Obtención de muestras de suero con calidad para favorecer la

¿Sabías qué?
Enfoque en la obtención de muestras de suero
BD PAS MÉXICO, CENTROAMÉRICA Y CARIBE • Volumen 4
Obtención de muestras de suero con
calidad para favorecer la eficiencia
del proceso y la calidad del resultado
Contenido
La muestra de sangre, un
componente esencial para
el análisis
Obtención de muestras
de suero
La obtención de muestras
de suero y sus retos
Tubos para la obtención
de muestras de suero
Separadores de suero
y aceleradores de
coagulación
Tiempo de centrifugación
y fuerza centrífuga relativa
(FCR)
La importancia de la
obtención de la muestra
de suero para el
laboratorio clínico
Recomendaciones
La muestra de sangre, un componente esencial para el análisis
La muestra de sangre es un componente esencial en la prestación de la asistencia sanitaria. Cada día, los
trabajadores de la salud recolectan millones de muestras de sangre para realizar los análisis de laboratorio,
incluyendo una amplia gama de analitos y de parámetros biológicos para ayudar en el diagnóstico y seguimiento
de un padecimiento o de una enfermedad. Una prueba de laboratorio se realiza en su mayor parte utilizando una
muestra de sangre del paciente, dicha muestra puede ser utilizada en una de las tres diferentes preparaciones,
sangre completa, plasma o suero, existiendo diversos criterios que determinan cual muestra es la más adecuada
para el análisis.
Obtención de muestras de suero
La muestra de suero es obtenida a partir de sangre completa, la cual es separada
en sus diversos componentes mediante un proceso de centrifugación, dicho
proceso es dividido en tres etapas principales: pre-centrifugación, centrifugación
y post-centrifugación. Para poder llevar acabo la etapa de centrifugación debe
haber finalizado el proceso de coagulación de la sangre. Es muy importante
asegurarse de que la muestra de sangre ha coagulado completamente antes
de ser centrifugada.
Normalmente, el tiempo de espera para que la sangre coagule completamente
es de cuando menos 30 minutos. Sin embargo, los pacientes que están con
terapia anticoagulante o aquellos con deficiencias en la coagulación tendrán
procesos de coagulación más largos.
La muestra de suero está desprovista de
factores de coagulación, pero enriquecida
con los componentes celulares y productos
metabólicos de plaquetas.
Proceso de centrifugación
10
30
¿Cómo puede ayudar BD?
Pre-centrifugación
Centrifugación
Post-centrifugación
BD PAS MÉXICO, CENTROAMÉRICA Y CARIBE • Volumen 4
La obtención de muestras de suero
y sus retos
Tubos para la obtención de suero
Tubos de tapón rojo
Es recomendable que la muestra de sangre para la obtención de suero
sea extraída con un sistema cerrado al vacío, el cual incluye el tubo para
la recolección. Existen diferentes tubos al vacío con los cuales el laboratorio
clínico puede realizar la obtención de muestras de suero, sin embargo, la
selección del tipo de tubo depende en gran medida de la toma de muestra,
del proceso del laboratorio (manual, automatizado o robotizado), del tiempo
de respuesta requerido para la emisión del resultado y de la prioridad para el
procesamiento de la muestra (muestras STAT/urgentes).
Adicionados con partículas de sílice como activador de la
coagulación, permiten la completa formación de coágulo
en un periodo de 60 minutos. Ideales para procesos donde
no se requiere el uso de tubos primarios y en donde la etapa
de pre-centrifugación puede establecerse en periodos más
largos, teniendo un tiempo de contacto de suero/células
menor a 2 horas.
Tubos con gel separador
Por todo lo anterior, aunque la obtención de muestras de suero es
aparentemente un procedimiento sencillo donde sólo basta recolectar y
centrifugar la muestra, en realidad involucra múltiples variables que pueden
generar un gran impacto, afectando la estabilidad y calidad de la muestra,
la eficiencia del proceso y la confiablidad del resultado, implicando entonces
múltiples retos en la obtención de muestras de suero al laboratorio clínico.
