LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Sistema
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LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Sistema Guía de inicio rápido Lo nuevo 4 Dónde encontrar información 6 Primeros pasos 8 Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition 9 Paso 2. Prepare los módulos del LC 16 Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 20 Paso 4. Configure y ejecute un método 39 Paso 5. Revise los resultados y encuentre compuestos con Qual Analysis 48 Paso 6. Configurar y ejecutar cuantificación 48 Use esta guía para dar los primeros pasos con el sistema LC/MS tiempo de vuelo Agilent serie 6200 y LC/MS tiempo de vuelo cuádruple Agilent serie 6500, y como hoja de ruta para su información como usuario. ¿Qué es el sistema LC/MS TOF Agilent serie 6200? El TOF Agilent es un espectrómetro de masas de tiempo de vuelo de aceleración ortogonal (oa-TOF) Los iones que alcanza la cámara de tiempo de vuelo están impelidos en una dirección perpendicular a su camino original, lo que significa que el pulso de aceleración aplicado para enviar los iones al tubo de vuelo es ortogonal respecto a la dirección en que los iones entran en el analizador de masa. Esta geometría minimiza el efecto de la velocidad de entrada en el tiempo de vuelo, llevando a una resolución más elevada. 1 ¿Qué es el sistema LC/MS Q TOF Agilent serie 6500? Puede configurar un LC/MS TOF Agilent con los módulos Agilent 1200 LC, 1260 o 1290 Infinity, o 1290 Infinity II LC y con una de diversas interfaces de iones. • ESI • ESI Dual • AJS ESI (Agilent Jet Stream ESI) • AJS ESI Dual (Agilent Jet Stream ESI dual) • HPLC-Chip • APCI • APPI • Multimodo • Nanospray (nanoESI) • Nanospray dual (Dual nanoESI) • MALDI • GC-APCI El Agilent 6230 Accurate-Mass TOF es compatible con la Agilent Jet Stream ESI. La fuente AJS ESI utiliza una vaina de gas supercalentada para colimar el aerosol nebulizador, lo que aumenta dramáticamente el número de iones que entran en el espectrómetro de masas. Cada sistema Agilent tiene sus ventajas para el descubrimiento de drogas, metabolómica y análisis medioambiental — detección de muestras de alto rendimiento con una detección altamente sensible y una asignación de masas exacta. ¿Qué es el sistema LC/MS Q TOF Agilent serie 6500? El LC/MS Q TOF de Agilent es un cromatógrafo líquido-espectrónetro de masas cuadripolo tiempo de vuelo que realiza EM/EM usando un cuadripolo, una célula de colisión en hexapolo y un analizador tiempo de vuelo para producir los espectros. El cuadripolo selecciona los iones precursores que se fragmentan en la célula de colisión en iones de producto, que entonces se ven impelidos hacia el detector a un ángulo perpendicular a la vía original. 2 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent ¿Qué es el software Agilent MassHunter Workstation? 1 Puede configurar un LC/MS Q TOF Agilent con los módulos Agilent 1200 LC, 1260 o 1290 Infinity, o 1290 Infinity II LC y con una de diversas interfaces de iones. ESI, ESI Dual, AJS ESI, AJS ESI Dual, HPLC-Chip, APCI, APPI, Multimodo, nanospray, nanospray dual, MALDI y GC-APCI. Los Q TOF Agilent 6538, y 6540 UHD Accurate-Mass, el Q TOF Agilent 6550 iFunnel y el Q TOF Agilent 6545 Q-TOF se pueden configurar con la fuente Agilent Jet Stream ESI (AJS ESI). Esta fuente utiliza una vaina de gas supercalentada para colimar el aerosol nebulizador, lo que aumenta dramáticamente el número de iones que entran en el espectrómetro de masas. El Q TOF Agilent 6545 y el Q TOF Agilent 6550 iFunnel también se pueden configurar con la fuente AJS ESI dual. ¿Qué es el software Agilent MassHunter Workstation? El LC/MS TOF y Q TOF Agilent se entregan con el software MassHunter Workstation de Agilent, que incluye estos programas: • Data Acquisition – Desde una sola aplicación usted podrá afinar el espectrómetro de masas, controlar y vigilar los parámetros del instrumento, configurar métodos que contengan parámetros de adquisición y listas de trabajo que contengan muestras múltiples y monitorizar en tiempo real los planes de ejecución. • Qualitative Analysis – Desde una aplicación puede usted configurar métodos para extraer e integrar cromatogramas, extraer picos de espectro y compara datos de tipos distintos de archivos de datos. Aún más importante, puede encontrar compuestos y generar fórmulas para tales compuestos. Para más información sobre el programa Qualitative Analysis, consulte la Guía de familiarización con Qualitative Analysis o la ayuda en línea del programa Qualitative Analysis. • Quantitative Analysis – Desde una única aplicación puede configurar un lote de archivos de datos y cuantificar, evaluar y recuantificar los resultados. Para más información sobre el programa Quantitative Analysis, consulte la Guía de familiarización con Quantitative Analysis o la ayuda en línea del programa Quantitative Analysis. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 3 1 Lo nuevo Lo nuevo en B.06.01 • Se da compatibilidad al espectrómetro de masas Q TOF Agilent 6545. • Se da compatibilidad al espectrómetro de masas Q TOF Agilent 6550 iFunnel. • En esta versión se da compatibilidad a los espectrómetros de masas Q TOF Agilent 6540A, 6540B, 6538A, 6530A, 6530B, y 6520B Accurate-Mass. • No se da compatibilidad al espectrómetro de masas Q TOF Agilent 6560 Ion Mobility. • Los 6540B y 6530B pueden adquirir espectros MS hasta 50 espectros/seg y hasta 30 MS/MS espectros/seg en modo dirigido. • Se da compatibilidad a los espectrómetros de masas TOF Agilent 6230A y 6224A Accurate Mass. • En esta versión se da compatibilidad al Agilent 6230B. • No se da compatibilidad al Agilent 6220A. • Se da compatibilidad al SFC (cromatógrafo de fluido supercrítico) Agilent 1260 Infinity Analytical. • Se da compatibilidad al Agilent 1290 Multisampler. • Se da compatibilidad al LC Agilent 1220 Compact. • Se da compatibilidad al Agilent 6460A Serie 2. • Se da compatibilidad al clúster de válvulas de bomba de Agilent. • Se da compatibilidad al clúster compartimento de columnas de Agilent. • Se da compatibilidad al clúster HDR-DAD de Agilent. • Se da compatibilidad a MassHunter Walkup C 02.01. • Se da compatibilidad al algoritmo de sintonización automática SWARM para el espectrómetro de masas Q TOF 6545. • Disponible para el espectrómetro de masas Q TOF 6545 una sintonización automática de pequeñas moléculas. • Se puede restaurar la configuración del instrumento en el cuadro de diálogo Instrument Configuration (Configuración del instrumento). • El HTS/HTC usa el controlador RC NET con nuevas capacidades de configuración de dispositivos. • Se puede especificar un método de informe cuantitativo en la pestaña Quant (cuantitativa) de la ventana Method Editor (Editor de método). 4 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Lo nuevo 1 en B.06.00 • Esta versión solo es compatible con el espectrómetro de masas Q TOF Agilent 6560 Ion Mobility. • Para el análisis de datos IM-MS se incluye el Navegador IM-MS Agilent MassHunter. Para ver una lista de actualizaciones hechas en las versiones anteriores, consulte la ayuda en línea. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 5 1 Dónde encontrar información Ayuda en línea Dónde encontrar información Ayuda en línea Pulse F1 Para obtener más información acerca de un panel, una ventana o un cuadro de diálogo, coloque el cursor en la ventana o el cuadro de diálogo y pulse F1. En el programa navegador Agilent MassHunter IM-MS debe hacer clic en Help (Ayuda)> Contents (Contenido). Menú de ayuda En el menú de Ayuda, acceda a la ayuda "How to (Cómo hacer)..." y a la ayuda de referencia. Documentos Tras la instalación puede encontrar estas guías yendo a la página principal de la ayuda en línea. También puede encontrar una versión en PDF de la mayor parte de los manuales en el disco de instalación, en la carpeta Manuals (Manuales). Guía de instalación Esta guía la usa el ingeniero de asistencia de Agilent para instalar el hardware y el software, configurar el instrumento y verificar el rendimiento Hay disponible una guía de instalación para el Q TOF y otra para el TOF. Guía de conceptos — Panorámica Aprenda la información básica para ayudarle a comprender el funcionamiento del hardware y del software de adquisición. Guía de familiarización con el TOF/Q TOF Realice los ejercicios para aprender a usar el hardware LC/MS TOF/Q TOF y el software de adquisición. Guía de mantenimiento Utilice esta guía para ayudar con el mantenimiento y la resolución de problemas de su LC/MS TOF Agilent o su LC/MS Q TOF Agilent. Guía de inicio rápido de MassHunter Study Manager Use esta guía para aprender a usar el software MassHunter Study Manager También puede encontrar una versión en PDF este manual en el disco de instalación de este producto, en la carpeta Manuals (Manuales). Guía de inicio rápido de MassHunter Data Acquisition Compliance Use esta guía para obtener más información sobre el software MassHunter Data Acquisition Compliance También puede encontrar una versión en PDF este manual en el disco de instalación de este producto, en la carpeta Manuals (Manuales). 