Mattos, Yasna - Congreso Ciencias del Mar

SÍNDROME DE IMPOSEX, UN FENÓMENO POCO DOCUMENTADO EN LAS
COSTAS DE CHILE.
Y, Mattos*1, M.S. Romero1 y W. Stotz1. 1Facultad de Ciencias del Mar, Universidad Católica del Norte, Coquimbo.
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Introducción.
El síndrome de imposex o “sexo impuesto” es la sobreposición de pene y vaso deferente en el sistema genital
femenino de gasterópodos dioicos (Smith, 1971). Esta anomalía ha alcanzado su máxima expresión en la Familia
Muricidae y en Chile ha sido descrito para 7 especies: Chorus giganteus, Xanthochorus cassidiformis, Nucella
crassilabrum (Gooding et al., 1999), Acanthina monodon (Huaquín et al., 2004a), Nassarius gayi (Huaquín et al.,
2004b), N. coppingeri (Collado et al., 2010) y Thais chocolata (Mattos, 2013).
Thais chocolata (Duclos, 1832), miembro de la Familia Muricidae, es conocido vernacularmente como “locate”
(Osorio et al., 1979). Se distribuye geográficamente desde Paita, Perú a Valparaíso, Chile (Retamales & González,
1982) y constituye un recurso bentónico de importancia comercial para la pesquería artesanal del norte de Chile
(SERNAPESCA, 2013). Recientemente, las hembras de T. chocolata del puerto de Caldera, Chile han sido descritas
afectadas por esta anomalía (Mattos, 2013).
La intensidad del síndrome se estima a partir de escalas que describen el desarrollo de pene y vaso deferente
(Gibbs et al., 1987; Oehlmann et al., 1991), siendo bastante destructiva, ya que, requiere desconchar el ejemplar y
cortar tejidos afectados. Es por esta razón que actualmente se utiliza la micro-morfometría de la concha como una
nueva metodología, rápida e inocua, que evalúa la reducción de las capas de bicarbonato de calcio de la concha en
hembras afectadas por imposex (Márquez et al., 2011).
El BT es un compuesto hidrofóbico y bio-acumulable en tejido y sedimento (Fent, 2003). Su nivel de toxicidad es
mayor en el ambiente marino aún a concentraciones de nanogramos (ng) por litro y su presencia por periodos
prolongados permite que se distribuya en forma extensiva y persistente, en particular en sedimento, permaneciendo
por décadas con niveles de alta toxicidad (Miloslavich et al., 2007).
Se ha determinado que los efectos del BT son dependientes de la concentración y especie (Oehlmann et al.,
1991). A pesar del conocimiento acumulado sobre este tema, a nivel mundial, Chile carece de registros actualizados
de imposex y no presenta una legislación sobre el uso de productos a base de BT. Lo anterior, hace imprescindible
crear iniciativas que busquen informar y educar al público no especializado en colaboración con científicos
experimentados, con el fin de formar una sociedad lo suficientemente motivada e informada que contribuya, de
manera efectiva, al cuidado de los recursos marinos. Considerando lo anterior, este estudio plantea determinar la
ocurrencia y relacionar los grados crecientes de imposex de Thais chocolata con el grado de alteración microscópica
de la concha y los niveles de BT en tejidos y sedimentos de cinco lugares de Caldera, Atacama.
Objetivo General.
Evaluar la relación entre el grado de imposex de Thais chocolata con la alteración de la concha y la concentración de
butilestaño en tejidos y sedimentos provenientes de cinco lugares de Caldera, Región de Atacama, Chile.
Objetivos Específicos.
1. Determinar ocurrencia y grados de imposex según la escala de Oehlmann et al. (1991) de T. chocolata
proveniente de los cinco lugares con diferentes grados de intervención antrópica.
2. Determinar ocurrencia y grados de alteración de la concha de T. chocolata proveniente de cinco lugares de
Caldera.
3. Determinar concentración de butilestaño en tejidos de T. chocolata y sedimentos provenientes de cinco lugares.
4. Relacionar grados de alteración de la concha de T. chocolata con grados de imposex y concentración de
butilestaño en tejidos y sedimentos provenientes de cinco lugares.
Metodología.
Objetivo 1: Determinación de ocurrencia y grados de imposex según la escala de Oehlmann et al. (1991) de
Thais chocolata proveniente de cinco lugares con diferentes grados de intervención antrópica.
