USO DE ISÓTOPOS ESTABLES EN LA MEDICIÓN DE LA COMPOSICIÓN CORPORAL: FUNDAMENTACIÓN Y ESTUDIOS EN URUGUAY CURSO TALLER : COMPOSICIÓN CORPORAL: ESTUDIO MULTICOMPARTIMENTAL PARA LA INVESTIGACIÓN EN NUTRICIÓN HUMANA 2013- ESCUELA DE NUTRICIÓN - UDELAR Prof.Agdo. Ana Paula Della Santa Isótopos Los átomos se clasifican de acuerdo al nº de protones y nº neutrones. nº de protones determina su elemento químico nº neutrones determina su isótopo. Isótopos del H Los isótopos son formas diferentes de un elemento químico : tienen el mismo nº de protones en el núcleo pero diferente nº neutrones. Isótopos estables No son radiactivos están en el ambiente y cuerpo humano en concentraciones conocidas como abundancia natural Abundancia natural deuterio es 0.015% - significa mujer adulta 35Kg tiene 30 Kg agua corporal y Tendría 4,5g deuterio. Hidrógeno tiene 2 isótopos estables : 1H- protio 2H- deuterio Isótopos radioactivos – tienen un núcleo inestable por lo que emiten radiación en forma de partículas u ondas- Tritio es el isótopo radiactivo del H (3H). Porqué utilizar los isótopos estables ? • Constituyen un estándar de referencia para la determinación de agua corporal total (ACT) y Gasto Energético. • Las dosis utilizadas son seguras empleándose en individuos de todas las edades. • No alteran procesos fisiológicos o mecanismos homeostáticos. • Se pueden usar en condiciones normales de vida. Isótopos utilizados para medir Agua Corporal Total • El deuterio (2H), el tritio (3H) y el Oxígeno 18 (18O ) se han utilizado para medir agua corporal total (ACT). • El 2H es el isótopo de elección porque el uso de 3H involucra de exposición a radiación, y el uso de 18 O tiene costos elevados ( 1gr 2H – $U 31.9 y 1gr 18 O – $U 151.3). • El ACT también se mide con 2H218O como parte del método de Agua Doblemente Marcada para la medición del Gasto Energético. ) Principales aplicaciones usando Óxido de Deuterio (2H2O o D2O ) Óxido de Deuterio – agua en la cual el 99.8% o 99.9% de átomos de H están en forma de deuterio. • Medición del agua corporal total (ACT) para estimar la masa libre de grasa (MLG) y masa grasa (MG) • Ingestión de leche materna y composición corporal de la madre . • Junto con la dosificación de Oxigeno-18 (como 2H218O, ADM) el gasto energético en condiciones de vida libre. • Medición de reservas corporales de vitamina A usando retinol deuterado. • Resistencia Insulina usando glucosa deuterada. Método de dilución con óxido de deuterio para medir agua corporal total (ACT) Técnica para la medición del agua corporal de donde se puede derivar la estimación de la Composición Corporal , basado en un modelo de 2 compartimentos (2C) : masa grasa (MG) y la masa libre de grasa (MLG) Supuesto básico del modelo de 2C a partir de ACT: Hidratación de la MLG en Adultos sanos el 73.2% . Varia durante la niñez y adolescencia (1,2) MLG (kg = ACT/0.732 (u otro). MG se calcula a partir de la diferencia entre MLG y el peso corporal 1- Lohan, TG . Estimating body composition in children and the elderly, in Advance in Body Compsotion Assessment, Humman Kinetics, Champaign, IL (1992) 2- Fomon et al. Body compostion during the first 2 years of life: An update reference, Pediatr.Res.47(2000). MÉTODO DE DILUCIÓN CON ÓXIDO DE DEUTERIO PARA ESTIMAR EL AGUA CORPORAL TOTAL (Técnica de equilibrio) - AYUNO 30 Min - VEJIGA VACIA PESAR A LA PERSONA (mínimo ropa) COLECTAR MUESTRA BIOLÓGICA (saliva, orina, plasma) Los participantes no deben comer o beber