Chlamydia trachomatis

Chlamydia trachomatis
Chlamydia trachomatis
Familia: Chlamydiaceae
Género: Chlamydia
Especies: C. trachomatis
C. psittaci
C. pneumoniae
Clamidias
Como otras bacterias::
• Presentan DNA y RNA
• Su envoltura celular es similar a la
pared celular de las
bacterias Gram negativas
• Sintetizan casi todas sus enzimas
• Son sensibles a antibacterianos tales como tetraciclina
y claritromicina
Clamidias
Características exclusivas:
• No sintetizan hexoquinasa ni ATP
(parásitos energéticos obligados)
• Su ciclo celular presenta 2 formas
celulares:
El CE es la forma infectante, contiene al
“ligando” y es una bacteria esférica de
0.25 a 0.4 μm de Ф, con centro denso (ác.
nucleicos + ribosomas)
El CR es la forma metabólicamente activa y
su Ф fluctúa entre 0.5 y 1 μm
Clamidias: Ciclo vital
CE-ligando
Fijación a
la CH
Penetración a
la CH
colonia con
CRs/CEs
Fisión
binaria de
CRs
Conversión a
CR; libera fagolisosomasa
Predominio
de CEs
Estallamiento
de la CH
CE-ligando...
Clamidias: Ciclo vital
C. trachomatis: Patología
Variedades
Serotipos
LGV
L1, L2, L3
A, B, Ba, C
C. trachomatis
Enfermedades
LGV
Tracoma
TRIC
D a la K
Neumonía
del ratón
IC, UNG,
cervicitis,
etc.
C. trachomatis “D” a la “K”
perihepatitis
neumonía neonatal
EIP
salpingitis
IC neonatal
cervicitis
IC
endometritis
infertilidad
mano 1 ó 2
ojos
Secreciones
en albercas
peritonitis
faringitis
UNG
prostatitis
epididimitis
Recolección y procesamiento
de las muestras
SED
PBS
Cultivo de clamidias
1. Obtención de la monocapa de células
hospederas
Células McCoy
o HeLa
Medio
Mínimo
Esencial
de Eagle
+ 10% de
SFB
Monocapa de céls
McCoy o HeLa
48-72 h, 37°C
Cubreobjetos
Cultivo de clamidias
2. Cultivo del SED en la monocapa de
células hospederas
10 μL del SED
MMEE + 10%SFB
+ cicloheximida
Tinción con
lugol
Incubación
40 h, 37°C
Inmunofluorescencia Indirecta
A una preparación del SED fijada con acetona a –20°C:
1.
2.
3.
4.
5.
20 μL de suero anti-C. trachomatis (conejo)
Incubar 45 minutos en cámara húmeda
Lavar 15 minutos con PBS
Secar con papel filtro
20 μL de suero anti-γ globulina de conejo
(cabra) marcado con fluoresceína
6. Repetir 3, 4 y 5
7. Montar la preparación
8. Observar con microscopio de fluorescencia
Inmunofluorescencia Indirecta
Ensayo Inmunoenzimático
Se requiere:
• Esfera de poliestireno 4mm recubierta con
Ac´s anti-C. trachomatis, fijados por su Fc
• Suero anti-C. trachomatis, preparado en
conejo
• Suero anti-γ globulina de conejo marcado
con peroxidasa y preparado en cabra
• [O-fenilendiamina-H2O2]
• Placas de poliestireno con pozos
• SED
EIA positivo
Diagnóstico Indirecto
• No se realiza, dado que no existen
diferencias significativas en los títulos
séricos asociados a enfermedad, respecto
a los mostrados por personas sanas que
han entrado en contacto con el
microorganismo
• Sólo es útil para el caso de sospecha de
neumonía neonatal