LOS LÍQUENES COMO FUENTE DE SUSTANCIAS BACTERICIDAS Luís A. Rosales Morales, Néstor Naranjo J, Norma Almaraz A, Margarita Ortega Ch. Centro Interdisciplinario de Investigación para el Desarrollo Integral Regional, UPN, Unidad Durango, [email protected]. Estudiante de Maestría del CIIDIR-IPN-Dgo. Sigma S/N Fracc. 20 de Noviembre Durango Dgo, CP. 34220. México. Palabras clave: liquen, bactericida, acido usnico Introducción. El descubrimiento y desarrollo de antibióticos ha disminuido la morbilidad y mortalidad por las infecciones bacterianas. Al mismo tiempo ha aparecido un aumento en la resistencia bacteriana. Hay por consiguiente una necesidad de nuevos químicos. Una manera de encontrar nuevos compuestos el uso de experiencias de medicina tradicional, los líquenes fueron conocidos por distintas culturas del México antiguo, quienes los usaban como fuentes medicinales. De los metabolitos liquénicos, ha sido estudiado principalmente el Ácido Usnico (AU) (C18H16O7). Lawrey (1) encontró varios metabolitos activos contra cepas del bacilo de la tuberculosis y organismos Gram positivos, de los cuales el AU mostró mayor efectividad. El AU pertenece a la clase de productos denominados "agentes desacopladores”. Estos actúan sobre la respiración mitocondrial disminuyendo su eficacia energética (2). Por lo anterior, se propone evaluar la actividad bactericida del AU, proveniente del liquen Usnea dasypoga, sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923, así como establecer la concentración mínima inhibitoria (MIC) a través del método de difusión. Metodología. El presenta trabajo se llevo acabo en el laboratorio de Biotecnología del CIIDIR-IPN Unidad Dgo. Se prepararon discos de papel filtro de 5 mm de diámetro, a las dosis de 1, 2, 4, 8, 16 y 36g con AU y un lote similar con eritromicina (Er) como testigo. Se preparo un inoculo de S. aureus ATCC 25923 en caldo de Mueller-Hinton (MH) de 24h de incubación. Bajo condiciones de esterilidad se inocularon cajas Petri previamente preparadas con agar de MH, con la adición de una alícuota de 0.1mL de inóculo de S. aureus, y se distribuyó sobre la superficie del agar. A las cajas previamente inoculadas se les adicionaron los discos preparados con los tratamientos, sobre la superficie del agar inoculado, en sentido de las manecillas del reloj, colocando en primer lugar la menor concentración y culminando con la mayor, se incubaron durante 24 h. a una temperatura de 37°C,. Se procedió a medir los halos de inhibición y obtener las áreas de acción de los tratamientos. El diseño experimental fue completamente al azar con un arreglo factorial 2*2*6 con 24 tratamientos, el factor a corresponde a dos antibióticos, AU y Er, factor b corresponde a las concentraciones a probar. Resultados y discusión. Las pruebas para evaluar la bioactividad del AU, a diferentes concentraciones en medio agar de MH mostraron una bioactividad superior que Er, Al someter los tratamientos a un análisis de varianza ANOVA, teniendo como variable independiente la superficie de halo de inhibición, hubo diferencias estadísticas altamente significativas para el factor antibiótico a, concentración b, así como la interacción entre estos. La prueba de Duncan, con un intervalo de confianza del 99%: Las diferencias fueron significativas entre los tratamientos en relación al factor a, quedando ubicados todos los tratamientos con AU como los mejores. Para el factor b, los tratamientos con 4µg a 32µg son significativos, estableciendo que en los tratamientos de 8μg se encuentra la mínima concentración inhibitoria (MIC), S. aureus, es sin duda el patógeno más importante entre los estafilococos. Ortega (3) utilizó ácido usnico del complejo de especies Usnea spp., encontró actividad en 22g/mL hasta 34g/mL, contra S. aureus, Laurterwein (4) utilizo ácido usnico de C. stellaris, en cantidades de 16g/ mL obteniendo un 90% de efectividad contra cepas de C. perfringens, E. faecalis y S. aureus; en nuestros resultados se observó que dosis que van desde 4g/mL hasta 32g/mL tienen efectividad para inhibir a S. aures, Conclusiones. Los bosques se ven principalmente como proveedores de recursos maderables, pero no solo en eso radica su importancia, ya que en estos se encuentra una gran diversidad de especies aprovechabels por sus beneficios terapéuticos. La presente investigación demuestra, el potencial de los líquenes y sus metabolitos para ser utilizados como agentes bactericidas de microorganismos patógenos Gram positivos. Bibliografía. 1. Lawrey J.D. 1989. Lichen secondary compounds: Evidence for a correspondence between antiherbivore and antimicrobial function Bryologist 92: pp. 326. 2. www.vademecum.com 3. Ortega Ch, M. 2004. Bioactividad del ácido usnico del complejo de especies de Usnea sp. Biotecipn Vol. 1 IPN. Pp. 16. 4. Lauterwein M, Oethiger M, Klaus B, Peters 1995. In vitro activities of the lichen secondary metabolites Antimicobial Agents and Chemotherapy 39: pp. 2541