[Ide@s CONCYTEG] Redes de control transcripción en plantas Año 2, Núm. 29, 4 de diciembre de 2007 génicas y protéicas que están a la base de sus mecanismos de acción requiere el establecimiento de estrategias amplias de Biología de sistemas. Una de las familias mas importantes de factores de transcripción en plantas es la de las proteínas tipo MADS-box. Los miembros de esta familia no se encuentran únicamente en el Stefan de Folter1 Nayelli Marsch reino Martinez2 vegetal, sino en todos los eucariotes. Incluso nosotros, los humanos, requerimos estos importantes factores de transcripción para el desarrollo correcto La regulación génica a de nuestro corazón y músculos. En nivel plantas, estas proteínas son esenciales transcripcional es crucial en todos los para diversos procesos del desarrollo, procesos biológicos. Los factores de como el desarrollo de flores, frutos, transcripción son proteínas de unión a raíces, hojas, óvulos y semilla, e incluso ADN capaces de activar o reprimir la para la transición a la floración (Ng and transcripción génica. En la mayoría de los Yanofsky, 2001). Por ejemplo, dos organismos modelo se han identificado vegetales comunes que forman parte de la las familias de proteínas que actúan como dieta humana, el brócoli y la coliflor, son factores de transcripción; sin embargo, el entendimiento de las mutantes interacciones naturales que tienen una proteína MADS-box no funcional. Así que, en pocas palabras, sin ciertos 1 Investigador, Doctor en Ciencias. [email protected], 2 Doctora en Ciencias, Laboratorio [email protected]. Nacional de Genómica para la Biodiversidad (Langebio), Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del Instituto Politécnico Nacional (CINVESTAV-IPN), Campus Guanajuato, Irapuato, GTO. miembros de esta familia de factores de transcripción una planta no crecería adecuadamente o se reproduciría. Lo que nos intriga es el saber cómo trabajan este tipo de factores para llevar a cabo su importante función en el 853 [Ide@s CONCYTEG] desarrollo. Para principalmente Arabidopsis esto, la empleada por un Biólogos en el utilizamos planta modelo (Figura thaliana Año 2, Núm. 29, 4 de diciembre de 2007 1), gran número mundo de (como comparación, A. thaliana equivale al “ratón” como modelo de estudio para mamíferos). Se eligió como modelo debido a sus características como tamaño reducido, ciclo de vida corto, facilidad de transformación pequeño. genética, Asimismo, y por genoma sus características, fue el objeto de un Figura 1. La planta modelo Arabidopsis thaliana proyecto de secuenciación a gran escala, y en el año 2000 fue la primera planta e Como parte de un amplio proyecto incluso el primer organismo en ser fundado por la Unión Europea (EU- completamente secuenciado (Arabidopsis REGIA), que tuvo como objetivo la Genome Initiative, 2000). Actualmente, caracterización de todos los factores de se tiene acceso en todo el mundo al transcripción de Arabidopsis, y fue genoma completo, que contiene cerca de efectuado con el Prof. Gerco Angenent, 30,000 genes codificantes, un número realizamos comparable al de los humanos. análisis moleculares y filogenéticos de la familia completa de factores MADS-box en Arabidopsis (Pařenicová, de Folter, Kieffer et al, 2003). De esta manera, encontramos que Arabidopsis tiene más de 100 miembros. Además de tratar de dilucidar las funciones de estos genes (por ejemplo, el gen ABS involucrado en el desarrollo de semillas, 854 de Folter et al, 2006), Año 2, Núm. 29, 4 de diciembre de 2007 [Ide@s CONCYTEG] realizamos estudios sistemáticos, como florales por ejemplo el perfil de sus transcritos sorprendente, durante ciertos procesos del desarrollo procesos mediante el uso de arreglos (de Folter et reproducción al, 2004), y determinando todas las separados y regulados en general por interacciones de proteína-proteína de grupos estos factores de transcripción usando un observación nos llevó a proponer un sistema basado en levadura (de Folter et modelo de retroalimentación negativa al, 2005; de Folter 2006). El último entre las dos clases de proteín0as (de estudio dio como resultado un mapa Folter et al, 2005). Los heterodímeros que detallado del interactoma de todos o casi se forman sugieren la existencia de todos los miembros de la familia de genes mecanismos MADS-box. Este mapa del interactoma impiden que proteínas de inducción a la nos permite proteínas fueron detectadas. porque aunque pertenecen al vegetal, distintos de (auto) Esto ambos estadio son es de procesos proteínas. regulatorios Esta que predecir funciones de floración actúen en la flor (Figura 2). MADS-box aún no Actualmente, este modelo se está caracterizadas, empleando una estrategia probando en Arabidopsis mediante el de agrupamiento (clustering) de todas las empleo de estrategias genéticas y ensayos interacciones moleculares como la inmunoprecipitación detectadas. Sorprendentemente, muchas interacciones de entre immunoprecipitation proteínas involucradas en la cromatina (Chromatin – ChIP). Esta indución de la floración y de proteínas técnica permite estudiar si una proteína se involucradas en el desarrollo de órganos une físicamente al ADN in planta. 