nada durante el período del estudio. Tampoco deben hacer actividad física.física durante este período. PARTCIPANTE TOMA LA DOSIS DE 2H2O Y LA DE ENGUAGUE. ESPERAR 3 hrs A QUE LA DOSIS SE EQUILIBRE CON EL AGUA CORPORAL COLECTAR MUESTRA BIOLÓGICA POST - DOSIS Análisis del enriquecimiento de deuterio en el agua corporal, se puede medir en muestras biológicas (saliva, orina y plasma) empleando : Espectrometría de Masas de Relación Isotópica (IRMS) • Espectroscopia de Infrarrojo con Transformadas de Fourier (FTIR). Medición de la Composición Corporal mediante el método de dilución isótopica con óxido de deuterio Estudios realizados en Uruguay con apoyo del Organismo Internacional de Energía Atómica (OIEA) División Salud Humana Nutrición y Estudios Ambientales relacionados con la Salud (NAHRES) LA PARTICIPACIÓN DE LA ESCUELA DE NUTRICIÓN EN LOS PROYECTOS DEL OIEA HA CONTRIBUIDO A : Desarrollar las capacidades para aplicación de las técnicas isotópicas en el área de la nutrición y salud , mediante el entrenamiento de profesionales y estudiantes universitarios a través de becas y cursos- talleres, el asesoramiento de expertos y la dotación de equipos. Fortalecer la enseñanza de grado y posgrado. Consolidar el Laboratorio de Evaluación del Estado Nutricional y Metabolismo Energético(EN-UdelaR) Generar conocimientos valiosos para el área de la nutrición y para la evaluación de programas de prevención de salud. Desarrollar un trabajo colaborativo interinstitucional y regional en América Latina y El Caribe Ecuaciones de predicción de composición corporal en preescolares del Uruguay 2006 - 2008 Equipo investigador : Della Santa AP,Britz M; Aznárez A;Silveira A Equipo Técnico : Defféminis M, Pandolfo V, Perrone V, Sena G, Silveira A. Asistentes en el trabajo de campo: Vidal S, Rey T, Moratorio X, López L, Belmonte S, Medina L, Martínez L, Aria A, Alegre V, Silva A, Easton M. Santín V. OBJETIVO : Desarrollar ecuaciones de predicción para medir grasa corporal en niños de 4 a 6 años a partir de medidas antropométricas y de impedancia bioeléctrica validadas con el método de dilución isotópica con óxido de deuterio. ESTUDIO Descriptivo de corte transversal – 2006-2007 POBLACIÓN - 191 niños de 4 a 6 años de ambos sexos (95 mujeres y 96 varones) - 6 Centros de Educación Inicial (CEI) públicos de la ciudad de Montevideo. Criterios Exclusión : presencia de patologías que alteren la CC, patologías o impedimentos físicos que afecten el crecimiento y desarrollo normal, medicamentos que puedan interferir con el grado de hidratación o metabolismo. MEDIDAS Antropometría : Peso Talla Circunferencias : Cintura , Brazo, Pantorrilla Pliegues :Tricipital- Bicipital- Subescapular- Suprailíaco- Pantorrilla Estudio de impedancia bioeléctrica QuadScand 4000 de Bodystat Método de dilución isotópica con D2O. Pesar niño/a Toma la muestra basal Consumo una cantidad conocida de D2O El enriquecimiento llega a una "meseta" después de cerca de 3 h Toma muestra pos-dosis en la meseta de enriquecimiento DISEÑO Y VALIDACIÓN DE ECUACIONES PREDICTORAS DE LA COMPOSICIÓN CORPORAL Seleccionando la mejor ecuación Seleccionando la mejor ecuación Problema : Existe una variable dependiente (MLG,MG o ACT) que es la que se pretende medir y un grupo de variables predictoras : T2/R, edad, sexo, peso talla,etc.. El objetivo es determinar el mejor sub-grupo de posibles variables predictoras que permitan estimar la variable dependiente. SECUENCIA DE PASOS PARA EL