8 ACTUALIZACIÓN EN EL DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERMEDADES AUTOINMUNES ANTICUERPOS ANTI-CÉLULAS PARIETALES AUTOANTICUERPO MÉTODOS DE DETECCIÓN Los anticuerpos anti-células parietales (APCA) son marcadores serológicos utilizados en el diagnóstico de la anemia perniciosa y la gastritis crónica tipo A. Estos anticuerpos pertenecen a la clase IgG, aunque también pueden detectarse isotipos IgA e IgM en pacientes con gastritis crónica atrófica (1). La inmunofluorescencia indirecta sobre mucosa gástrica humana fue el primer método utilizado en la identificación de los anticuerpos anti-células parietales, a principios de la década de los 60 (5). Sin embrago, en la actualidad, estos anticuerpos son detectados de manera rutinaria en el laboratorio clínico mediante inmunofluorescencia sobre secciones criostáticas de estómago de roedor. ENTIDAD ANTIGÉNICA Las dianas principales contra quienes se dirigen los anticuerpos anti-células parietales son las subunidades alfa- y beta- de la bomba de protones gástrica H+, K+- adenosina trifosfatasa (ATPasa H+/K+) en la gastritis humana autoinmune. Estudios pioneros mostraban como los anticuerpos anti-células parietales reaccionaban predominantemente contra un autoantígeno gástrico de 60-90 kDa, identificado como la subunidad beta de la ATPasa H+/K+ gástrica (EC 3.6.1.3) (bomba de protones), mientras que otros estudios demostraron que esos anticuerpos principalmente reconocían la subunidad alfa de la bomba, de 95 kDa. Hoy en día, está establecida la reactividad de los anticuerpos anti-células parietales con las dos subunidades de la ATPasa H+/K+ gástrica (2). Las células parietales gástricas de rata constituyen uno de los sustratos que muestran lo que se conoce como patrones inmunofluorescentes heterófilos clásicos (6). La utilización de secciones de estómago de ratón en lugar de secciones de estómago de rata para prevenir la aparición de falsos positivos debidos a la presencia de anticuerpos heterófilos, puede no ser una buena aproximación al problema, puesto que es posible la aparición en su lugar de un falso marcaje anti-músculo liso. La utilización de múltiples tejidos como sustrato de la prueba puede aportarnos, en cambio, una solución satisfactoria. ASOCIACIONES CLÍNICAS Los anticuerpos anti-células parietales se detectan en hasta un 90% de pacientes con anemia perniciosa, una enfermedad crónica en la fase final de la gastritis atrófica crónica de tipo A. La gastritis atrófica de tipo A (autoinmune) está asociada con la anemia perniciosa, mientras que la gastritis atrófica tipo B se asocia con Helicobacter pylori. Sin embargo, en pacientes con Helicobacter pylori, los niveles de APCA en los que presentan atrofia severa son superiores a los que presentan atrofia media (3). La anemia perniciosa normalmente se asocia con otras enfermedades autoinmunes específicas de tejido, como la tiroiditis de Hashimoto, la enfermedad de Addison primaria, la Diabetes Mellitus tipo I y la cirrosis biliar primaria. El papel que estos anticuerpos desempeñan en pacientes con cirrosis biliar primaria parece ser más de carácter diagnóstico que patogénico (4). Figura 1. Marcaje intracelular reticular de células parietales de mucosa gástrica de ratón. Sólo el citoplasma está marcado y no así el núcleo. El ELISA es un método adecuado para la detección de APCA en pacientes con anemia perniciosa o con gastritis tipo A, con resultados comparables a los que se obtienen mediante inmunofluorescencia indirecta sobre secciones de estómago de roedor (7). El inmunobloting también es utilizado en la detección de anticuerpos anti-células parietales. BIBLIOGRAFÍA 1- Cruchaud A and Juditz E. An analysis of gastric parietal cell antibodies and thyroid cell antibodies in patients with pernicious anaemia and thyroid disorders. Clin Exp Immunol 1968;3(8):771–781. 2- Callaghan JM, Khan MA, Alderuccio F, van Driel IR, Gleeson PA, Toh BH. Alpha and beta subunits of the gastric H+/K(+)-ATPase are concordantly targeted by parietal cell autoantibodies associated with autoimmune gastritis. Autoimmunity 1993;16(4):289-95. 3- Ito M, Haruma K., Kaya S, Kamada T, Kim S, Sasaki A, Sumii M, Tanaka S, Yoshihara M, Chayama K. Role of Anti-Parietal Cell Antibody in Helicobacter pylori-associated Atrophic Gastritis: Evaluation in a Country of High Prevalence of Atrophic Gastritis. Scandinavian Journal of Gastroenterology 2002; 37(3): 287-293. 4- Wirth HP, Meyenberger C, Ammann R, Blum HE. Parietal cell antibodies in primary biliary cirrhosis: pathogenetic or diagnostic significance? Schweiz Med Wochenschr. 1994;124(19):816-20. 5- Irvine WJ. Gastric antibodies studied by fluorescence microscopy. Quart J Exp Physiol 1963;48:427-438. 6- Hawkins BR, McDonald BL, Dawkins RL. Characterisation of immunofluorescent heterophile antibodies which may be confused with autoantibodies. J Clin Pathol. 1977l; 30(4): 299–307. 7- Sugiu K, Kamada T, Ito M, Kaya S, Tanaka A, Kusunoki H, Hata J, Haruma K. Evaluation of an ELISA for detection of anti-parietal cell antibody. Hepatogastroenterology. 2006;53(67):11-4. BioED BioSystems Educational Department Knowledge is our reason to be Costa Brava 30, 08030 Barcelona (España) Tel. +34-93 311 00 00 Fax +34-93 346 77 99 [email protected] www.biosystems.es