6 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Dónde encontrar información Formación 1 Guía de inicio rápido del software MassHunter Quantitative Analysis Compliance Use esta guía para obtener más información sobre el software MassHunter Quantitative Analysis Compliance. (La documentación para MassHunter Quantitative Analysis se puede instalar desde el disco MassHunter Quantitative Analysis). Guía de familiarización con Quantitative Analysis Haga estos ejercicios para aprender el uso del programa Qualitative Analysis (La documentación para MassHunter Quantitative Analysis se puede instalar desde el disco MassHunter Quantitative Analysis). Guía de familiarización con Qualitative Analysis para LC/MS Haga estos ejercicios para aprender el uso del programa Qualitative Analysis (Esta guía se encuentra en el disco Qualitative Analysis). Guía de inicio rápido del software MassHunter BioConfirm Aprenda a usar el software BioConfirm (El software Agilent MassHunter BioConfirm se puede adquirir por separado). Guía de familiarización con MassHunter BioConfirm Realice los ejercicios para aprender a usar el software BioConfirm (El software Agilent MassHunter BioConfirm se puede adquirir por separado). Formación Guía de familiarización Use cualquiera de las tres guías de familiarización (Data Acquisition, Qualitative Analysis y Quantitative Analysis) para conocer el software. Guía de inicio rápido Use las guías de inicio rápido de Study Manager, Acquisition Compliance y Quantitative Analysis Compliance para conocer estos programas. DVD de información para el usuario de Report Designer Vea los vídeos y use la Guía de familiarización para aprender a personalizar un informe para los programas MassHunter Qualitative Anlaysis y MassHunter Quantitative Analysis. Cursos de formación Visite www.chem.agilent.com para ver una lista de cursos de formación para el LC/MS TOF serie 6200 y el LC/MS Q TOF serie 6500. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 7 1 Primeros pasos Primeros pasos Instalación del hardware y del software del LC/MS TOF o Q TOF Use la Guía de instalación de su instrumento para instalar el hardware y el software y verificar su rendimiento. Configuración, ejecución y análisis de muestras La siguiente hoja de ruta le muestra los pasos para configurar y ejecutar un lote de muestras desde el principio hasta el final Siga las instrucciones de las páginas siguientes para dar los primeros pasos y aprender dónde encontrar la información que le ayudará en cada etapa de esta hoja de ruta. ¡Comience aquí! 1 Ejecute el software Data Acquisition 2 Prepare el LC/MS Configuración, 3 Configure y ejecute un ejecución y método de análisis de adquisición muestras Configure y ejecute la cuantificación (opcional) 8 4 Revise los resultados y encuentre compuestos con Qual Analysis Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition 1 Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition Las siguientes instrucciones asumen que: • Se ha instalado tanto el hardware como el software. • El instrumento está configurado. Siga las instrucciones de la Guía de instalación para configurar el instrumento por primera vez y en cualquier momento en que cambie la configuración del LC. • Los módulos LC y el instrumento LC/MS están encendidos pero la bomba LC no está funcionando. Tras la instalación, verá todos los iconos del software Agilent MassHunter Workstation en su escritorio. • Para iniciar el programa Data Acquisition, haga doble clic sobre el icono Data Acquisition. Cuando se abre Data Acquisition se inician automáticamente los motores del software Si necesita reiniciarlos, haga clic con el botón derecho del ratón en el icono Acq System Launcher de la bandeja del sistema, y seleccione Start Engines. Si ha cambiado recientemente los módulos del LC, recuerde volver a configurar el instrumento Consulte la Guía de instalación para ver las instrucciones. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 9 1 Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition Las ventanas donde hace la mayor parte de su trabajo Cuando ejecuta el software Data Acquisition aparece la ventana principal. Casi todo su trabajo va a realizarlo dentro de las diferentes ventanas de esta ventana principal Estas ventanas le dan las herramientas para configurar los métodos de adquisición, ejecutar muestras en modo automático o interactivo, monitorizar el estado de los instrumentos y monitorizar las ejecuciones. Cuando se encuentre en el contexto Sintonizar, usará la ventana Tune (Sintonizar). Ventana Chromatogram Ventana Method Instrument Status Editor (Editor de (Estado de instrumento) Plot (Gráfico de cromatograma) métodos) ventana Ventana Spectrum Plot (Gráfico de espectro) Ventana Actuals (Actuales) Las ventanas Method Editor (Editor de método), Sample Run (Ejecución de muestra) y Worklist (Lista de trabajo) se solapan aquí Estas tres ventanas "comparten" este espacio Para cambiar a una ventana diferente debe hacer clic en la pestaña. Figura 1 10 Ventana principal del software Data Acquisition Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition 1 Mostrar/ocultar las ventanas En la pantalla puede mostrar solamente una ventana cada vez o todas las siete ventanas Nunca puede ocultar todas las ventanas Para mostrar u ocultar una ventana debe hacer clic en el comando del menú View (Ver). También puede ocultar una ventana haciendo clic en el icono X del ángulo superior derecho de la ventana. Cuando hace clic sobre una ventana, el título de la ventana activa cambia a un color diferente Pulse F1 para obtener ayuda para la ventana activa. También puede arrastrar el borde de una ventana para cambiar su tamaño Si hace doble clic sobre el título de la ventana, la ventana "flota" fuera de la ventana principal Puede volver a hacer doble clic sobre la barra de título para "acoplar" la ventana También puede hacer flotar y acoplar la ventana haciendo clic con el botón derecho del ratón sobre el título de la ventana y seleccionando Floating (Flotante). Ventana Instrument Status (Estado de instrumento) En esta ventana verá el estado de cada dispositivo configurado con el instrumento - On (encendido), Off (apagado) o Standby (En espera). También establece parámetros de configuración y métodos de no control para los dispositivos LC y el instrumento MS. Esta ventana muestra el estado actual de cada dispositivo tanto como texto como por su código de colores: Código de colores en la ventana de estado de instrumento Color Estado Rojo Error Amarillo No preparado Púrpura Pre-ejecución, pos-ejecución Azul Ejecutando, inyectando Verde Inactivo Gris oscuro Fuera de línea Gris claro En espera (por ejemplo, lámparas apagadas) Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 11 1 Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition Puede hacer clic en el botón ? en cualquier panel de dispositivo para obtener ayuda para dicho dispositivo. Ventana Actuals (Actuales) En esta ventana se ve el valor actual de los parámetros del instrumento seleccionado. Ventana Chromatogram Plot (Gráfico de cromatograma) En esta ventana se monitorizan los gráficos del cromatograma en tiempo real Estos gráficos pueden ser señales definidas por el usuario y/o parámetros del instrumento. Ventana Spectrum Plot (Gráfico de espectro) En esta ventana se monitoriza los gráficos de espectro en tiempo real. Ventana Method Editor (Editor de métodos) En esta ventana se introducen los parámetros de adquisición del método I. 12 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition 1 Ventana Sample Run (Ejecución de muestra) En esta ventana se introduce la información de muestras para ejecutar muestras individuales de forma interactiva, y puede iniciar una ejecución de muestras simple También puede especificar una Override DA Method (Anulación de método de AD) y seleccionar o bien Both Acquisition and DA (Tanto adquisición como AD) o DA Only (Solo AD) para el Tipo de método, y luego Data Analysis se ejecuta como parte del método. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 13 1 Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition Ventana Worklist (Lista de trabajo) En esta ventana se introduce la información de muestra para muestras múltiples Cuando ejecuta la lista de trabajo, las muestras se ejecutan automáticamente en el orden en que aparecen en la lista de trabajo Puede elegir si ejecutar Acquisition Only (Solo adquisición), ejecutar Both Acquisition and DA (Tanto adquisición como AD), o ejecutar DA Only (Solo AD) seleccionando una de estas opciones para la parte del método que ejecutar en el cuadro de diálogo Worklist Run Parameters (Parámetros de ejecución de lista de trabajo). Ventana Tune (Sintonización) En esta ventana se sintoniza el espectrómetro de masas. Puede usar uno de los algoritmos de sintonización automática o sintonizar el instrumento de forma manual La sintonización manual puede dar lugar a una sintonización menos que óptima, no obstante, si realiza una sintonización manual, Agilent le recomienda que sintonice manualmente solo la parte frontal del instrumento: fuente de iones y óptica 1. Agilent no le recomienda que sintonice manualmente los parámetros que van tras la célula de colisión. También selecciona el modo de instrumento que usar al adquirir datos, y calibra el instrumento. Si posee un Q TOF Agilent 6545 tendrá opciones adicionales para realizar una sintonización automática de pequeña molécula. 