Tema 8 Papeles fisiológicos de la cromatina (2) Transcripción y Maduración del ARN M.A. Novales Biología y Embriología general 2006/07 La estructura del ADN confiere a la cromatina sus funciones ADN Contiene la información replicación transcripción Transmisión de la información ARN Expresión de la información traducción Proteínas 1º) Paso de la expresión de la información en Eucariotas •Transcripción • Maduración Transcripción • Copia la información contenida en una de las hebras de la molécula de ADN (proceso asimétrico) • Velocidad: 20 veces superior a la replicación • Proceso continuo durante toda la vida de la célula • Muy selectiva, menos del 10% del ADN será transcrito a ARN y todo no será funcional • Enzimas: ARN-polimerasas. Polimerizan ribonucleótidos en el orden establecido en la molécula de ADN, en dirección 5’ a 3’. Inician la cadena solas. No son autocorrectoras. La transcripción produce una cadena de ARN complementaria a una de las hebras del ADN ¿Por donde empezar? • Por las secuencias promotoras existentes en el ADN • Los promotores indican el lugar de unión de la polimerasa y contienen la señal de inicio de la trascripción • Se localizan en dirección 5’ anterior a la secuencia codificante y contienen las cajas TATA Promotor Solo una cadena va a ser transcrita La dirección en la que se desplace la polimerasa determina cual de las dos cadenas de ADN será utilizada como patrón. Esta dirección depende de la orientación de la secuencia promotora. Direcciones de transcripción de un fragmento de cromosoma bacteriano Mecanismo • Tres etapas: Inicio, elongación y terminación • Las ARN-polimerasas se asocian temporalmente a distintas subunidades proteicas que van entrando y saliendo del complejo en distintos momentos de la transcripción: TF • En Procariotas el proceso es más sencillo que en eucariotas Procariotas Unidad de transcripción En Eucariotas el proceso es más complejo • Hay 3 polimerasas diferentes que reconocen distintos promotores y necesitan diferentes factores de transcripción: *ARN-polimerasa I ::: Sintetiza los ARNr ::: TF I *ARN-polimerasa II ::: Sintetiza los ARNm ::: TF II *ARN-polimerasa III ::: Sintetiza los ARNt y los ARN pequeños ::: TF III • Las ARN-polimerasas II no pueden iniciar la transcripción solas necesitan la colaboración de una serie de proteínas denominadas Factores generales de transcripción •Las ARN-polimerasas II no pueden iniciar la transcripción solas, necesitan la colaboración de una serie de proteínas denominadas Factores generales de transcripción TBP (TFII D) Los transcritos de la ARN-polimerasa II sufren modificaciones que las distinguen del resto de los transcritos: • Caperuza en el extremo 5’ (guanina metilada) • Cola de poli A en el extremo 3’OH (media de 100) Terminación: Transcrito primario Transcrito primario Transporte del ARNm En Eucariotas la unidad de transcripción puede ser transcrita simultáneamente por varias polimerasas a la vez La transcripción se realiza a partir de ADN unido a nucleosomas, aunque los nucleosomas sufren algunos cambios durante el proceso Maduración del ARN Consiste en una serie de cortes y empalmes muy precisos en la molécula del transcrito primario que eliminan las secuencias no codificantes y lo transforman en un ARN maduro. En Eucariotas la mayoría de los genes tienen secuencias codificantes: Exones interrumpidas por secuencias no codificantes: Intrones Unidad de transcripción En Eucariotas la mayoría de los genes tienen secuencias codificantes (Exones) interrumpidas por secuencias no codificantes (Intrones) Los enzimas responsables de estos cortes y empalmes están constituidos por snRNP (pequeñas partículas ribonucleoproteicas nucleares) que forman un gran complejo: Spliceosoma (de tamaño similar al del ribosoma) Todos los intrónes presentan en sus extremos unas secuencias cortas muy semejantes, que actúan como señales para su eliminación • El ARNm es siempre mucho mas corto que el transcrito primario • El ARNr y el ARNt tienen intrones muy cortos Maduración del ARNt Biogénesis de la cromatina • ADN: dentro del núcleo mediante la replicación • Proteínas: en los ribosomas del citoplasma • ARN: dentro del núcleo mediante la transcripción y maduración