855 [Ide@s CONCYTEG] Año 2, Núm. 29, 4 de diciembre de 2007 Figura 2A Figura 2B Figura 2. (A) El mapa del interactoma de la familia de genes MADS-box. Cada línea representa una interacción entre dos proteínas (círculos). (B). Modelo de retroalimentación negativa. Los heterodírmeros formados sugieren mecanismos de (auto) regulación que evitan la actividad de proteínas que inducen la floración en la flor. Como se describe en el párrafo blanco de proteínas MADS-box, y de inicial, los factores de transcripción deben factores de transcripción en general, es unirse al ADN para activar o reprimir la aún limitado (de Folter and Angenent, expresión de genes (llamados “genes 2006). Una estrategia que hemos iniciado blanco”). El conocimiento de genes (con el Prof. Gerco Angenent, en 856 Año 2, Núm. 29, 4 de diciembre de 2007 [Ide@s CONCYTEG] Wageningen, Países Bajos) para dilucidar los mecanismos por medio de los cuales las proteínas MADS-box llevan a cabo su importante función, es el uso de la técnica de ChIP (Gómez-Mena et al, 2005; de Folter et al, 2007), seguida de la hibridación contra un microarreglo que contiene secuencias de llamada ChIP-on-chip. Figura 3. Una mutante agamous en Arabidopsis, que carece de todos los órganos reproductivos. promotores, Dada su importancia, se decidió emplear uno de Además de que muchos factores los miembros de la familia MADS-box MADS-box están involucrados en la más estudiados, AGAMOUS, como un determinación de la identidad de órganos, primer candidato en nuestro estudio. como AGAMOUS, el primer gen MADS-box descrito como reguladores del tiempo de clonado en plantas, está involucrado en la transición a la floración. En estrecha formación de estambres y carpelos. colaboración con el grupo de la Dra. Cuando este gen sufre mutaciones, se Elena Álvarez-Buylla del Instituto de produce un fenotipo de “flor-en-flor” Ecología (Yanofsky et al, 1990), que carece de estudiando un gen MADS-box que no todos los órganos reproductivos (Figura había sido caracterizado funcionalmente 3). poder previamente. Este gen se expresa en desentrañar la red subyacente de genes raíces y podría tener un papel en una vía que son regulados por AGAMOUS y que de señalización raíz-ápice que modula el da lugar a órganos florales específicos. tiempo de floración. Para estudiarlo, se Actualmente, estamos analizando genes llevan a cabo experimentos de injertos, que son candidatos a ser blancos, por ejemplo, para indagar si este gen obtenidos de experimentos realizados con efectivamente está involucrado en la la técnica ChIP-on-chip. señalización. Sería muy interesante AGAMOUS, algunos de la UNAM, se han estamos Otras áreas de investigación en el laboratorio son el estudio de factores de transcripción 857 que funcionan en el [Ide@s CONCYTEG] desarrollo de frutos (de Folter et al, 2004), análisis de mutantes de activación 2. afectadas en su desarrollo (MarschMartinez et al 2002, Marsch-Martinez et al, 2006), estrategias de bioinformática como el análisis de redes de interacciones proteína-proteína, e identificación de Folter, S. and Angenent, G.C. (2006) Trans meets cis in MADS science. Trends in Plant Science 11, 224-231 4. de Folter, S., Busscher, J., Colombo, L., Losa, A., and Angenent, G.C. (2004) Transcript profiling of transcription factor genes during silique development in Arabidopsis. Plant Molecular Biology, 56, 351-366 5. de Folter, S., Immink, R.G.H., Kieffer, M., Pařenicová, L. Henz, S.R., Weigel, D., Busscher, M., Kooiker, M., Colombo, L., Kater, M.M., Davies, B., and Angenent, G.C. 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En resumen, estudiamos factores de transcripción relacionados con el desarrollo de plantas empleando una variedad de herramientas genómicas disponibles. El conocimiento de los procesos biológicos es muy importante, tanto científica como económicamente, para entender el desarrollo de las plantas y de los organismos en general. Como un ejemplo y comentario final, debe recordarse que las plantas son cruciales para la vida en el planeta y brindan con sus flores, frutos y otros órganos más del 80% del alimento de los humanos. Bibliografía 1. Arabidopsis Genome Initiative. 2000. Analysis of the genome sequence of the 858 flowering plant Arabidopsis thaliana. Nature 408: 796–815 de Folter, S. (2006) Characterization of the MADS domain transcription factor family in Arabidopsis thaliana. PhD thesis, Radboud University Nijmegen, The Netherlands, ISBN: 90-9020611-6, http://webdoc.ubn.ru.nl/mono/f/folter_s_ de/charofthm.pdf 3. in transcripción a ADN. 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