14 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 1. Ejecute el software Data Acquisition 1 Figura 2 Ventana de Sintonización de un instrumento Q TOF Agilent 6530 realizando una sintonización automática clásica. Figura 3 Ventana de Sintonización de un instrumento Q TOF Agilent 6545 rmostrando dos gráficos adicionales para la sintonización automática SWARM. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 15 1 Primeros pasos Paso 2. Prepare los módulos del LC Paso 2. Prepare los módulos del LC Lea y siga las instrucciones de la Ayuda en línea para cada una de las tareas de la lista de comprobación descritas en las páginas siguientes. 1 Conmute la corriente del LC a Waste (Desechos). Mientras pone condiciones o equilibra la columna, puede ajustar el MS TOF o Q TOF. Durante este tiempo no se quiere que el efluente de la bomba vaya al MS TOF o Q TOF, de modo que ha de cambiar la dirección de la corriente LC alejándola de la fuente de iones del MS y dirigiéndola a Desechos. Si ha conectado el LC a VWD o a DAD, aún puede monitorizar las fluctuaciones del cromatograma VWD o DAD en tiempo real antes de una ejecución. a Haga clic sobre la pestaña General de la pestaña TOF o Q-TOF en la ventana Method Editor (Editor de método). b El el cuadro de grupo LC Stream (Seg) (Corriente LC (Seg)) haga clic en Waste (Desechos). c Pulse Apply Now (Aplicar ahora). Este botón solo envía el valor actual del efluente LC al instrumento. Si pulsa Apply (Aplicar) en la barra de herramientas se envían al instrumento todos los parámetros del método. 2 Purgue la bomba del LC. Para purgar la bomba siga las instrucciones de la Guía de usuario de su bomba. 3 Condicione o equilibre la columna. Tras purgar la bomba, establezca la condición o equilibre la columna. 16 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 2. Prepare los módulos del LC 1 a Introduzca los parámetros del LC y pulse Apply (Aplicar) para descargarlos al LC. O, para seleccionar un método de condicionamiento del LC, elija uno en la lista Method (Método) en la parte superior de la ventana Data Acquisition (Adquisición de datos) o en la barra de herramientas Method Editor (Editor de método), o puede seleccionar uno en la lista que aparece al hacer clic en Method (Método) > Open (Abrir). b Haga clic con el botón derecho sobre un módulo LC en la ventana Instrument Status (Estado de instrumento) para cambiar cualquier parámetro de control que no sea del método si fuera necesario. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 17 1 Primeros pasos Paso 2. Prepare los módulos del LC c Monitorice la línea base y ajuste el gráfico para asegurarse de que la columna está equilibrada y la línea base es estable (Consulte paso 4 y paso 5 en página 18.) 4 Configure para ver los valores de los parámetros en tiempo real (actuales). A medida que prepara una ejecución y durante una ejecución, deseará ver los valores actuales de los parámetros del instrumento Puede hacerlo en la ventana Instrument Status (Estado del instrumento). a Haga clic con el botón derecho en la ventana Actuals (Actuales) para ver el comando Setup (Configurar). b Seleccione Setup (Configurar) para que aparezca la lista de Actuales disponibles para monitorización. Si ha configurado un instrumento TOF, se mostrarán los actuales para el instrumento TOF. 18 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 2. Prepare los módulos del LC 1 c Añada todos los valores de parámetros que piensa monitorizar; puede personalizar el color de fondo y el texto. También puede añadir valores máximos y mínimos a usar; si el valor no está dentro del rango definido, entonces el fondo del valor se muestra en rojo en la ventana Actuals (Actuales). d Pulse OK. 5 Configurar la presentación de los gráficos en tiempo real. A medida que establece condiciones para la columna, configura las pantallas para monitorizar el efluente. • Haga clic con el botón derecho del ratón sobre la ventana Chromatogram Plot (Gráfico del cromatograma) y seleccione Change (Cambiar). En el cuadro de diálogo Edit Signal Plot (Editar gráfico de señal) puede seleccionar múltiples señales de visualización y cambiar el rango de visualización. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 19 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Debe sintonizar el instrumento la primera vez que lo use o tras realizar mantenimiento, servicio o vaciar la bomba y reiniciarlo. Con el uso habitual frecuente no necesita sintonizarlo. Agilent recomienda que calibre el eje de masas con regularidad. La interfaz de usuario de la ventana Tune (Sintonizar) cambia según las opciones que seleccione en las pestañas Instrument State (Estado del instrumento) y Preferences (Preferencias), y según el tipo de instrumento, TOF o Q-TOF, que usted posea. En la pestaña Preferences (Preferencias), puede marcar si se muestra o no la pestaña Manual TOF Mass Calibration (Calibración de masa manual del TOF) y la pestaña Diagnostics (Diagnósticos). Si posee un 6550 Q-TOF, también puede marcar si desea usar o no el interfaz de Classic Autotune (Sintonización automática clásica). En la pestaña Instrument State (Estado del instrumento) puede seleccionar el rango de masa y el modo. Las opciones de la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración) cambian según el Rango de masa y el modo. Si posee un Agilent 6545 Q-TOF tendrá disponible la sintonización automática SWARM. La interfaz de usuario muestra las opciones disponibles para la sintonización automática SWARM. Si posee un Agilent 6545 Q-TOF y selecciona Low (1700 m/z) (Bajo) en el Rango de masa, también tendrá opciones de sintonización automática de moléculas pequeñas. Si está instatlando el instrumento, consulte la Guía de instalación para ver instrucciones sobre cómo sintonizar el instrumento por primera vez. Las siguientes instrucciones describen el proceso completo de sintonización para un instrumento que ya ha sido previamente sintonizado, comenzando por el algoritmo de Calibration / Check (Calibración / comprobación). Calibración automática clásica Antes de ejecutar un establecimiento de ganancia de detector, una sintonización estándar o una sintonización inicial, el modo de instrumento debe establecerse en rango dinámico extendido, y el rango de masa debe establecerse en estándar (3200 m/z). Tras ejecutar una de estas sintonizaciones automáticas, si desea adquirir datos con un rango de masa o modo de instrumento distinto, cambie estos valores por los valores apropiados para su análisis. Si cambia los valores de la pestaña Instrument State (Estado del instrumento) tras finalizar la sintonización automática, debe recalibrar el TOF o el Q-TOF. Si cambia el rango de masa, debe recalibrar el TOF o el Q-TOF. Solo puede ejecutar una Sintonización inicial, Sintonización estándar, Establecimiento de ganancia de detector, Sintonización de cuadripolo o Sintonización inicial de cuadripolo con una fuente compatible con todas las sintonizaciones automáticas y si el Modo de instrumento es Rango dinámico extendido. Estos botones estarán atenuados si el Modo de instrumento está seleccionado, o si se ha instalado una fuente diferente. 