DISEÑO Y VALIDACIÓN DE ECUACIONES PREDICTORAS DE LA COMPOSICIÓN CORPORAL Se dividió la muestra ( n=191) mediante randomización en 2 submuestras: - 134 niños ( 70%) para diseñar las ecuaciones - 57 niños ( 30 %) para la validación de las mismas Se integraron en un modelo de regresión múltiple todas las variables seleccionadas y se construyeron las ecuaciones posibles seleccionándose las que mejor cumplieran los criterios de ajuste estadístico. Se empleó el Programa estadístico NCSS 2007(Hintza, J 2007.NCSS, Kaysville, Utah, USA Las ecuaciones finales de predicción de MLG mediante antropometría y BIE fueron las siguientes : MLG (Kg) = 2,0895 + (0,3464 x T²/ R) + (0,3122 x Peso) + (0,6597 x Sexo) R² = 0.920 y S.R.M.S.E. = 0.673 kg. MLG (Kg.) = - 0.8228 + (0.5926 x Peso) – (0.1045 x Pliegue tricipital) – (0.1378 x Pliegue subescapular) + (0.7603 x sexo) + (0.0538 xTalla) R² = 0.923 y S.R.M.S.E. = 0.683 kg. Masa Grasa (%), masa libre de grasa (kg) por diferentes métodos en todos los niños de la muestra final por sexo (n=191) Los valores MLG se expresan como promedios ± desvíación estándar. El % de la MG se presenta con intervalos Varones (n=96) Mujeres (n=95) MG (%) MLG (Kg) MG (%) MLG (Kg) 21,61 9,5 – 34,1 16,43 ± 2,42 26,63 15,8 - 43.2 14,69 ± 2,01 Ecuación basada en Índice de Impedancia 21,52 11,9 – 33,3 16,46 ± 2,22 Ecuación basada en Antropometría 21,73 12,8 – 32,9 16,69 ± 2,18 Deuterio 26,65 18,4 –37,3 26,02 15,1 –38,2 14,70 ± 1,87 14,60 ± 1,60 No existen diferencias estadísticamente significativas entre MLG (Kg.) por dilución isotópica con óxido de deuterio y MLG (Kg.) calculada s por las ecuaciones desarrollada s (valor p >0,05 Test de T). Lo mismo se encontró para MLG% (valor p>0,05 , Test de T). Comparación de la MLG (Kg) medida mediante dilución isotópica con óxido de deuterio y el valor de la MLG (Kg) estimada mediante la ecuación basada en el índice de impedancia y antropometría (n=57) Comparación de la MLG (Kg.) medida mediante dilución isotópica con óxido de deuterio y el valor de MLG (Kg.) estimado mediante la ecuación antropometría. (n = 57) El R² fue de 0,91 El R² fue de 0,92 Las ecuaciones diseñadas para niños preescolares uruguayos, basadas en un modelo de dos compartimentos, son confiables y permiten predecir la composición corporal tanto en la práctica clínica como en estudios epidemiológicos para evaluar el impacto de las intervenciones para reducir la obesidad infantil. Una de las Ecuaciones se utilizó para estimar la composición corporal en preescolares en el : Estudio de la eficacia de un modelo de intervención (piloto) para prevenir y controlar la obesidad infantil. Equipo investigador: Della Santa AP, Britz M,Defféminis M, Martínez J, Dornell T, Cavalleri F. Asist. trabajo de campo: Roqueta A,Tomma N,Rubio V., Martínez L, Muniz F. Factores de riesgo asociados al síndrome metabólico(SM) en escolares uruguayos 2010 -2012 Equipo investigador :Della Santa, AP; Britz, M; Umpierrez, E; Silveira,A; Aznárez. Asistentes trabajo de campo: María Umpierrez,Adriana Cauci, Gabriela Fajardo, OBJETIVO : Conocer la prevalencia del SM y la relación del porcentaje de Masa Grasa (% MG) con sus componentes en escolares uruguayos ESTUDIO : Descriptivo de corte transversal POBLACIÓN : 79 niños de 6-9 años de ambos sexos asistentes a escuelas públicas en Montevideo. