Procesos Biotecnológicos I - Curso 2016 Teóricos Prof. G. Picó Filtración 268 ¿ Qué se entiende por Operación Unitaria de Filtración ? Pasar una fase liquida a través de una pared que tiene poros. De manera que algunas partículas son retenidas por su tamaño Algunas de las aplicaciones en la bio industria son: 1. Recupero de cristales. 2. Recupero de células de un medio de fermentación 3. Clarificación de líquidos y gases 4. Esterilización de líquidos 269 1 Filtración frontal Clasificación de la filtración Alimentación (según el flujo) Membrana Filtrado Filtración tangencial Rechazo Alimentación Membrana Filtrado 270 FILTRACION FRONTAL: Según la forma de retención que presenta el filtro: a) suspensión que contiene grandes cantidades de sólidos insolubles se separan formándose una torta en la parte anterior del medio. Conociéndose el proceso como filtración por torta o de torta. b) clarificación o filtración de lecho profundo, en esta se quitan pequeñas cantidades de un sólido insoluble FILTRACION POR FORMACION DE TORTA O FILTRACION CONVENCIONAL Torta 271 2 Teoría de la filtración: el modelo Presión externa P R resistencia P membrana Gradiente de presión J flujo El flujo (J) de líquido a través de la membrana será: J ( pT ) R Al gradiente de presión J K 1/ a la resistencia de la membrana 1/ a la viscosidad del líquido ( pT ) R 272 Tipos de torta: residuo que se deposita sobre el filtro A medida que avanza el proceso de filtración aumenta el espesor de la torta por lo que la resistencia al paso de fluido es cada vez mayor, No compresible Rtorta V A compresible es variable Resistencia de la torta Resistencia específica cte Rtorta V A 273 3 Presión Flujo (J) -Filtración a presión constante: -El caudal (J) disminuye con el tiempo. Presión aplicada es constante Caída de flujo Formación de la torta 274 tiempo 1856, d’Arcy velocidad del flujo de aguas subterráneas en estratos del suelo cumplía con la siguiente relación: Donde: = velocidad del fluido, K1 = coeficiente de permeabilidad del lecho ΔP = caída de presión a través del lecho T 1 L = espesor del lecho poroso vK ( p ) L J J V ( p) K A t R V vA t Permite calcular R V ( p ) K A t R int egrando dV K ( p ) A dt R 275 4 Presión Flujo (J) -Filtración a caudal constante: -La presión debe aumentar al avanzar la filtración a J constante, para el caso de torta incompresible: Flujo constante Aumento de la presión Presión inicial Formación de la torta 276 tiempo El modelo en estudio J K PM Area Membrana pT A ( Rtorta Rmedio) ( 7) Torta PT R medio es constante: filtro. Pe: Presión de entrada P Ps: Presión de salida R torta es constante o variable Fluido sucio filtrado 277 5 J K J pT A ( Rtorta Rmedio) ( 7) Rtorta V pT K A t ( Rtorta Rm edio) (9) invirtiendo la ecuación t Rtorta Rm edio V K pT A K pT A t V V A J (10) V A Rm edio K pT A K pT A V ( p) K A t R t V V dt K 0 t 0 dt 0 V (11) V pT A V K 0 2 dV 0 V pT A 2 dV 0 Rmedio K pT A Rmedio K pT A dV (12) 278 dV (12) Donde p tiene signo negativo , , A, , K y Rmedio son constantes. Integrando (12) t = 0 y t=t para V=0 y V= Vt t KoV 2 (t ) B V(t ) Ko K pT A Ko torta t KoV Vt (t ) 2 y B Rmedio K pT A B medio B 12 279 6 Filtración sin formación de tortas: Membranas Iones metálicos Células Granos de Hollin Virus Bacterias INVERSA 100 200 Proteínas OSMOSIS NANO FILTRACIÓN 10 ULTRA FILTRACIÓN MICROFILTRACIÓN FILTRACIÓN 1 PRESION (en bar) (según el tamaño de la partículas que atraviesan la membrana) 0,0001 0,001 0,01 0,1 1 10 100 Tamaño de las partículas (m) 280 FILTRACION EMPLEANDO MEMBRANAS Sirve para separar 1- partículas contenidas en un liquido. 