Contiene una barrera de gel inerte y están adicionados con
partículas de sílice para activar la coagulación. Permiten la
completa formación del coágulo en un periodo de 30 min.
Ideales para procesos automatizados donde se requiere el
uso de tubos primarios y en donde la muestra recolectada
involucra un tiempo de contacto suero/células mayor a 2
horas (toma de muestra en sucursales).
Tubos con trombina
Contienen una barrera de gel inerte y están adicionados con
trombina como acelerador y activador de la coagulación.
Permiten la completa formación del coágulo en un tiempo
de 5 min. Ideales para procesos automatizados donde se
requiere el uso de tubos primarios y en donde la muestra
recolectada involucra un tiempo de contacto suero/
células menor a 2 horas (toma de muestra en sucursales)
y para muestras con una alta prioridad de proceso (STAT/
Urgentes) así como para uso con pacientes con terapia
anticoagulante o con tiempos largos de coagulación.
Tiempo de centrifugación
y fuerza centrífuga relativa (FCR)
Separadores de suero, activadores y
aceleradores de la coagulación
Separadores de suero: son divididos en 2 categorías, los que se utilizan
para separar la muestra durante la etapa de centrifugación como las barreras
de gel y los que se utilizan post-centrifugación, como:
·Barreras de gel: El uso de gel como barrera física inerte controla la
viscosidad y gravedad específica, siendo un intermediario entre el suero y
el coágulo, evitando el contacto y contaminación del suero con el paquete
celular. La formación de la barrera de gel depende de la FCR que se aplique
al centrifugar, misma que es establecida por el fabricante y puede ir desde
1000g hasta 2500g.
Partículas de sílice: Son adicionadas como un activador de coagulación
en las paredes del tubo, su tiempo de acción ocurre en un periodo de 30 a
60 minutos.
Trombina: Es adicionada como acelerador y activador de la coagulación
generando la completa formación de coágulo en un tiempo de 5 minutos.
Todos estos sistemas están disponibles en una gran variedad de tubos.
La centrifugación de la muestra es una etapa fundamental para la obtención
de muestras de suero con calidad. Las velocidades de centrifugación serán
determinadas conforme a la fuerza centrífuga relativa (FCR) del tubo utilizado
y al tipo de centrífuga utilizada en el proceso. La FCR es expresada en
gravedades, siendo el término más utilizado para determinar las revoluciones
por minuto (rpm). Las rpm por lo tanto son limitadas y dependientes del tipo
de tubo, modelo de centrífuga, rotor y cabezal específico.
La FCR está relacionada con el ajuste de la velocidad de la centrífuga (rpm)
mediante la siguiente ecuación:
rpm=
RCF x 105
1.2 x r
Donde “r” se expresa en cm y es la distancia radial desde
el centro del cabezal de la centrífuga hasta el fondo del tubo.
La centrifugación se realiza comúnmente entre 20 y 22 °C, especialmente
si durante la centrifugación incrementa la temperatura ocasionada por el
aumento en el número de rpm requeridas para la separación de la muestra.
Por otro lado, los avances en la tecnología incluyen separadores como las
barreras de gel y aditivos que proveen una adecuada separación de la
muestra a diferentes velocidades y tiempos de centrifugación, considerando
las propias necesidades del proceso de análisis.
¿Sabías qué?
La importancia de la obtención de la muestra de suero para el proceso de laboratorio clínico.
La obtención de muestras de suero con calidad y la reducción del tiempo
de respuesta para la entrega de resultados son iniciativas importantes para
muchos laboratorios clínicos. Estas iniciativas están enfocadas principalmente
en acortar el intervalo de tiempo entre la extracción de la muestra y la fase de
análisis, sin afectar su calidad, involucran aspectos muy importantes que suelen
pasar desapercibidos y con frecuencia quedan fuera de control, teniendo un
impacto en todo el proceso de análisis, así como en la calidad y confiabilidad
del resultado.
