LABORATORIOS CONDA, S

INSTRUCCIONES DE USO
Revisión 0 Abril 2010
AGAR BISMUTO SULFITO (WILSON BLAIR)
Agar Bismuto Sulfito presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1011
Agar Bismuto Sulfito presentación Caja 20 unidades, placas de 90 mm. Catálogo 926
USO PREVISTO
Agar Bismuto Sulfito es un medio altamente selectivo, recomendado para aislamiento de Salmonella spp,
particularmente Salmonella thyphi, en heces
FORMULA EN g/l
Peptona bacteriológica
10.00
Fosfato Disodico
4.00
Indicador bismuto sulfito
8.00
Sulfato Ferroso
0.30
Extracto de Carne
5.00
Verde Brillante
0.025
Dextrosa
5.00
Agar Bacteriológico
20.00
Final pH 7.5 ± 0.2 a 25ºC
Salmonella typhi
ATCC 19430
PREPARACIÓN
Agar Bismuto Sulfito presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1011. (Medio deshidratado)
Suspender 52,3 gramos del medio en un litro de agua destilada.Mezclar bien y calentar agitando continuamente. Hervir
durante un minuto o hasta que el medio se disuelva por completo. EVITAR EL SOBRECALENTAMIENTO.NO AUTOCLAVAR
Dejar que el medio se enfríe a 45ºC (muy importante) y sin dejar de agitar verter en placas de Petri. El color del medio
preparado es blanco opaco con tinte verde. El medio preparado en placa debe conservarse entre 8-15°C.
El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar
el medio.
Agar Bismuto Sulfito presentación. Caja 20 unidades, placas de 90 mm. Catálogo 926. (Medio preparado)
Listo para su uso.
PRINCIPIOS Y APLICACION
AGAR BISMUTO SULFITO es una modificación de el Medio Wilson Blair, utilizado para la detección de Salmonella, en
particular Salmonella typhi de muestras clínicas.
La Peptona y el Extracto de carne aportan nitrógeno, vitaminas, minerales y amino ácidos esenciales para el
crecimiento. La Dextrosa es el carbohidrato fermentable y provee de carbono y energía. El indicador de Bismuto sulfito y
el verde Brillante son inhibidores de bacterias Gram positivas y de algunas bacterias del grupo coliformes. El Agar
bacteriológico es el agente solidificante.
El sulfato ferroso se incluye para la producción de H 2 S. Cuando el H 2 S esta presente, el hierro es precipitado dando
colonias positivas características de color marrón a negro con brillo metálico.
Las placas deben ser uniformes, opacas, de color crema-verde palo. Se recomienda guardar las placas en refrigeración 4
días antes de usar para reducir la inhibición y así poder aislar salmonella de muestras de heces débilmente contaminadas
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TIPO MUESTRAS
Heces.
La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en
Microbiología Clínica.
PROCEDIMIENTO
1.- Inocular por el método siembra en superficie para obtener colonias aisladas, pero también se puede utilizar el
método por vertido, mezclando la muestra con el medio líquido a temperatura de 45-50ºC y dejando solidificar.
La inoculación también se puede hacer a partir de un cultivo de preenriquecimiento.
2.- Incubar a 35 ±2 ºC durante 40-48 horas
3.- Lectura e interpretación de los resultados
CARACTERISTICAS DE LAS COLONIAS
S. typhi . Las colonias de S. typhi son negras rodeadas por una zona negra o parduzca, con brillo metálico. En las
zonas donde haya mucho crecimiento pueden aparecer como colonias verde claras.
Otras Salm onellas producen colonias negras con o sin oscurecimiento del medio alrededor.
Shigella spp, así como Shigella flexneri y Shigella sonnei no crecen.
E. coli está parcialmente inhibida ocasionalmente crece como colonias marrones o con brillo verdoso. Las colonias de
coliformes que producen que producen H 2 S, forman colonias de similar apariencia a Salmonella typhi. Estas bacterias
se pueden diferenciar fácilmente porque producen gas en medios con lactosa, por ejemplo TSI Agar
(Cat.1046) o Kligler Iron Agar (Cat. 1042).
La hidrólisis de la urea en el Caldo Urea (Cat. 1226) o Base Agar Urea (Cat. 1110), pueden utilizarse para
diferenciar Proteus spp.
CONTROL MICROBIOLOGICO
Los siguientes resultados fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de cepas patrón después de incubación a
temperatura de 35 ± 2°C and observados después de 40- 48 horas.
Desarrollo
Color Colonia
Inhibición Parcial
Marrón-Verde
Salmonella enteriditis ATCC 13076
Bueno
Negro con brillo metalico
Salmonella typhi ATCC 19430
Bueno
Negro con brillo metalico
Shigella flexneri ATCC 12022
Inhibición Parcial
Marrón
Nulo
-
Microorganismos
Escherichia coli ATCC 25922
Enterococcus faecalis ATCC 29212
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BIBLIOGRAFIA
Wilson, W.J., and E.M. Blair 1.926 A combination of Bismuth and Sodium Sulfite affording an enrichment and selective medium for the
typhoid-paratyphoid groups of bacteria. J. Pathol. Bactend 29:310.
United States Pharmacopoeia Convention 1.995. The United States Pharmacopoeia 23rd ed.
Diagnostico in vitro
Solo para uso profesional
Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad
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USP
ALMACENAMIENTO
Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación.
Utilizable hasta la fecha de caducidad.
25ºC
2ºC
Placas preparadas almacenar entre 8-15°C
Utilizable hasta la fecha de caducidad.
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C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz
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