Para determinar la ocurrencia de imposex en Thais chocolata de la comuna de Caldera (27° 04′ 00″ S - 70° 49′
00″ O), Región de Atacama, se analizarán ejemplares provenientes de 5 lugares con diversos grados de intervención
antrópica: 1) Puerto Caldera, principal puerto de embarque de mineral y desembarque de combustible. 2) Bahía
Inglesa, balneario pequeño, se realizan actividades como el cultivo de moluscos y algas y el turismo. 3) Área
Marina Costera Protegida de Múltiples Usos Isla Grande, se realiza la pesca artesanal, recolección de algas, la
minería y el turismo. 4) Caleta Cisne, se desarrolla la pesca artesanal, el cultivo de moluscos y el turismo. 5) Puerto
Viejo, antiguo puerto de Copiapó, se desarrolla la recolección de algas y pesca.
En cada lugar, se determinará 2 sitios distribuidos uno cerca de las fuentes de actividad productiva y el otro
alejado de ellas, distantes 500 m entre ambos. En cada sitio, se recolectará mediante buceo hooka 60 ejemplares de
Thais chocolata, los que serán depositados en coolers y serán trasladados al Laboratorio de la UCN, Coquimbo.
Para determinar la ocurrencia de imposex de Thais chocolata se observará de manera comparativa la región
cefálica de 30 hembras y 30 machos de cada sitio de muestreo, bajo un microscopio estereoscópico, con el fin de
determinar la superimposición de órganos sexuales masculinos no funcionales, pene, conducto peneano y vaso
deferente, en las hembras. Luego, se caracterizará la organización histológica de estos órganos en hembras y machos.
Las muestras histológicas serán fotografiadas en un microscopio fotónico y medidas con el programa Image ProPlus.
Para determinar los grados de imposex de Thais chocolata, se compararán las observaciones macroscópica y
histológicas de los órganos con la escala de Oehlmann et al. (1991).
Adicionalmente, se estimará la proporción de imposex (%I) y los índices de la secuencia del vaso deferente
(VDSI), longitud relativa del pene (RPLI) y del tamaño relativo del pene (RPSI).
Proporción de imposex: Se estimará a partir de una muestra poblacional de 30 hembras y se relacionará su número
respecto a la cantidad total de hembras muestreadas según la siguiente fórmula: %I: (número de hembras con
imposex/ número total de hembras)* 100.
Índices de imposex:
VDSI: Para estimar el índice se realizará la sumatoria de los grados de imposex de las 30 hembras según la
siguiente fórmula: VDSI: Σ VDS/ N
RPLI y RPSI: Se medirá la longitud máxima del pene de 30 hembras y 30 machos, con un vernier. La longitud
máxima corresponde a la distancia entre la base del pene y el extremo más distal. Estas mediciones serán utilizadas
en las siguientes fórmulas: RPLI: (longitud media del pene en hembras / longitud media del pene en machos)* 100 y
RPSI: (longitud media del pene en hembras / longitud media del pene en machos)3 *100.
Objetivo 2: Determinación de ocurrencia y grados de alteración de la concha de Thais chocolata proveniente
de cinco lugares de Caldera.
La ocurrencia de alteración de la concha de Thais chocolata será analizada sobre los mismos ejemplares
empleados para el Objetivo 1. Se considerará el peso de las hembras y se determinará el número y grosor de las
capas de la concha de las ellas (n=30). Para ello, se extraerán trozos transversales de 2 cm de longitud de la parte
anterior, media y posterior de la zona del labio de la concha de 30 hembras de cada sitio de muestreo y serán
fotografiadas en un microscopio de barrido y medidas con el programa Image Pro-Plus.
Para determinar el grado de alteración de la concha de Thais chocolata, se considerará las observaciones obtenidas
mediante microscopía de barrido y se compararán con la caracterización informada por Márquez et al. (2011): En
hembras normales, la concha está constituida por tres capas. Mientras que, las conchas de hembras con imposex
poseen la ausencia de la capa externa y/o intermedia. A partir de esta información, se elaborará una escala que
consideré el número y grosor de las capas de carbonato de calcio de las hembras de Thais chocolata de cada sitio.
Objetivo 3: Determinación de concentración de butilestaño (BT) en tejidos de Thais chocolata y sedimentos
provenientes de cinco lugares.