Un aspecto muy importante para la obtención de suero es el tiempo de
espera para la formación completa del coágulo, el cual, en condiciones
normales es de al menos 30 minutos. La necesidad de cumplir con este
tiempo, genera en el laboratorio la decisión de mantener o no a las
muestras en un tiempo de “espera” haciendo que el tiempo empleado
para la etapa de pre-centrifugación de la muestra sea más largo, lo que
afecta el proceso de análisis haciendo que éste se retrase, impactando
directamente el tiempo de respuesta para la entrega de resultados. Este
impacto es aún mayor cuando se trata de muestras de prioridad (STAT) o
de muestras urgentes que provienen de las áreas de emergencia o terapia
intensiva donde el obtener un resultado en el menor tiempo posible es de
vital importancia.
Por otro lado, el tiempo requerido para la formación completa del coágulo tendrá también un impacto directo en la calidad de la muestra. Si este tiempo no
es el adecuado y la muestra es centrifugada antes de alcanzar la formación
completa del coágulo, se tendrá como resultado la obtención de muestras de
suero con una pobre calidad y con presencia de contaminantes, principalmente
fibrina y hemolisis, por lo que el laboratorio se verá en la necesidad de re-centrifugar y reprocesar las muestras. Por lo anterior no sólo se retrasará nuevamente
el proceso de análisis y el tiempo de respuesta para la emisión de resultados
sino que también se podrá incurrir en costos innecesarios por re-procesos.
De esta manera, la calidad y confiablidad de los resultados generados por el
laboratorio clínico son completamente dependientes del reconocimiento de
la presencia de la problemática pre-analítica. La consecuencia de obtener
resultados erróneos puede conducir a un diagnóstico inapropiado y derivar en
una posible terapia inadecuada y en otros problemas prevenibles.
La obtención de una muestra de suero de alta calidad será por lo tanto, el
resultado de un adecuado y controlado proceso preanalítico de centrifugación,
lo que implica que el laboratorio enfrente grandes retos en la obtención de
muestras de suero de alta calidad para el análisis y para mejorar la eficiencia en
el tiempo de respuesta para la entrega de resultados.
Incidencia de errores preanalíticos y muestras comprometidas en el proceso de centrifugación
Muestras con hilos de fibrina presentes en el suero
posterior a la centrifugación
26%
74%
Muestras con hilos de fibrina suspendidos en el suero
Muestras comprometidas para las pruebas de química clínica
76%
24%
Muestras de suero limpias
Gráfico 1. Calidad de muestra. % de muestras con presencia de hilos de fibrina
presentes en el suero posterior a la centrifugación de un total de 42 muestras verificadas
en un hospital de 3er nivel.
Muestras con dos o más errores preanalíticos
Muestras sin errores preanalíticos
Gráfico 2. Muestras comprometidas. % de muestras comprometidas para las pruebas
de química clínica de un total de 42 muestras verificadas, de las cuales el 26% podría a
ocasionar un impacto en el desempeño del analizador.
Recomendaciones del CLSI para la obtención de las muestras de suero
Pre-centrifugación
P Los tubos deben ser invertidos suavemente de 5 a 10 veces para mezclar el contenido con el aditivo, esto evitará la formación de fibrina posterior a la
centrifugación.
P Mantener a los tubos en una posición vertical para promover la completa formación del coágulo disminuyendo la agitación del tubo, esto prevendrá la
formación de fibrina por la adhesión del coágulo al tapón del tubo así como el potencial de hemolisis.
P Las muestras no centrifugadas enviadas al laboratorio para análisis, deberán llegar en un tiempo límite para ser centrifugadas y proteger la estabilidad de
los metabolitos. De no ser posible, la muestra debe ser centrifugada en el sitio donde se realizó la recolección, posteriormente enviar la muestra separada
al laboratorio bajo las condiciones apropiadas.
Centrifugación
P Las muestras deberán estar completamente coaguladas antes de la centrifugación (30 min). Rodear el coágulo con un aplicador para desprenderlo de las
paredes del tubo no es recomendable ya que incrementa el potencial de hemolisis.