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN : cualquier patología que alterara la composición corporal (insuficiencia cardíaca, renal, trastornos gastrointestinales y metabólicos) o impedimentos físicos que afectaran el normal crecimiento y desarrollo o quienes recibían medicación que interfiriera con el grado de hidratación o que alterara el metabolismo de los lípidos, la glucemia o la presión arterial. . MEDIDAS Índice de Masa Corporal (OMS;2007) Circunferencia de la Cintura (Fernández y col;2004) Presión Arterial (National High Blood Pressure EducationProgram Working Group on Hypertension Control in Children and Adolescents.Update on the 2004). % Masa Grasa (técnica de dilución isotópica con óxido de deuterio ) Perfil lipídico (colesterol, triglicéridos y colesterol HDL) y la glicemia (muestra de 10 ml de sangre venosa en ayunas) El SÍNDROME METABÓLICO fue diagnosticado cuando tres o más de los siguientes criterios fue encontrado: - Circunferencia de Cintura ≥P90, - Presión Arterial ≥P90 - Triglicéridos ≥110mg/dl - Colesterol HDL ≤40mg/dl - Glucosa de ayuno ≥100mg/dl. RESULTADOS Prevalencia de SM 7,6% Presencia del SM según estado nutricional (n=79) Prevalencia de los factores de riesgo cardiovascular en los niños con SM (n=6) Porcentaje de MG (Media+/- EE) según presencia de los componentes del SM (n=79) Componentes del SM Circunferencia cintura (cm) ≥ P90 Presión arterial sistólica Presencia Ausencia (p) 30,2 ± 1,91 (IC 95% 26,4;33,9 ) 22,5±0,85 (IC 95% 20,9;24,2) 0,002 24,8 ± 3,7 (IC 95% 21,1;28,5 ) 23,6±0,9 (IC 95% 21,8;25,5) 0,58 30,2 ± 2,8 (IC 95% 24,6;35,7 ) 23,3 ±0,8 (IC 95%21,7;25,0 ) 0,06 30,0 ± 2,02 (IC 95% 26,1;33,9 ) 22,9±0,86 (IC 95%21,2;24,6 ) 0,006 26,7 ± 3,6 (IC 95% 19,7;33,7) 23,6±0,8 (IC 95% 21,9;25,2 ) 0,42 20,3 ±0,8 (IC 95% 18,8;21,8) 23,9± 0,9 (IC 95% 22,3;25,6) 0.02 (mmHg ) ≥ P90 Presión arterial diastólica (mmHg) ≥ P90 Triglicéridos ≥ 110 mg/dl Colesterol HDL ≤ 40mg/dl Glucosa de ayuno ≥ 100mg/dl El % promedio de MG Niños con SM, - 29,4±1,90 Niños sin SM, - 23,3 ± 0,87 (p<0.02). De los componentes del SM presentes en toda la muestra: la obesidad abdominal y los triglicéridos elevados se encontraron fuertemente asociados a un porcentaje de masa grasa >26. Evaluación de los efectos de las prácticas de alimentación en la composición corporal y el crecimiento del lactante. estudio longitudinal 2009 -2012 Equipo Investigador : Lucas J, Della Santa AP, Britz M; Girona .A. Asistentes trabajo de campo:Nunes AL, Katz R, Cabrera B,Leiserovic R,González AK. OBJECTIVOS : (relacionados con Composición Corporal ) - Estudiar la composición corporal (proporción de masa magra y masa grasa) en los lactantes a los 6 y 12 meses de edad. - Relacionar las diferentes prácticas de alimentación llevadas a cabo y la composición corporal en los lactantes estudiados. Muestra Selección : no probabilística Tamaño : 6 meses de edad. 12 meses 48 lactantes 31 lactantes 2 lactantes descartados 29 lactantes Método de dilución isotópica con óxido de deuterio (Procedimiento) Preparación de la dosis Muestra basal de saliva Administración de la dosis Período de equilibrio Muestra saliva pos dosis Análisis del enriquecimiento de las muestras de saliva Espectrometría de infrarrojo transformada de Fourier Laboratorio de la Divisióm Clínica Médica General y Gerátrica , Facultad Medicina de Riverao Preto, Univ Sana Pablo,Brasil (espectrometría de masas isotópicas) Composición Corporal de los lactantes a los 6 meses de edad por sexo(N = 48) 7 6 Kg 5 Total Corporal body water Agua Total Masa Libremass de Grasa Fat free Fat Mass Masa Grasa 4 3 2 