2015 [DETERMINACIÓN DE GRUPO ABO/RH, ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD CM/UMT/002 Versión nº1 Característica: APTr 1.2 Elaborado por: Tecnólogo Médico Encargado de Unidad de Medicina Transfusional. Mayo 2014 Revisado por : Comité Calidad Mayo 2014 Aprobado por : Dirección Médica Mayo 2014 Próxima Revisión : 2019 N° de Páginas : 06 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 2 de 14 CLÍNICA MAYOR ÍNDICE. 1. INTRODUCCIÓN. 2. OBJETIVO. 3. ALCANCE. 4. DOCUMENTACIÓN DE REFERENCIA. 5. RESPONSABLE DE LA EJECUCIÓN. 6. DEFINICIONES. 7. DESARROLLO. 8. DISTRIBUCIÓN. 9. RESPONSABILIDAD DEL ENCARGADO. 10. INDICADOR. 11. ANEXOS. 2 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 3 de 14 CLÍNICA MAYOR 1. INTRODUCCIÓN. La transfusión de componentes sanguíneos al igual que cualquier otro procedimiento médico no está exenta de riesgos, por lo cual la realización de exámenes pretransfusionales nos permite entregar una mayor seguridad a los pacientes. 2. OBJETIVO. Establecer que para toda solicitud de Transfusión de Hemocomponentes, existe la realización de exámenes pretransfusionales en la Unidad de Medicina Transfusional (UMT) para garantizar la seguridad de los pacientes. 3. ALCANCE. Este documento debe ser aplicado en la UMT, para todas las órdenes de solicitud de exámenes ya sean de pacientes hospitalizados que ingresan a pabellón o pacientes hospitalizados a quienes se les solicite transfusión de componentes sanguíneos. 4. DOCUMENTACIÓN DE REFERENCIA. Política Nacional de Servicios de Sangre, MINSAL, diciembre 2008. CIRC 4C/26, recomendaciones para el uso de transfusión de sangre o de sus componentes, MINSAL, 11 de abril 2000. 5. RESPONSABLE DE LA EJECUCIÓN. El responsable de la realización de las actividades descritas en este documento es el Tecnólogo Médico de la UMT de la Clínica Mayor. 6. DEFINICIONES. Pruebas pretransfusionales: Exámenes de inmunohematología que se deben realizar a los receptores de componentes sanguíneos que permitan asegurar una compatibilidad entre donantes y receptores. Las pruebas deben asegurar la compatibilidad de todos los anticuerpos con significancia clínica. Pruebas de Compatibilidad (PC): Examen inmunohematológico que permite conocer si existe compatibilidad serológica entre la sangre del donante y del receptor, teniendo como finalidad asegurar al paciente los mayores beneficios de la transfusión. 3 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 4 de 14 CLÍNICA MAYOR 7. DESARROLLO. a. La UMT de la Clínica Mayor cuenta con atención de personal especializado y realiza Pruebas pretransfusionales que incluyen: Tipificación Sanguínea de Grupo ABO /Rh, Detección de Anticuerpos irregulares y Pruebas de Compatibilidad (PC) las 24 horas del día. b. Es de suma importancia dejar establecido que la muestra para realizar las Pruebas pretransfusionales debe corresponder a sangre venosa con anticoagulante EDTA y no debe estar hemolizada ya que la hemólisis interfiere en el procedimiento, además debe estar correctamente rotulada, con el nombre y los dos apellidos del paciente. c. Si la muestra o la Solicitud de examen recibida viniera mal etiquetada o la muestra sin etiquetar, la UMT se reserva el derecho de conservarla y eliminarla. En este caso se solicitará nueva muestra o nueva Solicitud de examen, según corresponda. d. En pacientes adultos, lactantes mayores de 6 meses y pediátricos se realiza Tipificación sanguínea de grupo ABO/Rh y Detección de Anticuerpos Irregulares. En recién nacidos (RN) la Tipificación sanguínea incluye el grupo ABO/Rh y el Test de Coombs Directo. e. Cuando la Solicitud de transfusión es por Glóbulos Rojos se le realizan los siguientes exámenes: Tipificación sanguínea de grupo ABO/Rh, Detección de Anticuerpos Irregulares y Pruebas de Compatibilidad (PC). f. Cuando la Solicitud de transfusión es por Plasma fresco congelado (PFC), Plaquetas o Crioprecipitados (CPP) se le realizan los siguientes exámenes: Tipificación sanguínea de grupo ABO/Rh y Detección de Anticuerpos Irregulares. g. En los casos de pacientes que hayan sido transfundidos, la vigencia de la muestra y los exámenes realizados, será de tres días, si se vuelve a solicitar una nueva transfusión pasado esos tres días, se deberá solicitar nueva muestra y volver a realizar los exámenes correspondientes. h. Si al tipificar al paciente diese un Rh NEGATIVO, se debe realizar la Prueba del Du. i. Si la Detección