20 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 1 Si tiene la opción de seleccionar el Modo rebanador, se recomienda encarecidamente que seleccione Alta resolución para el Modo rebanador para obtener los mejores resultados de la sintonización. Debe seleccionar Alta resolución para el Modo rebanador antes de realzar una Sintonización automática inicial. Asimismo, solo puede ejecutar Establecimiento de ganancia del detector o una Sintonización automática inicial (para el TOF o el Cuadripolo), con el Rango de masa ajustado a Estándar (3200 m/z). Si la versión de software es B.05.01 SP1 o posterior, tras ejecutar una sintonización inicial en el Cuadripolo con el rango de masa ajustado a 3200 m/z, entonces para aplicaciones de moléculas pequeñas también debe realizar una sintonización adicional del Cuadripolo en el rango de 1700 m/z lo cual conduce a un aumento en el rendimiento para moléculas < 300 m/z. Sintonización automática SWARM Cuando sintoniza un instrumento 6545 Q-TOF se usa un algoritmo de sintonización diferente llamado SWARM. Una de las características clave de SWARM es la capacidad de encontrar un valor global óptimo para algunos de los parámetros porque se sintoniza más de un parámetro al mismo tiempo. La nueva sintonización automática usa tanto la Optimización de Enjambre de Partículas (PSO) como un algoritmo simplex dentro de los límites físicos del espectrómetro de masas. • Para un parámetro bien conocido, la sintonización automática usa un algoritmo simplex para aumentar la velocidad. • Para conductas desconocidas se usa PSO. • Entre el ajuste fino y grueso se intercambian los algoritmos PSO y simplex. • Todos los parámetros están ligados al conocimiento de la física iónica, para limitar el espacio de búsqueda. La teoría de la espectrometría de masas está incorporada al algoritmo para que durante la optimización no tenga lugar almacenamiento ni bloqueo de iones. Para más información, consulte la Guía de conceptos. Solo puede ejecutar una Sintonización de sistema, y Establecimiento de ganancia de detector con una fuente compatible con todas las sintonizaciones automáticas y si el Modo de instrumento es Rango dinámico extendido. Estos botones estarán atenuados no aparecerán si el Modo de instrumento está seleccionado, o si se ha instalado una fuente diferente. Si tiene la opción de seleccionar el Modo rebanador, se recomienda encarecidamente que seleccione Alta resolución para el Modo rebanador para obtener los mejores resultados de la sintonización. Debe seleccionar Alta resolución para el Modo rebanador antes de realzar una Sintonización de sistema. Asimismo, solo puede ejecutar Establecimiento de ganancia del detector o Sintonización de sistema (para el TOF o Cuadripolo), con el rango de masa ajustado a 3200 m/z. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 21 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Fuentes compatibles Tabla 1 Fuentes compatibles con todas las sintonizaciones automáticas Número de modelo de instrumento Fuentes compatibles con todas las sintonizaciones automáticas 6224 TOF ESI, ESI Dual 6230 TOF ESI, ESI Dual, AJS ESI, AJS ESI Dual 6520B Q-TOF ESI, ESI Dual 6530A, 6530B Q-TOF ESI, ESI Dual, AJS ESI, AJS ESI Dual 6538 Q-TOF ESI, ESI Dual 6540A, 6540B, 6545 Q-TOF ESI, ESI Dual, AJS ESI, AJS ESI Dual 6550 ESI, ESI Dual, AJS ESI, AJS ESI Dual Para los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Puede realizar una Calibración / Comprobación de masa, y Sintonización rápida, si está disponible, con todos los estados de instrumento y las siguientes fuentes: • ESI • AJS ESI (Agilent Jet Stream ESI) • ESI Dual • AJS ESI Dual (Agilent Jet Stream ESI dual) • Multimodo • APPI • APCI No puede realizar ninguna de las sintonizaciones automáticas si la fuente es nanoESI, nanoESI Dual, HPLC-Chip MALDL o GC-QTOF. Cambio rápido de polaridad 22 Para un Agilent 6545 Q-TOF, si Cambio rápido de polaridad está habilitado, solo puede ejecutar la sintonización de Calibración / Comprobación de masa o la Sintonización de sistema de cambio rápido de polaridad. Para el TOF y otros instrumentos Q-TOF solo puede ejecutar Calibración / Comprobación de masa o Sintonización automática inicial de cambio rápido de polaridad. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 1 Disolución de la mezcla de sintonización ESI-L Si su instrumento es un Agilent 6550A, 6545A, 6540A o 6530A tanto con una fuente Agilent Jet Stream ESI o Dual AJS ESI la sintonización automática puede fallar a menos que diluya la mezcla de sintonización. Para todos los demás modelos puede ser necesario diluir la mezcla de sintonización bajo ciertas condiciones. Cuando se sintoniza en polaridad de ión negativo, diluya la mezcla de sintonización para calibrar de forma adecuada. Cuando se sintoniza en polaridad de ión positivo, diluya la mezcla de sintonización si no consigue una calibración correcta. Las instrucciones para diluir la mezcla de sintonización se hallan en la Guía de instalación y en la ayuda en línea. Q-TOF Tabla 2 Disolución de la mezcla de sintonización para cada tipo de sintonización Tipo de sintonización 6530A con fuente AJS ESI Dual o 6540 6520B o 6530 con fuente ESI Dual Sintonización de TOF con ión positivo mezcla de sintonización diluida a 1:10 mezcla de sintonización no diluida Sintonización de TOF con ión negativo mezcla de sintonización diluida a 1:40 mezcla de sintonización no diluida sintonización de cambio de polaridad con ión positivo mezcla de sintonización no diluida mezcla de sintonización no diluida sintonización de cambio de polaridad con ión negativo mezcla de sintonización no diluida mezcla de sintonización no diluida Sintonización de Cuadripolo con ión positivo mezcla de sintonización no diluida mezcla de sintonización no diluida Sintonización de Cuadripolo con ión negativo mezcla de sintonización no diluida mezcla de sintonización no diluida Si su instrumento es un G6538A, use la mezcla de sintonización no diluida. Si su instrumento es un Agilent 6545A, use la mezcla de sintonización diluida a 1:10 en ambas polaridades. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 23 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Si su instrumento es un Agilent 6550A, puede evitar eluso de disoluciones separadas desmarcando el cuadro de verificación Always perform only Quick Calibration (Realizar siempre verificación rápida solamente) de la pestaña Preferences (Preferencias). Para el Agilent 6550A con la fuente Agilent Jet Stream ESI Dual, sintonice con una mezcla de sintonización diluida a 1:10 en ambas polaridades. No se necesita disolución adicional para el modo negativo si ha desmarcado esta casilla de verificación. El G6530 con fuente Agilent Jet Stream ESI Dual usa la mezcla de sintonización diluida a 1:10 en modo positivo y a 1:40 en modo negativo. Consulte la ayuda en línea o la Guía de instalación para más información. TOF Si su instrumento es un 6230 TOF la mezcla de sintonización debe diluirse con las fuentes AJS ESI o AJS ESI Dual tanto para iones positivos como negativos. Use la disolución a 1:10 para la sintonización de los iones positivos y a 1:40 para iones negativos. Para el 6224 TOF con la fuente ESI Dual no diluya la mezcla de sintonización; al diluir la mezcla de sintonización y sintonizar para ionnes positivos surgen problemas. Sintonización del MS TOF y Q-TOF MS excepto para el 6545 Q-TOF Sintonización automática clásica 1 En la lista Context (Contexto) seleccione Tune (Sintonizar). Aparece la ventana Tune (Sintonización). Las ventanas Instrument Status (Estado de instrumento), Actuals (Actuales) y Tune (Sintonización) estarán disponibles en el contexto Tune (Sintonización). Puede seleccionar sintonizar el Cuadripolo, el TOF o ambas partes del MS. Las sintonizaciones automáticas iniciales son adecuadas para instalaciones iniciales de sistemas, tras la retirada o sustitución de componentes de las ópticas de iones o del analizador de masas, o si las sintonizaciones estándar no se pueden completar con éxito. Si se acaba de instalar el software y se ha completado una sintonización automática tal como se describe en la Guía de instalación, vaya a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37. 24 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Figura 4 1 Pestaña Sintonización y calibración para un Agilent Q-TOF serie 6530 Las opciones Cuadripolo, TOF, y Ambos solo están disponibles si ha configurado un instrumento Q-TOF. 2 (opcional) Haga clic sobre la pestaña Preferences (Preferencias). 3 (opcional) Marque si desea o no que el sistema ajuste automáticamente la abundancia de los iones calibrantes. Esta característica solo está disponible en los modelos 6530A/B. Es una característica avanzada, y posiblemente no necesite cambiar este ajuste. Si marca la casilla de verificación Adjust abundances for optimal calibration (Ajustar abundancias para calibración óptima) el sistema ajusta automáticamente el voltaje del fragmentador para reducir la abundancia para masas de calibración si se detecta que dichas masas están fuera del rango de 50 a 650K. Si el voltaje del fragmentador no se puede reducir lo suficiente para que el nivel de la abundancia baje de 650K, el sistema le avisará de que diluya el calibrante y que luego repita de nuevo la calibración para sintonización automática. 4 (opcional) Si el instrumento es un G6550A Q-TOF iFunnel, desmarque el cuadro de verificación Always perform only Quick Calibration (Realizar siempre calibración rápida solamente). No se necesita disolución adicional para el modo negativo si ha desmarcado esta casilla de verificación. 5 (opcional) Marque el cuadro de verificación Pause Between Auto Tune (Swapping Calibrant) (Pausa entre sintonización automática (Cambio de calibrante)) si utiliza una disolución de calibración diferente para sintonizaciones automáticas positiva y negativa. