Laboratorio de crecimiento bacteriano PSI Biología Nombr

Laboratorio de crecimiento bacteriano
PSI Biología
Nombre___________________________
Propósito
¿Cómo se puede inhibir el crecimiento de las bacterias?
Materiales (por grupo)
2 placas de agar estériles
Lápiz marcador de vidrio
Gradilla
Mechero Bunsen
Encendedor o fósforos
2 hisopos de algodón estériles
Vaso de agua
8 discos de papel de filtro estériles
Cultivos de E. coli u otra muestra de bacterias
3 desinfectantes: lavandina, peróxido de hidrógeno, limpiador de ventanas
3 antibióticos: ampicilina, penicilina, amoxicilina
Agua destilada
Pinzas estériles
Cinta transparente
Seguridad: La clase debe discutir las precauciones de seguridad antes de
comenzar la práctica de laboratorio. Deben usar gafas de seguridad y
delantales, y el pelo largo debe ir recogido.
Nota: La clase también debe discutir la importancia de mantener los materiales
estériles.
Procedimiento
Día 1
1. Gira cada una de tus placas de agar manteniéndolos cerrados y utiliza una
placa de identificación de cristal para dividir el plato en cuatro cuadrantes como
una torta. Cerca del borde de cada cuadrante, enumera los cuadrantes del 1 al
4. Cerca del centro de la parte inferior de cada plato escribe tu período y número
de grupo. Gira las placas de agar boca arriba.
2. Enciende el mechero Bunsen.
3. Retira la tapa de la muestra del tubo de ensayo de cultivo con E. coli y pasa la
boca del tubo de un lado a otro a través de la llama del mechero
www.njctl.org
PSI Biología
Procariotas y virus
4. Inserta un hisopo de algodón estéril en el cultivo de bacterias, sacude el
exceso de líquido en el tubo de cultivo. Retira la esponja de algodón
5. Pasa la boca del tubo de cultivo de un lado a otro a través de la llama y coloca
la tapa. Devuelve el tubo del cultivo a la gradilla.
6. Abre ligeramente la placa de agar nutritivo estéril y coloca la punta de la
esponja de algodón cerca de la parte superior central de la placa de agar y
extiende el agar como has visto en el cuaderno de laboratorio de crecimiento de
bacterias.
7. Coloca la parte superior de la esponja de algodón en la llama del mechero
Bunsen hasta que se prenda fuego. Retira del fuego y coloca en el vaso de agua
para extinguir el hisopo de algodón.
8. Repite los pasos 3 al 7 para la otra placa de agar nutritivo estéril.
9. Utiliza pinzas estériles para recoger un disco de papel de filtro y colócalo en
lavandina. Sacude cualquier exceso de líquido.
10. Abre una de las placas de agar inoculado sólo ligeramente y coloca el disco
en el centro del cuadrante 1, presionándolo contra el agar hasta que se pegue.
Retira la pinza y cierra la placa de agar.
11. Pasa la pinza hacia atrás y adelante a través de la llama varias veces.
12. Repite los pasos 9 al11 para la misma placa de agar, coloca el disco con
peróxido de hidrógeno en el cuadrante 2, el disco con limpiador de ventanas en
el cuadrante 3, y el disco con agua destilada en el cuadrante 4.
13. Repite los pasos 9 al 11 para tu otra placa de agar utilizando los siguientes
discos: ampicilina en el cuadrante 1, penicilina en el cuadrante 2, amoxicilina en
el cuadrante 3, y agua destilada en el cuadrante 4.
14. Cierra cada caja de Petri con cinta adhesiva transparente. Coloca las cajas
inoculadas boca abajo durante 48 horas a 37 º C. No abras las cápsulas de Petri
de nuevo.
15. Registra tus predicciones en la tabla de datos
Día 2: ¡No abras las cápsulas de Petri!
16. Observa las placas de Petri y anota en tu hoja de datos la presencia o
ausencia de una zona de inhibición alrededor de cada disco.
www.njctl.org
PSI Biología
Procariotas y virus
Datos
Desinfectante
1. Lavandina
Predicción
Zona de Inhibición
Predicción
Zona de Inhibición
2. Peróxido de hidrógeno
3. Limpiador de ventanas
4. Agua destilada
Antibiótico
1. Ampicilina
2. Penicilina
3. Amoxicilina
4. Agua destilada
Análisis y Conclusiones
1. ¿Qué desinfectante inhibió más eficazmente el crecimiento de la E. coli?
Justifica tu respuesta.
2. Qué antibiótico inhibe más eficazmente el crecimiento de la E. coli? Justifica tu
respuesta
www.njctl.org
PSI Biología
Procariotas y virus
3. ¿Cómo sabes que cualquier inhibición que observaste se debe a los
desinfectantes y a los antibióticos en el disco?
4. Si el mismo experimento se repitió utilizando una cepa diferente de la bacteria y
se observó una zona de inhibición alrededor del disco empapado en limpiador de
ventanas, ¿que podrías explicar sobre los resultados diferentes?
5. Te despiertas una mañana con dolor de garganta severo y observas los puntos
blancos que cubren las amígdalas. Visitas rápidamente al médico, quien te
diagnostica una infección de Streptococcus (amigdalitis estreptocócica) y
prescribe un tratamiento antibiótico de 10 días. Después de 3 días, cuando
empieces a sentirte mejor. ¿Por qué deberías seguir tomando el antibiótico
durante los 10 días completos?
6. ¿Qué causa una zona de inhibición?
7. ¿Que causa una placa?
8. Tanto las bacterias como los virus pueden causar enfermedades. ¿Por qué sería
imprudente tratar una infección viral con antibióticos?
www.njctl.org
PSI Biología
Procariotas y virus