de anticuerpos irregulares arrojase un resultado POSITIVO, se deberá realizar: Test de Coombs Directo (TCD) Se solicitará nueva muestra del paciente para repetir los Anticuerpos irregulares. Separar el plasma de la muestra, para ser enviado al Laboratorio de referencia (Centro de sangre Austral) para identificar el anticuerpo. j. Todos los exámenes realizados se deben registrar en la hoja de Tipificación sanguínea Adulto (anexo 1), Tipificación sanguínea RN (anexo 2) y en la hoja de Pruebas de Compatibilidad (anexo 3) que se encuentra en la Planilla ubicada encima del mesón. Además, los resultados se deben ingresar a la Base de Datos de la UMT y dejar respaldo fotográfico de los resultados. k. Control de Calidad Interno: Los días lunes, miércoles y viernes, se realiza control de calidad, para las técnicas realizadas. 4 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 5 de 14 CLÍNICA MAYOR DETERMINACIÓN DE GRUPO ABO/RH CON PRUEBA INVERSA 1. MATERIALES Centrífuga para tubos Pipetas pasteur 1 ml. Puntas amarillas para micropipetas. Tarjeta Bio-Type para detección de grupo ABO/Rh con prueba inversa. Biotype diluent II. Glóbulos rojos comerciales A1 y B. Micropipetas 10ul, 25ul y 50ul. Centrífuga para tarjetas. 2. TOMA DE MUESTRA La muestra de sangre debe ser extraída en forma aséptica en tubo con EDTA. 3. PREPARACION DE LA MUESTRA a. Determinación ABO y Rh Preparar una suspensión de GR al 1% en la solución II: en un tubo eppendorf, colocar 1 ml de solución II y 10ul de sedimento de GR. b. Prueba Inversa Preparar una suspensión al 1% de glóbulos rojos A1 y B de la siguiente forma: en un tubo eppendorf, rotular como A y en otro B , colocar 1 ml de solución II y 6 gotas de los glóbulos rojos comerciales A1 y B según corresponda. 4. TÉCNICA a. Identificar cada tarjeta con el nombre del paciente y colocar la fecha. Retirar el sello que recubre la tarjeta. b. Preparar una suspensión de GR del paciente al 1%. c. Añadir 50ul de glóbulos rojos A1 y B suspendidos al 1% en los pocillos 5 y 6 , respectivamente. d. Añadir 50ul de plasma del paciente a los pocillos 5 y 6. e. Incubar a temperatura ambiente por 10 minutos. f. Añadir 50ul de la suspensión de glóbulos rojos del paciente a c/u de los pocillos del 1 al 4 (A, B, D, Ctl). g. Centrifugar por 5 minutos. h. Leer y anotar resultados. 5. INTERPRETACIÓN Las muestras positivas se presentan como una línea roja en la superficie del reactivo, (4+) o dispersada a través del pocillo (1-3+). Las muestras negativas forman un botón compacto en el fondo del pocillo. 5 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 6 de 14 CLÍNICA MAYOR PRUEBA DEL Du 1. MATERIALES Centrífuga para tubos. Pipetas pasteur 1 ml. Puntas amarillas para micropipetas. Tarjeta Bio-Type para Coombs. Micropipetas 10ul, 25ul y 50ul. Centrífuga para tarjetas. Incubador 37° C. 2. TOMA DE LA MUESTRA La muestra de sangre debe ser extraída en forma aséptica en tubo con EDTA (la misma suspensión que se usó para el Rh) 3. TÉCNICA a. Agregar 50ul de GR a un pocillo de tarjeta Bio-Type Liss Coombs. b. Agregar 25ul de suero comercial ultra D (IgM/IgG monoclonal). c. Incubar 15 minutos a 37° C. d. Centrifugar 5 minutos y leer. 4. INTERPRETACIÓN Anti-D Negativo Negativo Du positivo negativo Interpretación Rh débil Rh negativo 6 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 7 de 14 CLÍNICA MAYOR DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES EN GEL (TEST DE COOMBS INDIRECTO) 1. MATERIALES Centrífuga para tubos. Pipetas pasteur 1 ml. Puntas amarillas para micropipetas. Tarjeta Bio-Type para Coombs. Micropipetas 10ul, 25ul y 50ul. Centrífuga para tarjetas. Incubador 37° C. 2. TOMA DE LA MUESTRA La muestra de sangre debe ser extraída en forma aséptica en tubos con EDTA (la misma que para el Grupo y Rh) 3. TÉCNICA a. Rotular 2 tubos eppendorf con I y II, colocar 1 ml de solución II y 6 gotas del Panel I y Panel II, respectivamente. b. Identificar en la tarjeta los pocillos rotulados I y II con el nombre del paciente. c. Agregar 50ul con la suspensión al 1% de Panel I y II a cada pocillo. d. Agregar 25ul de plasma del paciente a cada pocillo. e. Incubar 15 minutos a 37° C. f. Centrifugar 5 minutos y leer. 4. INTERPRETACIÓN Las muestras positivas se presentan como una línea roja en la superficie del reactivo, (4+) o dispersada a través del pocillo (1-3+) Las muestras negativas forman un botón compacto en el fondo del pocillo. 