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 25 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 6 Si tiene un instrumento 6550 Q-TOF y desea ejecutar aplicaciones de moléculas pequeñas, debe establecer el valor Quad AMU antes de ejecutar cualquiera de los procedimientos de sintonización automática. Si ejecuta aplicaciones de moléculas pequeñas, también debe seleccionar Low (1700 m/z) (Bajo) en el rango de masas de la pestaña State (Estado) del instrumento. a Haga clic sobre la pestaña Manual Tune (Sintonización manual). b Haga clic sobre la pestaña Quad (Cuadripolo) de la pestaña Manual Tune (Sintonización manual). c Si va a sintonizar en polaridad positiva haga lo siguiente: Pulse el botón de polaridad Positiva. Escriba 100 en el cuadro Quad AMU. Pulse el botón Apply (Aplicar). Debe pulsar Apply (Aplicar) antes de cambiar a polaridad negativa para guardar el nuevo valor. d Si va a sintonizar en polaridad negativa haga lo siguiente: Pulse el botón de polaridad negativa. Escriba 90 en el cuadro Quad AMU. Pulse el botón Apply (Aplicar). 7 Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). 8 Seleccione el Rango de masa. 9 Seleccione o bien Disabled (Deshabilitado) o Enabled (Habilitado) para Fast Polarity Switching (Cambio rápido de polaridad). 10 Si está disponible, seleccione el Modo rebanador. Puede pulsar o bien Alta resolución or Alta sensibilidad. Si selecciona cualquiera de las opciones puede ejecutar la Calibración / Comprobación de masa. Se recomienda encarecidamente que seleccione Alta resolución para el Modo rebanador para otros algoritmos de sintonización automática. Debe seleccionar Alta resolución para el Modo rebanador antes de realzar una Sintonización automática inicial. 11 Seleccione el modo. Si desea que esté disponible el mayor número de opciones de sintonización, seleccione Rango dinámico extendido (2 GHz). 12 Pulse Apply (Aplicar). Debe pulsar Apply (Aplicar) para que estos cambios se envíen al instrumento. Las opciones de la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración) no se actualizan hasta que pulse Apply (Aplicar). 26 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Figura 5 1 Pestaña Instrument State (Estado de instrumento) 13 Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). 14 Marque la polaridad que va a usar al sintonizar en la pestaña Sintonización y calibración. Puede marcar Positiva, Negativa o ambas. Si ha seleccionado Habilitado en Cambio rápido de polaridad, no necesita seleccionar una polaridad. Figura 6 Pestaña Autotune (Sintonización automática) para un Agilent Time-of-Flight serie 6200 15 Si posee un instrumento Q-TOF seleccione si desea sintonizar el Cuadripolo, el TOF, o Ambos. El software sintoniza automáticamente las partes del instrumento en orden correcto, así que seleccione Ambos si desea sintonizar ambas partes. Si va a sintonizar un 6530 con fuente AJS ESI Dual, un 6538 o un 6540, no seleccione Ambos. Debe cambiar la mezcla de sintonización entre la sintonización del TOF y del Cuadripolo, así que ha de sintonizar primero el TOF y luego sintonizar el Cuadripolo. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 27 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 16 Si está disponible, seleccione Calibración / Comprobación de masa para calibrar y comprobar la calibración y optimización de masa. Luego, seleccione Comenzar calibración de masa de TOF o Comenzar comprobación de Cuadripolo y calibración de masa de TOF (la sintonización de calibración / comprobación de masa tarda unos minutos en completarse para la sintonización del TOF. La sintonización de calibración / comprobación de masa tarda también entre 2 y 5 minutos para el Cuadripolo. Si el sistema se detiene entre sintonizaciones automáticas para permitirle cambiar las disoluciones de calibración, cambie la mezcla de sintonización por una diluida para la próxima sintonización tal como se describe en la ayuda en línea y en la Guía de instalación. Repita Calibración / Comprobación de masa tras diluir la disolución de calibración si las abundancias son mayores que 480,000 para cualquiera de los iones de calibración para el 6538/6540 Q-TOF o por encima de aproximadamente 650,000 para otros instrumentos Q-TOF y TOF. El instrumento Agilent 6550 Q-TOF siempre usa la disolución a 1:10. Si los resultados de la sintonización de comprobación son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37. Si los resultados de la sintonización de comprobación no son aceptables, continúe con paso 17. 17 Si seleccionó Habilitado para Cambio rápido de polaridad en la pestaña Instrument State (Estado de instrumento), seleccione FPS Initial Auto Tune (Sintonización automática inicial de CRP). Esta opción y la de Calibración / Comprobación de masa son las únicas disponibles si se ha habilitado Cambio rápido de polaridad. Si los resultados de la sintonización automática inicial de CRP son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37 Si los resultados de su sintonización aún son inaceptables, póngase en contacto con Asistencia de Campo de Agilent. 18 Si está disponible, seleccione Quick Tune (Sintonización rápida) para usar un conjunto de parámetros limitado para sintonizar el MS automáticamente. Luego, seleccione Start TOF Quick Tune (Comenzar sintonización rápida del TOF) (La sintonización rápida tarda entre 7 y 10 minutos en completarse). No puede ejecutar una sintonización rápida si ha marcado Cuadripolo o Ambos como la parte del instrumento que sintonizar. 28 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 1 Si el sistema se detiene entre sintonizaciones automáticas para permitirle cambiar las disoluciones de calibración, cambie la mezcla de sintonización por una diluida para la próxima sintonización tal como se describe en la ayuda en línea y en la Guía de instalación. Repita Sintonización rápida tras diluir la disolución de calibración si las abundancias son mayores que 480,000 para cualquiera de los iones de calibración para el 6538/6540 Q-TOF o por encima de aproximadamente 650,000 para otros instrumentos Q-TOF y TOF. Para el Agilent 6550, la disolución de calibración siempre está diluida y no hace falta repetir la Sintonización rápida. Si los resultados de la sintonización rápida son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37. Si los resultados de la sintonización rápida no son aceptables, continúe con paso 19. 19 Ejecute una Sintonización estándar para utilizar incluso más parámetros. Esta sintonización tarda entre 10 y 15 minutos en la parte TOF del instrumento, y de 10 a 15 minutos en la parte cuadripolo del instrumento. La fuente que se usa debe ser compatible con todas las sintonizaciones automáticas al ejecutar una sintonización estándar. La fuente ESI Dual es compatible con todas las sintonizaciones automáticas en todos los instrumentos. Consulte “Fuentes compatibles con todas las sintonizaciones automáticas” en página 22 para ver una lista completa de fuentes compatibles con todas las sintonizaciones automáticas. Solo puede ejecutar una sintonización estándar si ha selecionado Rango dinámico extendido como Modo de instrumento en la pestaña Estado de instrumento. a Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). b Para el Modo de instrumento, seleccione Rango dinámico extendido. c Seleccione Deshabilitado para Cambio rápido de polaridad. d Pulse Apply (Aplicar). e Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). f Marque la polaridad o polaridades que va a usar al sintonizar. g Pulse Sintonización estándar. h Pulse Comenzar sintonización estándar del TOF o Comenzar sintonización estándar del QTOF. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 29 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Debe usar una fuente compatible con todas las sintonizaciones automáticas al ejecutar una sintonización estándar. La fuente ESI Dual es compatible con todas las sintonizaciones automáticas en todos los instrumentos. Consulte “Fuentes compatibles con todas las sintonizaciones automáticas” en página 22 para ver una lista completa de fuentes compatibles con todas las sintonizaciones automáticas. Si el sistema se detiene entre sintonizaciones automáticas para permitirle cambiar las disoluciones de calibración, cambie la mezcla de sintonización por una diluida para la próxima sintonización tal como se describe en la ayuda en línea y en la Guía de instalación. Si los resultados de la sintonización estándar no son aceptables, continúe con paso 20. Si la sintonización estándar produce resultados inaceptables, puede ejecutar una sintonización automática inicial. Tras realizar la sintonización automática inicial, debe ajustar la presión del gas de la célula de colisión. Consulte la Ayuda en línea para más información. Si esto tampoco consigue resultados aceptables, póngase en contacto con Asistencia de Campo de Agilent. Instrumento Tiempo para sintonización inicial (TOF) Agilent 6538A, 6540A, y 6550A Q-TOF hasta 60 minutos para cada polaridad Otros instrumentos TOF y Q-TOF hasta 30 minutos para cada polaridad Lleva aproximadamente entre 50 y 60 minutos ejecutar una sintonización inicial en la parte Cuadripolo del instrumento. Si desea usar valores personalizados de parámetros de sintonización, puede realizar una sintonización manual. 