Para determinar la concentración de butilestaño (BT) en tejido se analizará los mismos ejemplares empleados en
el objetivo 1. Para ello, se agruparán 3 a 5 hembras por grados de alteración de la concha e imposex. Para determinar
la concentración de BT en sedimento, las muestras serán recolectadas en los mismos sitios de obtención de
ejemplares, mediante buceo hooka y core. Se obtendrá una muestra de sedimento de 10 g. y se depositarán en
contenedores, previamente calcinadas, hasta el análisis químico.
El análisis de concentración de BT, incluyendo tributilestaño (TBT), dibutilestaño (DBT) y monobutilestaño
(MBT), en tejidos y sedimentos será realizado en el laboratorio de Microcontaminantes Orgánicos y Ecotoxicología
Acuática a cargo del Dr. Ítalo Braga de Castro de la Universidad Federal de São Paulo, Brasil, según la técnica
estándar de Castro et al. (2012). Los extractos de tejidos y sedimentos se analizarán en un cromatógrafo de gases.
Por último, se calculará el índice de degradación de butilestaño (BDI) en tejidos y sedimento. Para ello, se
utilizará los datos de concentraciones de TBT, DBT y MBT en tejidos de hembras y sedimentos de cada lugar de
muestreo según la siguiente fórmula: BDI: [MBT+DBT]/ [TBT].
Objetivo 4: Relación entre grados de alteración de la concha de Thais chocolata con grados de imposex y
concentración de butilestaño (BT) en tejidos y sedimentos provenientes de cinco lugares.
Para comparar la alteración de la concha con el imposex, se correlacionará los grados de alteración de la concha y
de imposex de hembras de Thais chocolata (n=30) de los 5 lugares de muestreo. Para comparar la alteración de la
concha con los niveles de butilestaño (BT), se correlacionará los grados de alteración de la concha de 30 hembras y
la concentración de BT en tejidos (n=3 a 5 hembras) y sedimentos (n=2) por cada lugar de muestreo en Caldera. Para
comparar los grados de imposex con los niveles de BT, se correlacionará los grados imposex de 30 hembras y la
concentración de BT en tejido (n=3 a 5 hembras) y sedimento (n=2) provenientes de los 5 lugares de muestreo.
Análisis Estadístico.
Se realizará un ANCOVA para establecer el efecto de: a) grados de alteración de la concha de Thais chocolata,
utilizando como covariable grados de imposex de los 5 lugares de muestreo en Caldera, b) grados de alteración de la
concha utilizando como covariable niveles de BT en tejido y sedimento de 5 lugares en Caldera y c) grados de
imposex utilizando como covariable niveles de BT en tejido y sedimento de 5 lugares en Caldera. Luego, se
determinará la normalidad de los datos mediante las pruebas de Kolmogorov-Smirnov y de Lilliefors y la
homogeneidad mediante la prueba de Levene. Una vez detectada mediante ANCOVA diferencias significativas entre
tratamientos, las medias serán comparadas con el Test de Tukey.
Resultados preliminares.
El 100% de las hembras de Thais chocolata analizadas (n=90) del puerto de Caldera, sufren de imposex. Este
síndrome alcanzó grados incipientes y avanzados en la escala de Oehlmann et al. (1991).
En las hembras de T. chocolata, el grado 1c se inicia con el desarrollo incipiente del vaso deferente en la región
cefálica de las hembras (n=15), seguido del grado 4 o estado intermedio, con un vaso deferente continuo que
comienza desde la vagina hasta finalizar en la base del pene (n=45). Por último, en el grado 6b se observó la
ocurrencia de ovicápsulas abortadas en el lumen de la glándula de la cápsula, además de nódulos de tejido de vaso
deferente en la vagina de las hembras (n=30).
Lo anterior hace presumible encontrar, en los mismos ejemplares, alteraciones en la estructura de la concha de las
hembras y una relación directa entre los grados de alteración de la concha, imposex y concentraciones de BT en
tejidos y sedimentos provenientes de los cinco lugares de la comuna de Caldera, con diferentes grados de
intervención antrópica (en desarrollo).
Conclusiones.
El 100% de las hembras de Thais chocolata provenientes del puerto de Caldera, se encuentra afectada por el
síndrome de imposex. Se determinó, aplicando la escala de Oehlmann et al. (1991) grados incipientes, caracterizados
por un pene y vaso deferente con diferentes grados de desarrollo, y avanzados, con la ocurrencia de ovicápsulas
abortadas, además de un pene y vaso deferente continuo.
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