2. Partículas contenidas en solución de un soluto. 3. Solutos solubles en solventes (agua de sal) 4. Solutos de soluto (mezcla de dos solutos diferentes en solución 281 7 APLICACIONES Concentración de soluciones Esterilización (eliminación de bacterias y virus) Fraccionamiento de mezclas de solutos en solución Desalinización del agua de mar o de pozo Clarificación ¿ COMO FUNCIONAN ? Tamaño del soluto Carga eléctrica del soluto Capacidad de difusión Forma de la molécula del soluto 281 MEMBRANAS: Según su estructura se clasifican en: SIMETRICAS: Tienen similar composición y morfología en toda su masa. ASIMETRICAS ESTAN FORMADOS POR DOS O MAS PLANOS DE diferentes composición y morfología 283 8 MATERIAL EMPLEADO PARA CONSTRUIR LAS MEMBRANAS Acetato de celulosa Poliamidas Poli eter sulfonato Fluoruro de polivinillo Poli acrilo nitrile MEMBRANAS INORGANICAS: cerámicas, vidrio carbon pirolizado Acero inoxidables 284 Iones metálicos Células Granos de Hollin Virus Bacterias INVERSA 100 200 Proteínas OSMOSIS NANO FILTRACIÓN 10 ULTRA FILTRACIÓN MICROFILTRACIÓN FILTRACIÓN 1 PRESION (en bar) La ultrafiltración: Unas de las operaciones unitarias mas empleadas en este momento: 1- concentrar soluciones de macromoléculas, PASO FINAL DE UN DONSTREAM PROCESSES 2- separación de poblaciones de moléculas 0,0001 0,001 0,01 0,1 1 10 100 285 Tamaño de las partículas (m) 9 FUNDAMENTO DE LA ULTRA FILTRACION filtración tangencial o filtración por rechazo, incluye la micro, nano y ósmosis inversa) donde se separan moléculas en solución de su solvente. FILTRACION POR MEMBRANA: micro, nano y ultra filtración RETENIDO membrana FILTRADO 286 Ensuciamiento o fouling de la membrana Acumulación de sustancias sobre la superficie de la membrana y los poros, lo cual resulta en un deterioro del funcionalismo de la membrana. SON RESPONSABLES Partículas coloidales Sustancias orgánicas Sales inorgánicas pocos solubles Crecimiento bacteriano 287 10 Existen dos tipos diferenciados de ensuciamiento: -externo o reversible. Las sustancias se depositan sobre la membrana. - interno o irreversible. Las sustancias taponan los poros del interior de la membrana. Consecuencia: disminución del flujo 288 LIMPIEZA Métodos físicos más empleados son el lavado en contracorriente (backflushing) y la creación de turbulencia. retrolavado (backwash), se invierte el flujo por uno dos segundos cada pocos minutos; backshock se invierte el flujo cada pocos segundos durante menos de un segundo. La creación de la turbulencia colabora con reducir el ensuciamiento ya que dificulta la deposición de los sólidos sobre la membrana. son únicamente útiles para el ensuciamiento externo. Ensuciamiento interno de membranas: Metodos químicos lavado con enzimas, generalmente proteasas para digerir las proteínas desnaturalizadas y agregados de estas depositados sobre los canales. 289 Detergentes 11 Diferentes tipos de membranas Micro fotografia de una membrana Membranas para escalado Para escala de lab. 290 291 12 Osmosis inversa Filtros de lab Ultrafiltración en el lab. 292 Filtro rotatorio Grandes volumenes Secado Lavado Torta V Cuchilla rascadora V V P V P Filtrado V Tela filtrante V 293 13 Filtro de placas: para jugos y vino 294 Equipo de osmosis inversa de laboratorio o familiar Planta de osmosis inversa de 50 m3/hora 295 14 OPERACIÓN UNITARIA DE CAMBIO DE TAMAÑO DE LA MATERIA Teóricos 2016- Prof. Picó MOLIENDA Y PULVERIZACION 296 PULVERIZACION DE SOLIDOS Proceso de reducción de tamaño de las partículas por medio mecánico El tamaño de las partículas de los sólidos determinan sus propiedades físicas y especialmente sus