30 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 1 20 Establezca el Rango de masa y el Modo de instrumento que desea usar para adquirir datos. a Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). b Seleccione el Rango de masa adecuado. c Seleccione el Modo de instrumento adecuado. d Pulse Apply (Aplicar). e Si selecciona Bajo (1700 m/z) y ejecuta la sintonización de cuadripolo o sintonización inicial de cuadripolo con estándar (3200 m/z) seleccionado en rango de masa, entonces debe ejecutar una sintonización de cuadripolo para optimizar para moléculas pequeñas. 21 Recalibre y compruebe los parámetros de sintonización, si ha cambiado el rango de masa o el modo de instrumento. La calibración se realiza cuando pulsa el botón Calibración / Comprobación de masa, el botón Sintonización rápida, el botón Sintonización estándar y el botón Sintonización inicial. Si solo ha completado una de estas tareas, y si alguna de las siguientes afirmaciones es cierta, solo necesita recalibrar y comprobar: • Ha cambiado el Modo de instrumento en la pestaña Estado de instrumento. • Ha cambiado el Rango de masa en la pestaña Estado de instrumento. • El pico de abundanciias está por encima de aproximadamente 480,000 para 6538/6540 Q-TOF o por encima aproximadamente de 650,000 para otros instrumentos Q-TOF (excepto para el 6550) y TOF. Use siempre la disolución a 1:10 para el Agilent 6550. Antes de recalibrar debe diluir el calibrante de sintonización. Para conseguir una exactitud óptima de masa debe recalibrar. a Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). b Marque en esta pestaña la polaridad o polaridades deseadas. c Seleccione la opción Calibración / Comprobación de masa. Tras el final de una sintonización se generan automáticamente los informes de sintonización. Consulte la Guía de conceptos para más información sobre los instrumentos MS TOF y Q-TOF. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 31 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Sintonización del Espectrómetro de masas Agilent 6545 Q-TOF Sintonización automática SWARM El espectrómetro de masas Agilent 6545 Q-TOF utiliza la sintonización automática SWARM. Las opciones disponibles en la pestaña Sintonización y calibración son distintas para este instrumento. La sintonización de sistema es la Sintonización automática inicial SWARM que comienza con todos los valores predeterminados e incluye la sintonización del detector. Puede realizar una sintonización de sistema tras seleccionar estándar (3200 m/z) como rango de masa. Las sintonizaciones de sistema son adecuadas para instalaciones iniciales de sistemas, tras un ciclo de ventilación, tras la retirada o sustitución de componentes de las ópticas de iones o del analizador de masas, o si la calibración / comprobación de masa o la sintonización de transmisión no se pueden completar con éxito. Si selecciona bajo (1700 m/z) como rango de masa, no puede realizar una sintonización de sistema. Puede realizar una Sintonización de transmisión que no incluye la sintonización del detector y se parece más a la sintonización estándar en sintonización automática clásica. La sintonización de transmisión debe realizarse con tanta frecuencia como sea preciso (por ejemplo, cuando se analiza una clase distinta de muestras). La mejor práctica es realizar la sintonización de transmisión comenzando desde la última sintonización de sistema del Q-TOF o de la última sintonización del detector, ya que los parámetros del detector y de la resolución no se incluyen en estas sintonizaciones. 1 En la lista Context (Contexto) seleccione Tune (Sintonizar). Aparece la ventana Tune (Sintonización). Las ventanas Instrument Status (Estado de instrumento), Actuals (Actuales) y Tune (Sintonización) estarán disponibles en el contexto Tune (Sintonización). Observe que puede seleccionar sintonizar el Cuadripolo, el TOF o ambas partes del espectrómetro de masa. Si se acaba de instalar el software y se ha completado una sintonización automática tal como se describe en la Guía de instalación, vaya a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37. 32 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Figura 7 1 Pestaña Sintonización y calibración para un Agilent Q-TOF serie 6545 2 Desmarque la casilla de verificación Pausa entre sintonizaciones automáticas (para cambio de disolución de calibración). 3 Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). 4 Seleccione el Rango de masa. Si tiene un Agilent 6545 Q-TOF y selecciona Bajo (1700 m/z), en la pestaña Sintonización y calibración aparecen opciones adicionales disponibles para sintonización de masas bajas. 5 Seleccione o bien Disabled (Deshabilitado) o Enabled (Habilitado) para Fast Polarity Switching (Cambio rápido de polaridad). 6 Si está disponible, seleccione el Modo rebanador. Puede pulsar o bien Alta resolución or Alta sensibilidad. Si selecciona cualquiera de las opciones puede ejecutar la Calibración / Comprobación de masa. Se recomienda encarecidamente que seleccione Alta resolución para el Modo rebanador para otros algoritmos de sintonización automática. Debe seleccionar Alta resolución para el Modo rebanador antes de realzar una Sintonización de sistema. 7 Seleccione el modo. Si desea que esté disponible el mayor número de opciones de sintonización, seleccione Rango dinámico extendido (2 GHz). 8 Pulse Apply (Aplicar). Debe pulsar Apply (Aplicar) para que estos cambios se envíen al instrumento. Las opciones de la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración) no se actualizan hasta que pulse Apply (Aplicar). Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 33 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Figura 8 Pestaña Instrument State (Estado de instrumento) 9 Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). 10 Marque la polaridad. Puede marcar Positiva, Negativa, o ambas casillas de verificación. Si ha seleccionado Habilitado para Cambio rápido de polaridad, estas casillas de verificación no estarán disponibles. 11 Haga clic sobre la parte del Q-TOF que se sintonizará. Puede seleccionar cuadripolo, TOF, o Ambos. Si ha seleccionado Habilitado para Cambio rápido de polaridad, estas casillas de verificación no estarán disponibles. 12 Si ha seleccionado Bajo (1700 m/z) como rango de masa, entonces seleccione el tipo de sintonización automática de masa baja que se realizará. Si elige cuadripolo o Ambos, la sintonización automática de masa baja de 50 - 1700 m/z se ejecuta automáticamente, y no puede pulsar en ninguna de las otras opciones. 13 Si pulsa en 50 - 250 m/z o en 50 - 750 como el tipo de sintonización automática de masa baja que realizar, marque o desmarque la casilla de verificación Fragile Ions (Iones frágiles). Es aconsejable marcar esta casilla cuando se espera la presencia de moléculas frágiles. Ejemplos de moléculas frágiles incluyen aquellas moléculas que muestran características lábiles tales como muchos metabolitos y glicanos. 34 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 1 Las opciones de esta pestaña solo están disponibles cnado selecciona Bajo (1700 m/z) para el rango de masa y el modo Rango dinámico extendido. Ambas opciones se hallan en la pestaña Estado de instrumento. 14 Pulse Comenzar calibración de masa de TOF o Comenzar comprobación de cuadripolo y calibración de masa de TOF. La duración de cada sintonización de comprobación es de aproximadamente 30 segundos. Si los resultados de la sintonización de comprobación son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37. Si los resultados de la sintonización de comprobación no son aceptables, continúe con paso 15. 15 Si está disponible, pulse Sintonización de transmisión. Pulse Comenzar sintonización de transmisión del TOF o Comenzar sintonización de transmisión del QTOF. La duración de cada Sintonización de transmisión es aproximadamente de entre seis y diez minutos. Debido a que es un proceso rápido, se recomienda realizar sintonizaciones de transmisión de forma habitual. Las sintonizaciones de moléculas pequeñas están diseñadas para una sensibilidad incrementada y pueden producir pequeñas pérdidas de resolución para masas que estén fuera de la ventana especificada. Si la resolución obtenida es insuficiente para la aplicación, realice una sintonización en un rango de m/z mayor. Los iones en valores de m/z más altos que la ventana de masa especificada se reducen comparados con las sintonizaciones de transmisión con tamaños de ventana mayores. Si la casilla de verificación Iones frágiles está marcada, el voltaje del fragmentador se reduce para minimizar la fragmentación. Esto puede dar lugar a una señal más baja de iones calibrantes comparada con la opción de sintonización no frágil, pero en la aplicación debe observarse una transmisión aumentada de iones frágiles. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 35 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Si los resultados de la sintonización de transmisión son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.” en página 37. Si los resultados de la sintonización de transmisión no son aceptables, continúe con paso 16. 