1 Medios de cultivo

Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Seminarios de Microbiología - Primer Bloque
Profesora responsable: Dra. Elena García-Valdés
Características de los medios de cultivo
Definición
Un medio de cultivo es un conjunto de componentes
que crean las condiciones necesarias para el
desarrollo de los microorganismos.
Prof. Antonio Doménech
Composición
•Macronutrientes.
•Micronutrientes o elementos traza.
•Factores de crecimiento.
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Macronutrientes
Micronutrientes
Forma normal del nutriente en el
ambiente
Forma suministrada
en el medio de cultivo
Carbono (C)
CO2, compuestos orgánicos
Glucosa, malato, acetato,
piruvato, aminoácidos, extractos
compuestos
Hidrógeno (H)
H2O, compuestos orgánicos
H2O, compuestos orgánicos
Elemento
Oxígeno (O)
Nitrógeno (N)
Fósforo (P)
Azufre (S)
Potasio (K)
Cromo (Cr)
Cobalto (Co)
Cobre (Cu)
H2O, O2, compuestos orgánicos
H2O, O2, compuestos orgánicos
Manganeso (Mn)
NH3,NO3-, N2, compuestos orgánicos
nitrogenados
Inorgánico: NH4Cl, (NH4)2SO4,
KNO3, N2
Molibdeno (Mo)
PO43-
KH2PO4, Na2HPO4
H2S, SO42-,compuestos orgánicos con S,
sulfuros metálicos (FeS, CuS, ZnS, NiS, etc.)
Na2SO4, Na2S2O3 Na2S, cisteína y
otros compuestos orgánicos
azufrados
K+ en solución o como varias sales de K
KCl, KH2PO4
Mg2+ en solución o como varias sales de Mg
MgCl2, MgSO4
Sodio (Na)
Na+ en solución, NaCl o como otras sales de Na
NaCl
Calcio (Ca)
Ca2+ en solución, CaSO4 o como otras sales de
Ca
CaCl2
Hierro (Fe)
Fe2+ o Fe3+ en solución, FeS, Fe(OH)3 o como
otras sales de Fe
FeCl3, FeSO4, varias soluciones
de hierro quelado (Fe3+ EDTA,
Fe3+ citrato, etc.)
Magnesio (Mg)
Elemento
Níquel (Ni)
Selenio (Se)
Tungsteno (W)
Vanadio (V)
Zinc (Zn)
Hierro (Fe)
Función celular
Requerido en los mamíferos para el metabolismo de la glucosa. Se
desconoce si los microorganismos lo requieren
Vitamina B12; transcarboxilasa (bacterias del ácido propiónico)
En la respiración, citocromo c oxidasa; en fotosíntesis, plastocianina y
en algunas superóxido dismutasas
Activador de muchas enzimas; presente en algunas superóxido
dismutasas y en la enzima que rompe el agua en fototrofos oxigénicos
Algunas enzimas que contienen flavinas; nitrogenasas, nitrato
reductasa, sulfito reductasa, DMSO-TMAO reductasas y algunas formato
deshidrogenasas
La mayoría de las hidrogenasas; coenzima F430 de metanógenos,
deshidrogenasa del monóxido de carbono y ureasa
Formato deshidrogenasa; algunas hidrogenasas y el aminoácido
seleniocisteína
Algunas formato deshidrogenasas y oxotransferasas de los
hipertermófilos
Vanadio nitrogenasa; bromo peroxidasa
Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa, ARN y ADN polimerasa, y
muchas proteínas que se unen al ADN
Citocromos, catalasas, peroxidasas, proteínas con hierro y azufre,
oxigenasas y todas las nitrogenasas
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Factores de crecimiento
Vitamina
Función
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Constituyentes habituales
•Agentes gelificantes: agar.