cualidades para diferentes empleos 297 15 OBJETIVOS DE LA PULVERIZACION # DOTAR AL SOLIDO DE UNA GRANULOMETRIA SIMILAR PARA EVITAR LA SEGREGACION EN LAS MEZCLAS # INCREMENTAR LA SUPERFICIE ESPECIFICA DE LAS PARTICULAS (aumentar una serie de propiedades físicas. Ej: Adsorción) # Que todas las partículas tengan el mismo tamaño # Dar esfericidad a las partículas facilitando su manipulación # Facilitar su disolución 298 Tamaño de la partícula Pulverización grosera Pulverización intermedia Pulverización fina Pulverización ultrafina 850 m 75 – 850 m 75 m < 1 m (generalmente se llega por medios mecánicos hasta 38 m) 299 16 300 Distribución del tamaño de las partículas 301 17 A mayor tiempo de tratamiento se logra menor tamaño y menor pausidispersidad 302 SEPARACION POR TAMAÑO DE PARTICULA Tamización Limite de tamaño de partícula 38 um Elutriación Sedimentación al revés Pártículas pequeñas Pártículas grandes 303 18 Separador Ciclónico Sedimentación 304 CÓMO SE NOMBRA EL TAMAÑO DE LA LUZ DE MALLA ‘número de mesh’ significa malla en inglés, es la cantidad de hilos por pulgada lineal que tiene la malla, pero manteniendo constante la superficie abierta, Es decir que cuanto más grande es el mesh más finos deberán ser los hilos. 305 19 Tamaño de la partícula 306 Las principales clases de máquinas para molienda son: A) Trituradores (Gruesos y Finos) 307 20 B) Molinos (Intermedios y Finos). C) Molinos Ultrafinos. 308 Operaciones Unitarias de separación Teóricos 2016 Centrifugación 309 21 El tamaño de la partícula decide !!!! 310 ¿ Cuáles son las operaciones unitarias utilizadas para la separación sólido-líquido? El volumen decide y también la concentración de partículas Operación Unitaria % contenido de sólido < 0, 001- 0,1 % Sedimentación (Vol >>>>) Filtración (Operaciones con membrana) (Vol >>>) Centrifugación (Vol >) <1% >>5- 20 % 311 22 Tipos de Centrifugas: Carga y descarga manual Para líquidos con menos de 5% de sólidos 312 Centrifugas a discos Carga continua para líquidos que contienen hasta 40% de sólidos 313 23 47 314 Centrifuga de tornillo Para líquidos con más de 40% de sólidos 315 24 Teóricos Procesos Biotecnológicos I 2016 Operación Unitarias de Conservación Esterilización 316 Esterilización destrucción o eliminación de cualquier tipo de vida microbiana incluyendo las formas esporuladas de hongos y bacterias. Significa el nivel más alto de seguridad y, por tanto, de letalidad 317 25 Metodos de esterilización Fisicos Luz Químicos Calor Radiación Filtración Fisicos-Químicos Liquidos: Aldehidos Halogenos UV Ionizante Membranas Agua oxigenada No ionizante Vidrio sinterizado Detergentes Gases: Calor seco Formaldehido Aire caliente Oxido de etileno Flameado Luz IR Calor Humedo Vapor a 120°C Ebullición 318 Luz UV Radiación con emisión de energía desde 300 nm en adelante ¿Cómo actua? Produce cambios irreversibles en el DNA La luz Uv no destruye las esporas 319 26 Calor Húmedo (vapor) 120ºC Seco ¿Cómo actua? Desnaturaliza en forma irreversible macromoléculas: DNA y proteínas Destruye las esporas Es el método mas empleado en Procesos Biotecnológicos, simplemente se hace pasar vapor a 120°C (2 - 4 atm) 320 Calor Humedo: Fue la primera Operación Unitaria aplicada para conservar alimentos mediante calor (sin saber porqué) 1808-1810 Mientras Napoleón se preparaba para su campaña contra Rusia, ofreció un premio de 12,000 francos. Nicolás Appert, fabricante de dulces, fue premiado por su descubrimiento en 1809. Inglaterra: 1811 cambio los frascos de vidrio por contenedores de hierro (enlatados de carne) En 1810, Peter Durand Cubrió las latas de hierro, que eran propensos a la oxidación, con un recubrimiento delgado de estaño (que no se vea perjudicado por el agua), e inventó la "lata". 