16 Pulse Sintonización de sistema. Si esta opción no está disponible, haga lo siguiente: a Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). b Seleccione Estándar (3200 m/z) en el rango de masa. c Pulse Apply (Aplicar). d Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). e Pulse Sintonización de sistema. 17 Pulse Comenzar sintonización de sistema del TOF o Comenzar sintonización de sistema del QTOF. Si los resultados de la sintonización de sistema no son aceptables, póngase en contacto con su ingeniero de asistencia de campo local. Calibración del eje de masa Durante la calibración, en la fuente se infunde una muestra que contiene masas conocidas, y se miden los tiempos de vuelo actuales para iones de masas conocidas. Estos tiempo y masas exactas se usan para calcular coeficientes de calibración actualizados. Este proceso asegura asignaciones de masas exactas para elementos desconocidos. Agilent recomienda que haga esto con regularidad. La calibración de masa se realiza cuando pulsa el botón Calibración / Comprobación de masa, el botón Sintonización rápida, el botón Sintonización estándar y el botón Sintonización automática inicial. Si tiene un 6545, la calibración de masa se realiza cuando pulsa el botón Calibración / comprobación de masa, el botón Sintonización de transmisión, o el botónSintonización de sistema. Solo necesitará recalibrar y comprobar la sintonización si: • Ha cambiado el Modo de instrumento en la pestaña Estado de instrumento. • Ha cambiado el Rango de masa en la pestaña Estado de instrumento. • Ha cambiado el Modo rebanador. 36 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF 1 1 En la Combo Bar (Barra combinada), seleccione Tune (Sintonización) en el cuadro combinado Context (Contexto). 2 Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). 3 Marque Positivo o Negativo o ambos. 4 Seleccione la opción Calibración / Comprobación de masa. 5 Pulse el botón Comenzar comprobación de cuadripolo y calibración de masa del TOF o el botón Comenzar calibración de masa del TOF. Observe que si tiene un 6545 Q-TOF, y selecciona la opción 50 - 250 m/z se usan los iones calibrantes por debajo de 100 m/z. Conmute la corriente del LC a MS. Tras establecer las condiciones de la columna y sintonizar el MS TOF o Q-TOF, debe conmutar la corriente del LC desde Desechos a MS. a En la lista Contexto seleccione Acquisition (Adqusición). Debe responder a varias preguntas al cambiar del contexto Sintonizar al contexto Adqusición. b Compruebe que se ha seleccionado la pestaña General de la pestaña TOF o Q-TOF en la ventana Editor de método. c El el cuadro de grupo LC Stream (Seg) (Corriente LC (Seg)) haga clic en MS. d Pulse Apply Now (Aplicar ahora) en la pestaña General. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 37 1 Primeros pasos Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF Monitorice la línea de base del MS y los gráficos de espectro • Si no ha monitorizado la línea de base del LC con un VWD o un DAD, asegúrese de que la línea de base del TOF o del Q-TOF es estable, y que no aparecen en el gráfico espectros de intensidad que pueda interferir. • Si ha monitorizado la línea de base del LC con un VWD o un DAD, cambie a los gráficos por defecto del TOF o Q-TOF. a Haga clic con el botón derecho del ratón sobre el gráfico del cromatograma y seleccione Change (Cambiar). b Seleccione la señal del MS y pulse OK. Consulte el libro de registro del sistema para ver eventos y errores A medida que prepara el instrumento, puede encontrarse con un error que desee solucionar. Esto lo hace mediante el Visor de registros del sistema (System Logbook Viewer). • Haga clic sobre el icono Log (Registro) de la barra de herramientas de la ventana Data Acquisition (Adquisición de datos) y revise los eventos registrados. • O hacer clic con el botón derecho del ratón en el icono de la barra de tareas del sistema. En primer lugar, seleccione Enable Notification (Permitir notificación). Luego haga clic con el botón derecho en el icono LOG y seleccione Configure (Configurar). El sistema le podrá notificar los nuevos errores y avisarle mostrándole mensajes desde la barra de tareas. 38 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método 1 Paso 4. Configure y ejecute un método Un método del software Agilent MassHunter Workstation para un TOF o un Q-TOF puede contener parámetros de adquisición, parámetros de análisis cualitativo, parámetros de análisis cuantitativo o de los tres tipos. En el método de Data Acquisition usted puede especificar si ejecutar o no un método de Qualitative Analysis y si ejecutar o no una automatización de Quantitative Analysis. También especificará si el método de Qualitative Analysis y el de Quantitative Analysis o enlazarlos al método de Data Acquisition. Cuando ejecute múltiples muestras en una lista de trabajo con este método .m puede especificar si ejecutar tanto adquisición de datos y análisis de datos o si ejecutar solamente una de las dos opciones. Si ejecuta una única muestra en el programa Data Acquisition se realizan tanto adquisión como análisis de datos. Si selecciona ejecutar tanto adquisición de datos como análisis de datos en una lista de trabajo, entonces el método de análisis de datos sigue automáticamente a la adquisición si marca la casilla de verificación Qual Automation (Automatización cualitativa) o la casilla Quant Automation (Automatización cuantitativa) en la pestaña DA de la ventana Method Editor (Editor de método). También puede ejecutar un método para producir solo datos sin procesar (solo adquisición) o volver a procesar los datos con un método que contenga solo parámetros de análisis cualitativo o cualitativo (solo análisis de datos). En este paso aprenderá como configurar el método con solo los parámetros de adquisición, solo con parámetros de análisis cualitativo y con una combinación de parámetros de adquisición y de análisis cualitativo. Lea y siga las instrucciones de la Ayuda en línea para cada una de las tareas descritas en las páginas siguientes. Configuración de un método con parámetros de adquisicíón Realice el Ejercicio 1 y el Ejercicio 2 de la Guía de familiarización con el TOF/Q-TOF para aprender a configurar y ejecutar un método con solo parámetros de adquisición. Antes de editar o ejecutar un método, establezca las opciones en la pestaña Instrument State (Estado de instrumento) en la ventana Tune (Sintonización). Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 39 1 Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método • Escriba los valores y ajustes para cada una de las siguientes pestañas. • (opcional) Si desea descargar los ajustes al instrumento, haga clic en Apply (Aplicar) en la barra de herramientas. • Para guardar el método tras introducir los parámetros, haga clic en Method (Método) > Save (Guardar) o Method (Método) > Save As (Guardar como). • Escriba un nombre para el método en el cuadro Method (Método) y pulse OK. 1 En la lista Contexto seleccione Acquisition (Adqusición). 2 Introduzca los valores de los parámetros del LC. Escriba los valores de todos los módulos del LC configurados para el instrumento. 3 Configure para cambiar los parámetros del TOF y del Q-TOF con segmentos y escaneados: a Pulse la pestaña TOF o Q-TOF en la ventana Method Editor (Editor de método). b Para añadir un segmento, haga clic con el botón derecho del ratón en la sección Time Segment (Segmento de tiempo) y seleccione Add Time Segment (Añadir segmento de tiempo). El segmento de tiempo usa las 40 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método 1 entradas de parámetros que muestran (seg) al lado de sus nombres. Estos parámetros pueden cambiarse para cada segmento de tiempo. c Para añadir un experimento, haga clic con el botón derecho del ratón en la seccíon Experiment # (Nº de experimento) y pulse Add Experiment (Añadir experimento). El experimento usa las entradas de parámetros que muestran (Expr) al lado de sus nombres. Estos parámetros pueden cambiarse para cada experimento. d Introduzca los parámetros para cada segmento y experimiento. Cuando añade un nuevo segmento de tiempo, los parámetros del segmento de tiempo seleccionado se usan como valores predeterminados para el nuevo segmento de tiempo. Cuando añade un nuevo experimento, los parámetros del experimento de la lista se usan como valores predeterminados para el nuevo experimento. La pestaña Advanced Parameters (Parámetros avanzados) solo está disponible si tiene usted un Q-TOF de movilidad de iones. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 41 1 Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método Consulte el capítulo 3 de la Guía de conceptos para ver una explicación de cómo y por qué se usan segmentos de tiempo y experimentos. 