso analítico
de rutina
¿Ejecución
Analítica es
correcta?
• Tipos de procesos analíticos
– Proceso por lotes
• Ej.: métodos manuales, analizadores de un canal.
– Procesos simultáneos de lotes
• Ej.: analizadores multicanal
– Procesos de acceso aleatorio.
• Ej.: analizadores automáticos
• La calidad del proceso analítico puede ser
descrito por su tasa de errores y la
proporción de resultados que son errores
clínicamente importantes.
• La productividad del proceso analítico
puede ser descrito por el rendimiento de la
prueba, la proporción de las mediciones y
los resultados correctos.
Validación de métodos
• Recomendaciones de la AACC/TDM:
• Precisión
• Exactitud
• Linealidad
• Sensibilidad
• Interferencias
• Comparación de métodos
C. E. Pippenger, Dave Berry.
TDM Roundtable Recommendations: Generic TDM Assay Validation Guidance
http://www.aacc.org/resourcecenters/leadership/DivisAdmin/TDM/Documents/Final_Generic.pdf
– Exactitud: Acuerdo entre el estimado de una
cantidad y su verdadero valor. Una cantidad
conocida de fármaco puro es añadida y se
valora el porcentaje de recuperación.
– Precisión(1): Grado de concordancia entre los
resultados obtenidos al aplicar el proceso
experimental repetidas veces, bajo las
condiciones establecidas. Deben evaluarse al
menos tres concentraciones que
abarquen el rango de ensayo.
(1) NCCLS EP05-A
– Interferencia: Es el efecto que produce un
componente en la exactitud de la medición del
analito. Los efectos de los interferentes
potenciales deben ser estudiados y observar si
afecta al rendimiento del análisis.
– Comparación de métodos: Si no es posible
compararlo con el método de referencia,
realizarlo con el método disponible en nuestro
laboratorio.
INTERFERENCIAS
ANALÍTICAS
• Definición: Es el error sistemático producido por una
sustancia distinta de la que se pretende medir en un
procedimiento analítico.
• La cuantía de la interferencia depende de la
concentración de la sustancia interferente y del
método utilizado.
• Los usuarios sólo deberían realizar estudios de
interferencias en aquellos casos en que introdujeran
modificaciones apreciables en un procedimiento de
medida, o cuando se considerase
que la información del fabricante
sea insuficiente.
• Posibles fuentes de interferencias:
– Anticoagulantes y conservantes
– Componentes endógenos:
• Bilirrubina: Falsos positivos de acetaminofeno con
hiperbilirrubinemia.(1)
• Fibrina: Genera resultados incorrectos al precipitar
en muestras que han estado refrigeradas mucho
tiempo o han sufrido ciclos de congelacióndescongelación.
(1) False-Positive Acetaminophen Results in a Hyperbilirubinemic Patient
Clinical Chemistry 49:4 695–698 (2003)
– Determinaciones interferidas por fármacos:
• Ginseng contiene componentes que tienen
una estructura muy similar a la digoxina.(1)
• Antiepilépticos deben evaluarse con sus
metabolitos.
(1) Ashwagandha and Digoxin Assay—Dasgupta et al. Arch Pathol Lab Med Vol 131, August 2007
– Reacciones cruzadas con anticuerpos:
• Paraproteina IgM: Su presencia nos puede dar
resultados falsamente bajos en la determinación de
acetaminofeno.(1)
• Anticuerpos heterófilos: Su presencia nos puede dar
resultados falsamente altos en la determinación de
digoxina.(2)
(1) An IgM Paraprotein Causing a Falsely Low Result in an Enzymatic Assay for
Acetaminophen. Clinical Chemistry 45, No. 1, 1999
(2) Therapeutic Drug Monitoring of Digoxin. Toxicol Rev 2006;25 (4); 273-281
CONTROL INTERNO
• Definición
• Técnicas de CC para resultados
cuantitativos
• Gráficos de Levey-Jennings
• Reglas Westgard
• Six sigma
• Definición:
– El C.C interno asegura la precisión y la
reproducibilidad de los resultados del
laboratorio.
– Los C.C. son sensibles a errores aleatorios
y sistemáticos.
• Error aleatorio: la incapacidad
de obtener el mismo resultado
cuando se analizan muestras
idénticas.
• Error sistemático: Da una
desviación de los resultados
con
respecto
al
valor
verdadero.
Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and Productivity of
Analytical Processes. James O. Westgard
• Técnicas de CC para resultados cuantitativos
– Se debe establecer la media y la diferencia fija a partir:
• de la media de los objetivos.
• como un múltiplo de la desviación estándar de los resultados
del material de control a lo largo del tiempo.
– Típicamente se utilizan 20 resultados de control en al
menos 5 procesos diferentes para establecer la
desviación estándar.
– El valor de DE se usa para establecer los límites de
control fijos (± 3 DE a partir de la
media del objetivo).
