Determinación inmunohistoquímica de filamentos intermedios en estructuras de la cara fetal de catorce semanas de desarrollo Gorodner, Ofelia L. Z. De - Godoy, Ramón H. Hospital Regional Ushuaia - Tierra del Fuego - Argentina. Cátedra II de Histología y Embriología - Facultad de Medicina - UNNE. Sargento Cabral 2001 - (3400) Corrientes - Argentina. Tel./Fax: +54 (03783) 439264 - E-mail: [email protected] INTRODUCCION Los filamentos intermedios se encuentran en casi todos los tipos celulares como componentes del citoesqueleto y tienen un espesor de unos 10 ìm, siendo su función específica conferir fuerza mecánica, para lo cual las proteínas que los componen tienen forma alargada. Se conocen actualmente 6 clases diferentes por su composición: queratina, vimentina, desmina, neurofilamentos, filamentos gliales y láminas. Los filamentos de queratina se encuentran en células epiteliales, en tanto los de vimentina en los fibroblastos y en otros tipos celulares de origen mesenquimático. No está bien determinado en qué momento del desarrollo estos filamentos se hacen evidenciables en las distintas estructuras orgánicas ni su evolución cuali-cuantitativa posterior. El presente trabajo se propone determinar la presencia de filamentos de queratina y de vimentina en estructuras de la cara en desarrollo en un momento de la vida fetal: catorce semanas. MATERIALES Y METODOS Se aplicó la técnica inmunohistoquímica a cortes sagitales seriados de cara de un feto de catorce semanas de desarrollo, empleándose el sistema avidina-biotina-peroxidasa y utilizando como antisueros primarios un cocktail de anticuerpos monoclonales de panqueratina ( AE1-AE3 ) , citoqueratina 7 ( CK – 7 ) y anti-vimentina ( Vim 384 ). Las muestras fueron procesadas para microscopía óptica, fijadas en formol buffer e incluídas en parafina. DISCUSION DE RESULTADOS Se observó inmunorectividad a citoqueratinas en la epidermis en células aisladas de la capa peridérmica y negatividad de las de las capas basal e intermedias, no visualizándose melanocitos. También mostraron fuerte positividad los epitelios estratificados de la cavidad bucal y faringe y el seudoestratificado de cavidades nasales y paranasales, las estructuras glandulares en formación, especialmente las porciones conductoras y células serosas de los adenómeros. La adenohipófisis no fue reactiva. Fig 1 y 2. Figura 1. Citoqueratina positiva en capa peridérmica de la piel. 100 X Figura 2. Citoqueratina positiva en epitelio seudoestratificado de seno paranasal. 250 X Citoqueratina 7 fue positiva en estructuras glandulares, tanto en porciones conductoras como en adenómeros, en condrocitos, filetes nerviosos y epitelio respiratorio. La epidermis, epitelios mucosos estratificados y adenohipófisis resultaron negativos. Fig 3 Figura 3. Citoqueratina 7 positiva en estructuras glandulares. 250 X Vimentina se detectó en endotelios vasculares, filetes nerviosos y células mesenquimáticas en diferenciación conectiva. Figura 4. Vimentina positiva en filetes nerviosos. 250 X En el adulto las citoqueratinas se encuentran exclusivamente en las células epiteliales, cualquiera sea la hoja germinativa de origen e independientemente del tipo de organización de las mismas. Debe hacerse una mención especial acerca de la epidermis cuyo crecimiento ocurre en etapas: el primordio ectodérmico en la quinta semana se divide en una capa basal y una superficial o peridermo, la que sufre en forma continua queratinización y descamación, explicando la reactividad aislada observada. La capa basal origina el estrato intermedio, que sólo madura hacia finales del cuarto mes adquiriendo su organización definitiva; los melanocitos, derivados de la cresta neural, migran a los tres meses de desarrollo y se incorporan a la unión dermo-epidérmica más tardíamente. Respecto a citoqueratina 7, se encuentra en tejidos normales en un gran número de tipos de células epiteliales incluyendo epitelios glandulares y ductales excluyendo epitelios escamosos estratificados. Encontramos positividad en condrocitos, hallazgo vinculado a la gran actividad de los mismo en esta etapa del desarrollo, también detectamos fuerte positividad a la tinción con queratina en los filetes nerviosos, en forma de anillo alrededor de la capa de mielina, localización coincidente con la de una sustancia denominada neuroqueratina observable en preparaciones fijadas con tetróxido de osmio. Vimentina es una proteína presente en células de origen, mesenquimático, tales como endoteliales, fibroblastos, musculares lisas, linfoides, etc. CONCLUSIONES Las observaciones realizadas permiten obtener datos acerca de la localización de algunos de los filamentos intermedios en un momento dado del desarrollo humano y analizar las diferencias con respecto a células plenamente desarrolladas del adulto. BIBLIOGRAFIA 12. 3. 4. 5. 6. Bloom-Fawcett “Tratado de Histología” -2º ed. –1995. Editorial Interamericana.Finn Geneser."Histología "- 3º ed. – 2000. Editorial Panamericana.Gartner, Hiatt “Histología” (texto y atlas) – 1997- Editorial Interamericana.Hib. “Embriología Médica” - 7º ed. 1999 - Editorial Interamericana.Langman. “Embriología Médica” - 8º ed. 1997 - Editorial Panamericana.Ross-Romrell. “Histología” - (texto y atlas color) - 3º ed. 1997- Editorial Panamericana.-