Ácido p-aminobenzoico
Precursor del ácido fólico
Ácido fólico
Tiamina (B1)
Metabolismo de compuestos de un carbono; transferencia de
grupos metilo
Biosíntesis de ácidos grasos; β-descarboxilaciones; algunas
reacciones de fijación de CO2
Reducción y transferencia de restos monocarbonados; síntesis de
desoxirribosa
Transferencia de grupos acilo en la descarboxilación del piruvato y
α-cetoglutarato
Precursor del NAD+; transferencia de electrones en reacciones de
oxido-reducción
Precursor de la coenzima A; activación del acetilo y derovados
acilados
Precursor del FMN, FAD en flavoproteínas implicadas en transporte
de electrones
α-descarboxilaciones; transcetolasa
Vitaminas B6
Transformaciones de aminoácidos y cetoácidos
Grupo Vitamina K
Transporte de electrones; síntesis de esfingolípidos
•Agentes selectivos: sales biliares,
Hidroxamatos
Compuestos que unen hierro; solubilización y transporte del hierro
al interior celular
antibióticos...
Biotina
Cobalamina (B12)
Ácido lipoico
Ácido nicotínico (niacina)
Ácido pantoténico
Riboflavina
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Tipos de medios de cultivo
•Sólidos y líquidos.
•Medio definido (sintético) y medio complejo.
•Medio mineral o basal: compuestos inorgánicos.
•Medio mínimo: medio basal + 1 fuente de carbono.
•Medio rico: todos los requerimientos nutritivos.
•Medio de enriquecimiento.
•Medio selectivo.
•Medio diferencial.
•Extractos: levadura, carne, hígado, semillas...
•Peptonas: soja, carne, gelatina, caseína...
•Sistemas amortiguadores: fosfatos...
•Indicadores de pH: rojo neutro, cristal violeta,
rojo de fenol...
•Agentes reductores: microaerofilia o
anaerofilia.
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Medio definido y medio complejo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Manuales de medios de cultivo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Actividad 1 Medios de cultivo
Metodología
Actividad individual.
Consulta del material disponible.
Anotar en la plantilla correspondiente las características de los
microorganismos seleccionados.
Plantilla 1
Microorganismo
Oxígeno
Gram
Morfología
celular
Oxidasa
Catalasa
Motilidad
+
Cocos
+
+
+
-
Bacilos
-
-
-
Escherichia coli
Salmonella spp.
Vibrio cholera
Clostridium
perfringens
Campylobacter
jejuni
Staphylococcus
aureus
Anaerobio
Aerobio
(facultativo)
Microaerófilo
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Actividad 1 Medios de cultivo
Actividad 1 Medios de cultivo
Plantilla 2
Medio de cultivo
Recursos
Citrato de
Simmons
McConkey
Hierro
de
Kliger
Baird
Parker
TriptosaSulfitoCicloserina
(TSC)
Manuales de medios de cultivo
1. http://www.panreac.es/pdf/ManualCultimed_completo.pdf
2. http://www.scharlab.com/docs/ebooks/descargarpdf.php?i
d=6
3. http://www.condalab.com/
Escherichia coli
Salmonella spp.
Klebsiella pneumoniae
Manual de análisis microbiológico
Clostridium
perfringens
1. http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-toc.html
Staphylococcus
aureus
Libros y artículos
• Madigan, M. T. y otros (2003): Brock: Biología de los
Microorganismos. 10ª edición. Prentice Hall Inc, Madrid.
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Seminarios de Microbiología – 1er Bloque – Medios de cultivo - Prof. Antonio Doménech
Actividad 1 Medios de cultivo
Actividad 1 Medios de cultivo
Imagen de microscopía electrónica y placa de cultivo
Organismo
Medio
Grupo
Escherichia coli
Mc Conkey
1
Salmonella spp.
Mc Conkey
2
Klebsiella pneumoniae
Citrato de
Simmons
3
Pseudomonas aeruginosa
Cetrimide
4
Plantilla 3 www.condalab.com
Medio
Acetate differential
Agar
BCP Glucose Agar
Fecal Coliforms
Broth Base
Koser Citrate Broth
Mannitol Nitrate
Motility Medium
Mio Medium
MR-VP Medium
Sim Medium
Clostridium perfringens
TSC
5
Tryptone Byle Salts
Agar
TTC Chapman Agar
Staphylococcus aureus
Baird Parker
6
Urea Indol Broth
VRBG
Water &
Beverages
Meat &
Fish
Industry
Dairy
products
Bakery
Processed
Foods
Beer
industry
Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Grupo 5
Grupo 6
Waste
Water
Cosmetic
Industry
Pharmaceutical
industry