fósforo - Labtronicca

FÓSFORO
Ref: 400 1631L
SIGNIFICADO CLÍNICO
El fosforo en la forma de fosfato inorgánico u orgánico es un
elemento importante y ampliamente distribuido en el cuerpo
humano. Un humano adulto tiene aproximadamente 600 gr. de
fosfato expresado como fósforo, de los cuales aproximadamente el
85% está en el esqueleto y el resto principalmente en el tejido
blando. En el tejido blando, la mayoría del fosfato es celular.
Aunque tanto el fosfato orgánico como el inorgánico están
presentes en las células, la mayor parte es orgánica e incorporada
dentro del ácido nucleíco, los fosfolípidos, las fosfoproteínas y los
compuestos de alta energía involucrados en la integridad celular y
el metabolismo. El plasma contiene aproximadamente 2,5 a 4,5
mg/dL (0,81-1,45 mmol/L) de fosfato inorgánico, la fracción
medida en los análisis bioquímicos de rutina. Las concentraciones
de fosfato en el suero dependen de las comidas y la variación en la
secreción de las hormonas tales como la PTH y puede variar
mucho (hasta 1,5 mg/dL).
Función intracelular: el fosfato tiene diversas acciones en la célula.
Este tiene un papel crítico como un enlace de fosfato de alta
energía en la adenosina trifosfato (ATP) y otros compuestos de
alta energía. Estas fuentes de energía mantiene muchas funcione
fisiológicas tales como la contractibilidad muscular, la función
neurológica y el transporte de electrolitos. El fosfato es un
constituyente de nucleótidos cono también del NADP, el cual es
importante en muchos sistemas de enzimas. El fosfato es también
un elemento esencial en los fosfolípidos de las membranas
celulares, los ácidos nucleícos, y las fosfoproteínas.
El fosfato intracelular está por eso involucrado en la regulación del
metabolismo intermediario de las proteínas, grasa y carbohidratos,
como también en la transcripción genética y el crecimiento celular.
El fosfato es crítico para sistemas de enzimas importantes tales
como 2,3-difosfoglicerato (capacidad de transporte de oxígeno de
la hemoglobina), adenilato ciclasa y 1-α-25-hidroxivitamina Dhidrolasa.
Función extracelular: El fosfato extracelular mantiene la
concentración intracelular crítica y suministra sustrato para la
mineralización ósea. Una disminución aguda en la concentración
del fosfato sérico puede resultar en rápidas complicaciones tales
como rabdomiólisis y alteración en la función de los glóbulos
rojos.
Función esquelética: el fósforo inorgánico es un componente
mayoritario de la hidroxipatita, de este modo juega un importante
papel en el apoyo estructural del cuerpo. La demanda celular para
la función metabólica en las células óseas es similar a las de otras
células. El esqueleto también sirve como un almacén para el
fosfato. El fosfato en el suero existe tanto como iones de fosfato
monovalente y divalente. Aproximadamente el 10% del fosfato
sérico esta unido a proteína; el 35% está unido con el sodio, calcio
y el magnesio y el resto o el 55% está libre. Aunque tanto el
fosfato inorgánico como el orgánico están presentes en la sangre,
sólo se mide el fosfato inorgánico. Los esteres orgánicos están
principalmente localizados dentro de los elementos celulares de la
sangre. Los niveles de fosfato han sido determinado por un
número de procedimientos, incluyendo los métodos de molibdato
y enzimático. El vanadato molibdato forma un complejo amarillo
con el fosfato a pH ácido. El presente método está basado en el
complejo del molibdato sin reducir., el cual se mide a 340 nm.
4 x 50 mL
Los componentes del kit son estables hasta la fecha de
vencimiento si se almacenan en las condiciones indicadas,
protegidas de fuentes de luz directa y si no está
contaminada durante la manipulación. Guarde los
reactivos y la solución de trabajo sin mezclar, desde la
primera apertura, bien cerrados.
CONTROL DE CALIDAD- CALIBRACIÓN
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Los reactivos pueden contener algunos componentes no
reactivos y conservantes. Se sugiere manipularlos
cuidadosamente, evitando contacto con la piel e ingerir.
Realice la prueba de acuerdo con las directrices del Manual
de "Buenas Prácticas de Laboratorio" (BPL)
DESEMPEÑO DEL ANÁLISIS
TOMA DE MUESTRAS Y MANIPULACIÓN
Suero es la muestra preferida. Aunque se acepta el plasma
(con heparina solamente), los niveles de fosfato inorgánico
son aproximadamente de 0,2 a 0,3 mg/dL más bajo que en el
suero. Los anticoagulantes tales como citrato, oxalato y
EDTA interfieren en la formación del complejo
fosfomolibdato y no se debe usar.
El fosfato inorgánico en las muestras de sangre total puede
tanto como disminuir o aumentar con el tiempo,
dependiendo del tipo de muestra, temperatura y duración de
almacenaje. Los niveles en el plasma o suero están
disminuidos por el almacenaje prolongado con las células a
temperatura ambiente o 37 ° C; es importante separar
inmediatamente el suero o el plasma de los eritrocitos.
Muestras hemolizadas son inaceptables debido a que los
eritrocitos contienen concentraciones altas de esteres de
fosfato orgánico, los cuales pueden ser hidrolizados a fosfato
inorgánico durante el almacenaje. El fosfato inorgánico
disminuye por 4 a 5 mg/dL por día en muestras hemolizadas
almacenadas a 4°C. E fosfato glucosa, fosfato creatina y
otros fosfatos orgánicos pueden también ser hidrolizados por
las condiciones de ensayo, resultando en la sobreestimación
de los niveles de fosfato inorgánico.