321 27 322 Radiación Rayos gamma: -alto contenido de energía (Co60) -son difíciles de controlar se emiten en todas direcciones. -un producto se puede empaquetar primero y después esterilizar. Rayos catódicos (Radiación con haz de electrones): - Se usan para material quirúrgico, medicamentos y otros materiales. - se puede esterilizar después de empaquetado. 323 28 Filtración Emplea filtros de poro 0,2 a 0,45 m ¿ En que sistemas se emplea ? Líquidos que no se pueden calentar: Medios de cultivos Soluciones de macromoléculas 324 Metodos químicos de esterilización Liquidos: H2O2 glutaldehido Aldehidos Halogenos Agua oxigenada Detergentes Gases: Oxido de etileno Formaldehido Oxido de etileno Detergentes: cloruro de benzilalconio 325 29 326 327 30 La eliminación de microorganismos en alimentos TYNDALIZACION cuando las sustancias no pueden calentarse por encima de 100° C Consiste en el calentamiento del material de 80 a 100° C hasta 1 hora durante 3 días . Las esporas resistentes germinarán durante los períodos de incubación y en la siguiente exposición al calor las células vegetativas son destruidas 328 Pausterización Objetivos: es reducir la cantidad inicial de micro organismos. - es una aplicación de calor suave, -de manera que no se modifiquen las propiedades del producto - a diferencia de la esterilización por calor, que es un tratamiento mucho más agresivo. 329 31 Tipos de pasteurización LTH (low temperature holding): (también se denomina VAT Pasteurization) 62 °C por tiempos largos hasta 30 minutos. - se emplea para tratamiento de alimentos envasados, por ejemplo: salsa de tomate, mermeladas y todo alimento que se expende en lata. 330 Para el caso de la leche: HTST 331 32 UHT (ultra high temperature): leche, se suele llegar a 125°C, (presión 2-4- atm) durante 2 segundos, esta es la que se emplea en la leche que consumimos, ya sea fresca o larga vida. - Esta última tiene a su vez un proceso denominado de micronización, en donde se logra que todos los glóbulos de grasa tengan un tamaño uniforme, lo cual le da más estabilidad 332 Las variables que caracterizan un proceso de esterilización Cinética de muerte microbiana No número inicial de microorganismos N k N t 0 N k t log No t DT 37 °C log (N / No) N No ekt N log No k 50 °C 60 °C tiempo t es el tiempo necesario para reducir al 10 % la cantidad inicial de microorganismos 333 33 DEPENDE DE: tiempo de termo destrucción: DT tipo de micro organismo [ DT] segundos o minutos condiciones del medio: pH , temperatura, nutrientes del medio z, incremento en la temperatura ( °C) necesarios para que el valor DT se reduzca a la décima parte del inicial. z es una medida de la labilidad que posee un micro organismo frente al cambio de temperatura 334 335 34 OTRAS VARIABLES EMPLEADAS PARA UN PROCESO GLOBAL DE CALENTAMIENTO Tiempo de calentamiento tcal Tiempo de retención tret Tiempo de enfriamiento tenf. to ien tam am ien to len fri ca Temperatura ( °C) en Número de microorganismos viables Temperatura de esterilización deseada 100 thd No thd Nf tiempo tiempo Muerte microbiana = (kcal + kret. +k enf.) 336 ESTERILIZACION QUÍMICA CINETICA DE LA ESTERILIZACION QUÍMICA DOSIS LETAL 50 DT es la concentración mínima de un sustancia necesaria para reducir en un 50% la población de mico organismos. DT dependerá del tipo de microorganismo 337 35 Equipos para esterilizar Autoclave Luz UV estufa de aire seco vapor a 120°C filtro de 0,2 m de poro cámara de óxido de etileno 338 36