P Determinar las rpm requeridas para centrifugar el tubo siguiendo las recomendaciones del fabricante ya que los tubos pueden requerir diferentes
velocidades y tiempos de centrifugación.
P Aumentar las rpm para acelerar la separación puede ocasionar un calentamiento excesivo en la centrífuga, lo que afectará la estabilidad de la muestra
y el desempeño del tubo.
Post-centrifugación
P La muestra de suero debe ser físicamente separada del contacto con las células tan pronto como sea posible, esto a menos de que exista evidencia
concluyente que indique que los periodos largos de contacto no contribuyen a un error en el resultado. El tiempo de contacto no debe ser mayor a
2 hrs, para ello es recomendable el uso de separadores.
P Los tubos primarios no deben ser re-centrifugados. Algunas mediciones, principalmente el potasio, pueden resultar en valores falsamente incre-
mentados. Si la re-centrifugación es requerida el suero debe ser transferido a otro tubo para ser centrifugado.
P Para el uso de tubos con separadores como la barrera de gel es importante seguir las recomendaciones del fabricante.
P El laboratorio debe establecer los criterios para el rechazo de muestras no adecuadas para el análisis. Lo anterior cuando se tenga una incorrecta
identificación de la muestra, un inapropiado volumen, el uso de tubos no adecuados, presencia de hemolisis y un inapropiado almacenamiento y
transportación.
¿Cómo puede ayudar BD?
Los diversos retos que enfrentan los trabajadores de laboratorio clínico para el procesamiento de las muestras de sangre para la obtención de suero, han
sido documentados en la literatura científica, ayudando a comprender y mejorar el control de la problemática específica relacionada al tiempo de espera
para la adecuada y completa formación del coágulo, el contacto prolongado de la muestra de suero con las células, la presencia de hemolisis, el uso de
aditivos y de dispositivos de separación de suero.
Una parte fundamental para la obtención de muestras de suero con calidad es el reconocimiento y control de las variables que afectan el proceso de
obtención, lo que ayudará a reducir las fuentes de error y contribuir a la práctica médica de los resultados de las pruebas del paciente.
BD comprende la importancia de un resultado a partir de la obtención de muestras de suero, ofreciendo soluciones que favorezcan la disminución y el
control de variables que afectan en el proceso preanalítico para la obtención de muestras de suero.
Seleccionar adecuadamente los tubos para la obtención de suero teniendo como base el mismo proceso en el laboratorio clínico, así como el adecuado
proceso para la centrifugación, separación y transporte de las muestras, contribuirá en gran medida a mejorar la eficiencia del proceso y la calidad del
resultado.
Por todo ello, y como parte del compromiso de apoyar a la mejora de los procedimientos de recolección de muestras y a la calidad de las muestras de
suero, BD ofrece tubos para la obtención de muestras de suero diseñados para las diferentes necesidades de recolección y de proceso del laboratorio
clínico. Estos tubos contienen activadores y aceleradores de coagulación para una adecuada y completa formación del coágulo, así como barreras de gel
que protegen la muestra de suero del contacto prolongado con las células, además de poder ser utilizados como tubos primarios para la mayoría de los
sistemas automatizados proporcionando beneficios y soluciones a los retos que rodean a la obtención de la muestra de suero:
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Muestra de mejor calidad
Tiempos de respuesta cortos
Seguridad del paciente y del trabajador de la salud
Satisfacción del paciente
Optimización de recursos
Referencias:
H18-A4 Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens for Common Laboratory Test; Approved Guideline- Fourth Edition, Vol. 30 No. 10.
Heparin Plasma Testing in Clinical Chemistry, Archivo BD, VS7584.
Phlebotomy Handbook, Diana Garza, Kathleen Becan-McBride, fourth edition, 1996.
W.G. Guder, S. Narayanan, H. Wisser, B Zawta. Samples: From the Patient to the Laboratory. GitVerlag.
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