El fosfato se considera estable en el suero, si ha sido
separado del coágulo, por cuatro días a 4°C y meses si se
congela. Las muestras de orina deben ser recolectadas en 6
mol/L HCl, 20-30 mL para muestras de orina de 24 horas,
para evitar la precipitación del complejo de fosfato.
Diluya las muestras de orina 1:20 con agua destilada antes
del análisis.
PROCEDIMIENTO DE PRUEBA
INICIO DE LA PRUEBA
Longitud de onda: 340 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25, 30 o 37°C
Dispense
Blanco
STD
Muestra
1000µL
1000µL
1000µL
R
10µL
Agua destilada
10µL
STD
10µL
Muestra
Mezclar e incube a 25, 30 0 37°C por 5 minutos. Lea la
absorbancia del estándar (Abs Std) y de la muestra (Abs
s) contra el blanco de reactivo.
Se sugiere realizar un control de calidad interno.
Comprobar el cumplimiento de los datos obtenidos con los
previstos para validar los resultados
LINEALIDAD
El método es lineal hasta 20 mg/dL. Si el valor límite se excede,
se sugiere diluir la muestra de 1+9 con solución salina y repetir la
prueba, multiplicando el resultado por 10.
SENSIBILIDAD
El límite de detección es de 0,4 mg/dL.
INTERFERENCIAS
No se observó interferencia por la presencia de:
Bilirrubina
≤ 25 mg/dL
Hemoglobina
≤ 100 mg/dL.
La hemolisis interfiere.
Se ha observado tanto interferencia positiva y negativa con
muestras lipémicas
PRECISIÓN
Intra-ensayo (n=10)
Muestra 1
Muestra 2
promedio(mg/dL)
3,5
5,87
SD (mg/dL)
0,05
0,11
CV%
1,50
1,90
Intra-ensayo (n=20)
Muestra 1
Muestra 2
promedio(mg/dL)
3,41
5,84
SD (mg/dL)
0,88
0,11
CV%
2,40
1,90
METODOS DE COMPARACION
Una comparación entre Hospitex y un producto comercialmente
disponible dio los siguientes resultados:
Fósforo Hospitex = x
Fósforo competencia = y
n = 102
Regresión lineal y =1,005 x + 0.109 mg/dL
Coeficiente de correlación r2 = 0.975
ELIMINACIÓN DE RESIDUOS
Este producto está hecho para ser utilizado en los laboratorios
profesionales. Por favor, consulte las normas locales para una
correcta eliminación de residuos.
S56: desechables de esta sustancia y su recipiente en un punto
peligroso o especial de recogida de residuos
S57: Utilícese un envase adecuado para evitar la contaminación
del medio ambiente
S61: Evítese su liberación en el medio ambiente, consulte las
instrucciones específicas de la ficha de datos de seguridad
REFERENCIAS
FABRICANTE
PRINCIPIO DEL METODO: Punto final - UV
Los iones del fosfato reaccionan con el amonio de molibdato para
formar un complejo de fosfomolibdato.
El complejo incoloro de fosfomolibdato se puede medir
directamente por absorción ultravioleta (UV) a 340m nm. Se
necesita un pH ácido para la formación del complejo.
COMPONENTES DEL KIT
Solamente para uso diagnóstico in vitro
Reactivo(líquido)R
(valor del estándar, el factor de dilución y la
4 x 50 mL
5 mg/dL
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD
Reactivo R y estándar STD líquido listo para usar.
Estabilidad del R
(valor del estándar y el factor de dilución)
Orina de 24 horas (fósforo g24h):
[Abs s / Abs Std x 5 x 20 x diuresis (dL)] / 1000
COMPOSICIÓN: amonio molibdato 0,4 mmol/L, ácido sulfúrico
0,21 mol/L, tensioactivo
Estándar (líquido) STD
1x 5 mL
COMPOSICIÓN: Fosforo inorgánico
RESULTADOS DEL CÁLCULO
Suero, Plasma (fosforo mg/dL)
Abs s/Abs Std x 5 (Valor del estándar)
Orina parcial (fosforo mg/dL)
Abs s/Abs Std x 5 x 20
diuresis en decilitros)
VALORES ESPERADOS
Plasma / Suero
Adultos: 2,5 -4,5 mg/dL (0,81 – 1,45 mmol/L)
Niños: 4,0 – 7,0 mg/dL (1,29 – 2,26 mmol/L)
Orina (dieta no restringida)
0,4 – 1,3 g/24h (12,9 – 42,2 mmol/24h)
Cada laboratorio debe establecer los rangos de referencia
para su propia población de pacientes.
Hospitex Diagnostics S.R.L.
LEYENDA DE LOS SÍMBOLOS
solo para diagnostico in vitro
lote de fabricación
código
almacenaje a intervalo de temperatura
fecha de vencimiento
precaución, lea las instrucciones adjuntas
lea las instrucciones
y STD:
Hasta la fecha de vencimiento indicado en la etiqueta 2-8°C
Estabilidad desde la apertura:
Úselo preferiblemente dentro de los 60 días a 2.8°C.
PHO_00
Hospitex Diagnostics S. r.l. – Via Arno 23/25, 50019 OSMANNORO, SESTO DFIORENTINO (FI) – www.hospitex.it – email:[email protected]
Rev00.21/11/2011