4 Introduzca los valores de los parámetros del TOF o del Q-TOF. a Pulse la pestaña General e introduzca cualquier parámetro general que desee cambiar. b Pulse la pestaña Source (Fuente) e introduzca cualquier valor de fuente que desee cambiar. c Haga clic sobre la pestaña Acquisition (Adquisición). d Seleccione el modo de funcionamiento para el LC/MS Q-TOF Modo MS , modo Auto MS/MS (MS/MS automático) o modo Targeted MS/MS (MS/MS dirigido). Si tiene configurado un TOF, solo puede usar modo MS. Dependiendo del modo seleccionado tendrá disponibles diferentes parámetros. Para saber más sobre estos parámetros y el modo en que influyen en los resultados, consulte el Capítulo 3 de la Guía de conceptos o la ayuda en línea. e Introduzca cualquier valor que desee cambiar en la pestaña Acquisition (Adquisición). 42 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método 1 f Pulse la pestaña Ref Mass para configurar la corrección de masa de referencia. g Pulse la pestaña Chromatogram (Cromatograma) para configurar el cromatograma que se dibujará durante una ejecución. h Pulse la pestaña Advanced Parameters (Parámetros avanzados) para establecer los parámetros de movilidad de iones. 5 Configure los parámetros de análisis de datos. En la pestaña DA puede especificar los parámetros de análisis cualitativo y los de análisis cuantitativo. Para configurar los parámetros de Qualitative Analysis, haga lo siguiente: a Pulse la pestaña DA en el editor de método. b En la pestaña Qual, marque la casilla de verificación Qual Automation. c Pulse el botón Link (Enlazar) o Copy (Copiar) dependiendo si desea usar siempre la versión más reciente del método Qualitative Analysis o copiar el método Qualitative Analysis actual y guardarlo en el método Data Acquisition para futuro uso. Si pulsa Copy (Copiar), el método introducido en el cuadro Change to Method (Cambiar a método) se copia al método Data Acquisition cuando se guarda el método Data Acquisition. d Pulse el botón para seleccionar el método Qualitative Analysis. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 43 1 Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método Consulte la ayuda en línea del programa Qualitative Analysis para aprender a configurar parámetros de automatización para el programa Qualitative Analysis. Para configurar los parámetros de Quantitative Analysis, haga lo siguiente: a Pulse la pestaña DA en el editor de método. a Pulse la pestaña Quant. b En la pestaña Quant, marque la casilla de verificación Quant Automation. c Pulse el botón Link (Enlazar) o Copy (Copiar) dependiendo si desea usar siempre la versión más reciente del método Quantitative Analysis o copiar el método Quantitative Analysis actual y guardarlo en el método Data Acquisition para futuro uso. Si pulsa Copy (Copiar), el método introducido en el cuadro Change to Method (Cambiar a método) se copia al método Data Acquisition cuando se guarda el método Data Acquisition. d Pulse el botón para seleccionar el método Quantitative Analysis. e (opcional) Marque la casilla de verificación Generate Report (Generar informe). Si marca esta casilla, también debe seleccionar un archivo de plantilla para usar y las ubicaciones a las que enviar el informe. 44 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método 1 Consulte la ayuda en línea del programa Quantitative Analysis para aprender a configurar parámetros de automatización para el programa Quantitative Analysis. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 45 1 Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método Configuración y ejecución de muestras interactivas. 1 Haga clic sobre la ventana Sample Run (Ejecutar muestras). 2 Introduzca la información tal como Nombre de muestra, el Nombre de archivo de datos y la Ruta. 3 Introduzca información en la lista Additional Information (Información adicional). Puede cambiar el valor de los parámetros en la lista Additional Information (Información adicional). Desde esta ventana puede ejecutar un método de análisis de datos seleccionando Tanto adquisición como AD o Solo AD para el Tipo de método. Además tiene que establecer Anulación método AD para indicar qué método de AD (análisis de datos) ejecutar. Un método puede contener parámetros de adquisición de datos, parámetros de análisis de datos, o ambos tipos. Un método de análisis de datos es un método que contiene parámetros de adquisición de datos con la casilla de verificación Qual Automation marcada en la pestaña Qual o la casilla de verificación Quant Automation marcada en la pestaña Quant. 4 Para comenzar la ejecución de una muestra única, pulse el botón Ejecutar ( ) de la barra de herramientas Ejecutar muestra o el botón Ejecutar de la barra de herramientas principal. Puede ejecutar la muestra única tanto en modo bloqueado como desbloqueado. Cuando el modo está bloqueado, nadie puede cambiar el método ni los parámetros de la muestra durante una ejecución. Tampoco se puede sobreescribir este archivo de datos en el programa Data Acquisition. El botón de la barra de herramientas principal indica que el modo de bloqueo está activo. También puede especificar una Override DA Method (Anulación de método de AD) y seleccionar o bien Both Acquisition and DA (Tanto adquisición como AD) o DA Only (Solo AD) para el Tipo de método, y luego Data Analysis se ejecuta como parte del método. 46 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent Primeros pasos Paso 4. Configure y ejecute un método 1 Configuración y ejecución de listas de trabajo. 1 Haga clic con el botón derecho del ratón en el ángulo superior izquierdo de la lista de trabajo para mostrar el siguiente menú: 2 Haga clic en Add Multiple Samples (Añadir múltiples muestras). 3 Introduzca toda la información relevante y haga clic en la pestaña Sample Position (Posición de muestra) para especificar las ubicaciones de los viales de muestras (asegúrese de que se ha configurado el tipo específico de bandeja de muestras haciendo clic con el botón derecho del ratón en la imagen del dispositivo de automuestreo). 4 Especifique las ubicaciones, y pulse el botón OK. 5 Para configurar la ejecución de la lista de trabajo, haga clic con el botón derecho del ratón en la esquina superior izquierda de la lista de trabajo y seleccione Worklist Run Parameters (Parámetros de ejecución de lista de trabajo). Aparece el cuadro de diálogo Worklist Run Parameters (Parámetros de ejecución de lista de trabajo). 6 Escriba las rutas para el método, la Anulación de método AD y los archivos de datos, y pulse OK. 7 Para iniciar la ejecución, pulse el icono Run Worklist (Ejecutar lista de trabajo) , de la barra de herramientas principal o pulse el botón Start Worklist Run (Comenzar ejecución de lista de trabajo) ( ) de la barra de herramientas Lista de trabajo. Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent 47 1 Primeros pasos Paso 5. Revise los resultados y encuentre compuestos con Qual Analysis Puede ejecutar la lista de trabajo tanto en modo bloqueado como desbloqueado. Cuando el modo está bloqueado, nadie puede cambiar el método ni la lista de trabajo mientras ésta se ejecuta. El botón de la barra de herramientas principal indica que el modo de bloqueo está activo. Para usar un método de adquisición que posea un método de AD diferente que el introducido para la lista de trabajo, muestre la columna llamada Anulación método AD de la lista de trabajo usando el cuadro de diálogo Show/Hide/Order Columns (Mostrar/Ocultar/Ordenar columnas). En esta columna, escriba el nombre de otro método que contenga los parámetros de AD que desea usted usar para la muestra. Se usará la parte de AD de este método en lugar de la parte AD del método actual. También puede escribir el nombre de este método en el cuadro de diálogo Añadir muestras múltiples. Paso 5. Revise los resultados y encuentre compuestos con Qual Analysis Use el programa Qualitative Analysis para realizar estos pasos y más: • Revisar los resultados para el desarrollo del método de adquisición. • Encontrar compuestos. • Identificar compuestos. • Realizar extracción de características moleculares. • Exportar resultados • Imprimir informes Consulte la ayuda en línea y haga los ejercicios de la Guía de familiarización con Qualitative Analysis para ayudarle a aprender a usar el programa Qualitative Analysis para realizar estas tareas. Paso 6. Configurar y ejecutar cuantificación Si desea cuantificar sus datos, use el programa Quantitative Analysis. Consulte la ayuda en línea y la Guía de familiarización con Quantitative Analysis para aprender a realizar más pasos para analizar sus datos. 48 Guía de inicio rápido de los LC/MS TOF serie 6200 y Q-TOF serie 6500 de Agilent www.agilent.com En este libro Este libro contiene breves instrucciones para ayudarle a dar los primeros pasos con su sistema LC/MS TOF Serie 6200 o Q-TOF Serie 6500 de Agilent. Este libro echa un vistazo rápido al uso del software Agilent MassHunter Workstation para: • Preparar el instrumento para una ejecución. • Configurar métodos de adquisición. • Configurar y ejecutar listas de trabajo. Microsoft®, Windows®, Windows 7® y Excel® son marcas registradas de Microsoft Corporation en los EE. UU. y/o en otros países. © Agilent Technologies, Inc. 2014 Revisión A, diciembre de 2014 *G3335-95174* G3335-95174 Agilent Technologies