– Los resultados se representan en un histograma de
frecuencias, se puede ver
que la distribución se
asemeja a una distribución
gaussiana o normal.
Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and Productivity of
Analytical Processes. James O. Westgard
• Gráficos de Levey-Jennings
– Exponen datos del C.C. en el tiempo.
– En el eje de abscisas está el tiempo y en
ordenadas las concentraciones de C.C (se
centra en la media del objetivo con los límites
de control superior e inferior marcados para
una mejor visualización).
– Nos permite ver los resultados durante
semanas o meses.
– Nos identifica tendencias.
Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and Productivity of
Analytical Processes. James O. Westgard
• Método CUSUM
– Es el método de la suma acumulativa. Se calcula la
diferencia que aparece entre los resultados de CC y
las medias.
– Los valores fluctuarán sobre cero o aumentarán
lentamente a lo largo del tiempo. La magnitud de la
fluctuación es pequeña.
– Sirve para identificar sesgos con mucha claridad.
Pero no sirve en métodos poco precisos porque
mostrará grandes fluctuaciones.
• Reglas múltiples: Westgard:
– Westgard vio que al usar los límites simples de
control superior e inferior carecía de poder para
identificar problemas analíticos.
– Para poder mantener una tasa aceptable en la
detección de errores los límites de control deben ser
estrechos y debe haber una frecuencia alta de
análisis.
– Utilizando reglas múltiples se puede
incrementar las tasas de detección
del error sin aumentar la tasa de
rechazo falso.
– Nomenclatura:
• Ab: A puede ser el número de resultados de control que
se necesitan para poner en práctica la regla o bien un
rango. b es el símbolo que describen la estadística que se
aplica a los resultados de control.
• Multirreglas de Westgard son:
– 12S (resultado superior a 2 DE a partir de la media)
– 13S (resultado superior a 3 DE a partir de la media)
– 22S (2 últimos resultados de control son mayores de 2DE)
– R4S (la diferencia entre resultados control sucesivos es 4 DE)
– 41S (últimos 4 resultados control sucesivos superan x + 1DE o
son menores de x – 1DE)
– 10X (los últimos resultados control sucesivos están en el
mismo lado que la media)
– Se aplican de forma secuencial.
– Pueden modificarse añadiendo o quitando
reglas, cambiando los límites que actúan en
una regla o cambiando el número de
resultados control comprobados mediante las
reglas.
– Cada modificación altera la tasa de detección
del error y la tasa de rechazo falso.
• Algoritmos de Westgard
Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and Productivity of
Analytical Processes. James O. Westgard
• Six sigma
– El criterio SIX SIGMA puede ser considerado como el
nivel de excelencia que deben alcanzar los
laboratorios con un alto grado de automatización que
incluya informática y robótica.
– SIX SIGMA: Tiene el nivel más elevado de exactitud
equivalente a un nivel de seguridad de 99.9997% y
representa un total de 3.4 errores por millón de
unidades.
CONTROL EXTERNOS
• Definición
• Programas de evaluación externa de la
calidad
– Controles establecidos por Sociedades Científicas
• AEBM-AEFA
• SEQC
– Bio-Rad laboratories
– UK NEQAS
• Definición: Es el procedimiento en el que
se utilizan los resultados de varios
laboratorios que analizan los mismos
especimenes. Un organizador compara los
resultados obtenidos mediante diferentes
métodos para verificar si hay homogeneidad
entre ellos.
• Son de frecuencia variable.
• Nos dan la medida de la trazabilidad horizontal.
• Permite comparar métodos analíticos para tomar
decisiones.
• Verifican la imprecisión y la inexactitud de cada
laboratorio y del conjunto de laboratorios,
acreditando la calidad de los participantes.
– Inexactitud se cuantifica como el porcentaje de
desviación con respecto al valor diana.
Programa de evaluación externa de la calidad de
bioquímica (suero) de la Sociedad Española de
Bioquímica Clínica y Patología Molecular.
• Los laboratorios que desean participar deben inscribirse
indicando su metodología e instrumentación para
distribuirlos en grupos de laboratorios que operen en
condiciones más afines.
• La totalidad de los resultados mensuales se procesan al
final del año y se hace por medio de gráfica de LeveyJenning.
• Se hace también un desglose
semestral.
• Mensualmente:
– Se analizan los viales que contienen un
homogeneizado de suero humano o animal.
– Se envían los resultados y se introducen en el
sistema informático.
– Se convierten a unidades del Sistema Internacional.
– Con todos los datos se calcula el valor consenso y la
desviación estándar general.
• Eliminando los valores situados fuera de ± 3 DE.
– Luego se calculan por métodos
y por grupos.
• Se hace un calculo del grado de inexactitud
para cada constituyente y cada laboratorio.
• Se expresa en % y en número de desviaciones
estándar respecto de la media de su método.
(mínimo de 10 participantes)
MUCHAS GRACIAS