1 0 NIÑAS ( n = 21) Variable VARONES (n = 27) NIÑAS ( n = 21) VARONES (n = 27) Test de t (p) Agua Corporal Total (kg) 4,50 ± 0,45 4,85 ± 0,47 0,01 Masa Libre de Grasa (kg) 5,67 ± 0,56 6,11 ± 0,60 0,01 Masa Grasa (kg) 2,43 ± 0.72 2,10 ± 0,62 0,10 % Masa Grasa 29,45 ± 4,97 25,34 ± 5,97 0,01 Composición Corporal de los lactantes a los 12 meses de edad por sexo (n =29) 8 7 6 Kg 5 Agua Corporal Total 4 Masa Libre de Grasa Masa Grasa 3 2 1 0 NIÑAS (n =10) VARONES (n =19) variables NIÑAS (n =10) VARONES (n=19) Test de t (p) Agua Corporal Total (kg) 5,71 ± 0,35 6,01 ± 0,49 0,09 Masa Libre de Grasa (kg) 7,25 ± 0,44 7,61 ± 0,62 0,11 Masa Gasa (kg) 2,51 ± 0,51 2,16 ± 0,37 0,04 % Masa Grasa 25,5 ± 3,12 22,02 ± 2,56 0,00 Composición corporal de los lactantes a los 6 meses según tipo de alimentación Test de t Variables LME (n = 24) LM (n = 17) (p) Agua Corporal Total (kg) 4,90 ± 0,41 4,52 ± 0,52 0,02 Masa Libre de Grasa (kg) 6,17 ± 0,52 5,69 ± 0,66 0,02 Masa Gasa (kg) 2,37 ± 0,62 2,11 ± 0,67 0,21 Masa Grasa (%) 27,55 ±5,12 26,77 ± 6.66 0,69 Test de t LME (n = 24) LF (n = 7) (p) Agua Corporal Total (kg) 4,90 ± 0,41 4,46 ± 0,43 0,04 Masa Libre de Grasa (kg) 6,17 ± 0,52 5,62 ± 0,54 0,04 Masa Grasa (kg) 2,37 ± 0,62 2,12 ± 0,89 0,50 Masa Grasa (%) 27,56 ±5,12 26.64 ± 6,91 0,76 Composición corporal de los niños a los 12 meses según tipo de alimentación recibida hasta los 6 meses (n=24) Variable LME (n=9) LM (n=13) Test de t (p) Agua Corporal Total (kg) 5,85 ± 0,30 5,95 ± 0,49 0,57 Masa Libre de Grasa (kg) 7,42 ± 0,37 7,54 ± 0,62 0,58 Masa Gasa (kg) 2,30 ± 0,44 2,36 ± 0,41 0,92 Masa Grasa (%) 23,59 ± 3,62 23,74 ± 2,99 0,77 SINDROME METABÓLICO, COMPOSICIÓN CORPORAL Y SCORE DE ACTIVIDAD FÍSICA EN ESCOLARES URUGUAYOS 2011 - 2013 Equipo investigador: Britz M, Della Santa AP, Umpiérrez E, Aznárez A. Asistentes trabajo de campo : Lucía Lasalvia, Gabriela Fajardo, Adriana Cauci, María Inés Umpiérrez , Mary Boya OBJETIVO : estudiar la composición corporal (%MG), la prevalencia de los componentes del SM y la actividad física en escolares uruguayos con sobrepeso/obesidad y con normopeso. ESTUDIO : descriptivo de 77 niños de 6-9 años en escuelas públicas de Montevideo. El SÍNDROME METABÓLICO fue diagnosticado cuando tres o más de los siguientes criterios fue encontrado: - Circunferencia de Cintura ≥P90, - Presión Arterial ≥P90 - Triglicéridos ≥110mg/dl - Colesterol HDL ≤40mg/dl - Glucosa de ayuno ≥100mg/dl. Índice de Masa Corporal (obesidad: IMC/edad>+2DS y sobrepeso>+1DSa+2DS) Circunferencia de la Cintura (Fernández y col;2004) Presión Arterial (National High Blood Pressure EducationProgram Working Group on Hypertension Control in Children and Adolescents.Update on the 2004) % Masa Grasa (técnica de dilución isotópica con óxido de deuterio ) Perfil lipídico (colesterol, triglicéridos y colesterol HDL) y la glicemia (muestra de 10 ml de sangre venosa en ayunas) Actividad física (Score, Godard) 28 escolares con SP/O 49 Normopeso Escolares con SM (n=6) SP/O - 100% %MG ≥26% - 83% Prevalencia de componentes del SM alterados SP/O : Presión Arterial - 39% Circunferencia cintura - 36% Triglicéridos - 32% c-HDL. - 21% Valores promedios de los componentes del Síndrome Metabólico según estado nutricional Componentes del SM Circunferencia cintura (cm) Presión arterial sistólica (mmHg ) Presión arterial diastólica (mmHg) Triglicéridos Colesterol HDL SP/O (n=28) Normales (n=49) Media+/-EE Media+/-EE 68,2±1,5 58,6± 0,7 (IC95% 65,2;71,1) (IC95% 