7 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 8 de 14 CLÍNICA MAYOR TEST DE COOMBS DIRECTO 1. MATERIALES Centrífuga para tubos. Pipetas pasteur 1 ml. Puntas amarillas para micropipetas. Tarjeta Bio-Type para Coombs. Micropipetas 10ul, 25ul y 50ul. Centrífuga para tarjetas. Incubador 37° C. 2. TOMA DE LA MUESTRA La muestra de sangre debe ser extraída en forma aséptica en tubo con EDTA (la misma que se usó para el Grupo ABO y Rh) 3. TÉCNICA a. A la tarjeta Bio Type LISS-Coombs agregar 50ul de GR, previamente lavados en PBS y suspendidos al 1% en solución II. b. Centrifugar 5 minutos y leer. 4. INTERPRETACIÓN Las muestras positivas se presentan como una línea roja en la superficie del reactivo, (4+) o dispersada a través del pocillo (1-3+) Las muestras negativas forman un botón compacto en el fondo del pocillo. 8 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 9 de 14 CLÍNICA MAYOR PRUEBA DE COMPATIBILIDAD 1. MATERIALES Centrífuga para tubos. Pipetas pasteur 1 ml. Puntas amarillas para micropipetas. Tarjeta Bio-Type para Coombs. Micropipetas 10ul, 25ul y 50ul. Centrífuga para tarjetas. Incubador 37° C. 2. MUESTRA La muestra de sangre del paciente debe ser extraída en forma aséptica en tubo con EDTA (la misma que se usó para el Grupo ABO y Rh). Glóbulos rojos de la tubuladura de la unidad a compatibilizar, suspendidos al 1% en solución II. 3. TÉCNICA a. Identificar cada pocillo de la tarjeta Bio Type LISS-Coombs con el número de la unidad de glóbulos rojos a compatibilizar y el nombre del paciente. b. Agregar 50ul de GR al 1% a cada pocillo. c. Agregar 25ul de plasma del paciente (receptor). d. Incubar 15 minutos a 37° C. e. Centrifugar por 5 minutos y leer. 4. INTERPRETACIÓN Las muestras positivas se presentan como una línea roja en la superficie del reactivo, (4+) o dispersada a través del pocillo (1-3+) Las muestras negativas forman un botón compacto en el fondo del pocillo. 9 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 10 de 14 CLÍNICA MAYOR DETERMINACIÓN DE GRUPO ABO/RH DE RECIEN NACIDO 1. MATERIALES Puntas amarillas para micropipetas. Tarjeta Bio-Type para Recién Nacido. Biotype diluent II. Micropipetas 10ul, y 50ul. Centrífuga para tarjetas. 2. TOMA DE MUESTRA La muestra de sangre debe ser extraída en forma aséptica en tubo con EDTA (tubo pediátrico). 3. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Preparar una suspensión de GR al 1% en la solución II: en un tubo eppendorf, colocar 1 ml de solución II y 10ul de GR. 4. TÉCNICA a. Identificar cada tarjeta con el nombre del paciente. Retirar el sello que recubre la tarjeta. b. Añadir 50ul de glóbulos rojos suspendidos al 1% a los pocillos 1 al 6. c. Centrifugar 5 minutos y leer. 5. INTERPRETACIÓN Las muestras positivas se presentan como una línea roja en la superficie del reactivo, (4+) o dispersada a través del pocillo (1-3+). Las muestras negativas forman un botón compacto en el fondo del pocillo. 10 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 11 de 14 CLÍNICA MAYOR 8. DISTRIBUCIÓN. El presente documento se encontrará en la UMT y en la Unidad de Calidad. 9. RESPONSABILIDAD DEL ENCARGADO. El responsable de velar por el estricto cumplimiento del documento es el Tecnólogo Médico Supervisor de la UMT. 10. INDICADOR APTr 1.2 Indicador % de transfusiones con determinación de grupo ABO/Rh, anticuerpos irregulares según protocolo Formato del Indicador Dimensión Justificación Fuente de información Umbral Periodicidad Responsable del monitoreo Nº de transfusiones en donde se determinó grupo ABO/Rh, Anticuerpos Irregulares según protocolo /Nº total de transfusiones realizadas en el mismo periodo x 100 Protocolo Determinación de grupo ABO/Rh, Anticuerpos Irregulares y Pruebas de Compatibilidad Seguridad Seguridad del paciente Solicitud de transfusión, orden de exámenes 95% Trimestral Tecnólogo médico supervisor de UMT Informa a trimestralmente a Comité de Calidad Criterios 11 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 12 de 14 CLÍNICA MAYOR Pauta de Supervisión 12 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 13 de 14 CLÍNICA MAYOR 11.- ANEXOS ANEXO 1 ANEXO 2 13 [DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH, DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES Y PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD] COD: CM/UMT/002 Versión: nº1 Elaboración: 2015 Vigencia: 2018 Páginas: 14 de 14 CLÍNICA MAYOR ANEXO 3 14