57,3;59,9) 105,9±2,3 106,0±1,7 (IC95% 101,4;110,4) (IC95% 97,3;104,0) 61,5±2,1 57,8±1,2 (IC95% 57,4;65,6) (IC95% 55,4;60,1) 99,9±8,2 72,2±2,5 (IC95% 83,8;115,9) (IC95% 67,3;77,2) 51,1±2,2 61,8±1,6 (IC95% 46,8;55,3) (IC95% 58,6;65,0) 81,3±1 81,3±1,2 (IC95% 79,4;83,2) (IC95% 78,9;83,6) (p) 0,000 0,073 0,134 0,003 0,000 Glucosa de ayuno 1,000 El %MG Con SM - 31.2 ±2.5 Normopeso – 22.9±0,4 (p=0,02). Score de actividad física : SP/O – 4.9 ± 0.27 N – 4.7 ± 0.23 p=0.617Score 5 = actividad sedentaria Evaluación de la ingesta de leche materna y composición corporal de los lactantes y las madres, medida por medio de la dilución de deuterio como indicadores de buenas prácticas alimentarias y del estado nutricional 2012 -2014 Equipo investigador : Della Santa AP. Britz M, Umpiérrez E,Aznárez A, Romero C. Instituciones participantes : Escuela de Nutrición , el Polo Tecnológico de Pando de la Facultad de Química. y Facultad de Medicina. PROPÓSITO: Diseñar y validar herramientas epidemiológicas sencillas para evaluar la ingesta de leche materna y la composición corporal de lactantes y madres lactantes de América Latina y el Caribe, utilizando el método de dilución con óxido de deuterio como método de referencia. ESTRATEGIA DE INVESTIGACIÓN : TIPO DE ESTUDIO: longitudinal descriptivo. : 30 pares de madres e hijos/as á los 3 meses de edad (número mínimo por país) que se asisten en el subsector de salud público o privado de Montevideo. POBLACIÓN Medidas: Antropometría : - Niño/a – peso, longitud y circunferencia cefálica. Indicadores : P / L, L/ E- OMS (2006) - Madre-peso y talla. Indicador: BMI Ingesta leche materna a los 3 meses de edad: Método dilución con óxido de deuterio a la madre. Composición corporal : - Niño/a a los 3 and 11 meses de edad. - Madres a los 3 meses postparto Método dilución con óxido de deuterio. Medidas : Ingesta leche materna a los 3 meses de edad: Método dilución con óxido de deuterio a la madre. Composición corporal : - Niño/a a los 3 and 11 meses de edad. - Madres a los 3 meses postparto Método dilución con óxido de deuterio. Medidas: Información: socioeconómica de la familia, morbilidad y prácticas alimentarias del lactante. (cuestionario) Entre los 4 a los 10 meses - Consulta telefónica una vez al mes sobre la salud de su hijo/a y continuidad de la lactancia materna. METODO DOSIS ÓXIDO DE DEUTERIO A LA MADRE Método para evaluar consumo de leche materna en los lactantes alimentados al seno materno. Se da a la madre una dosis y se mide su tasa de eliminación en la madre y la aparición en el lactante. Con esta técnica también se puede evaluar la cantidad de agua consumida de otras fuentes distintas a la leche materna y la composición materna. INFO del bebé Fecha de nacimiento 12-Feb-10 Sexo f Edad 2.0 meses Peso inicial kg 6.00 Peso final kg 6.27 Ingesta de leche materna (M) 0.947 kg.dia-1 Agua en la leche (Fm) 0.910 kg.dia-1 Agua utilizada en crecimiento(Fg) 0.010 kg.dia-1 Producción total de agua (Fob) 0.978 kg.dia-1 Ingesta de agua no oral (Fa) 0.062 kg.dia-1 Ingesta oral de otras fuentes (Fs) 0.015 kg.dia-1 Raíz cuadrada MSE (mg/kg) 108.39 Error total 947 ml.day-1 15 ml.day-1 Proyecto DOM/6/005- OIEA - Evaluación del proceso de lactancia materna exclusiva en menores de seis (6) meses, en dos UNAP de la Provincia Monte Plata por técnicas nucleares. República Dominicana.2010 Consumió 950 gm/día LM y menos de 25 gr agua de otras fuentes Consumió 230 gm/día LM y 773 gr de agua de otras fuentes