Inhibición de la Adherencia y del Crecimiento de bacterias, inducido por Compuestos Presentes en Extractos de Plantas de uso Tradicional en la Medicina. Carlos A. Eslava Campos Laboratorio de Investigación Básica Departamento de Salud Pública Eje temático: Investigación multi e interdisciplinaria. Área: Ciencias Biológicas y de la Salud Para optimizar recursos y responder preguntas de una manera más rápida y eficiente, se requiere trabajar en grupo. La conformación de grupos multidiciplinarios es una opción que nos permite abordar un problema desde diferentes ángulos, con la enorme posibilidad de obtener resultados integrales más confiables. Las enfermedades infecciosas constituyen una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en nuestro país (Velázquez, R. 2001). La desnutrición es una de las principales complicaciones de dichos padecimientos ya que repercute directamente en el crecimiento físico y cognitivo de los niños. Lo anterior se convierte en un círculo vicioso grave, ya que la población más susceptible es la de menor nivel económico en la que el manejo y tratamiento de los niños afectados casi nunca es el adecuado y mucho menos oportuno. En México existe en la práctica, un sistema plural o mixto de atención a la salud en el que coexisten la medicina profesional, la tradicional y la doméstica o casera. La medicina tradicional es una alternativa complementaria a la profesional, sin embargo, para amplios sectores de la sociedad mexicana, y en particular los indígenas, la medicina tradicional constituye el principal o único recurso para la atención a la salud. En México existe gran tradición en el uso de plantas como remedios medicinales. Se estima que de las 25,000 especies de plantas vasculares, 5,000 son o han sido usadas como remedios medicinales (Bye, R. 1995). Su empleo en la mayoría de los casos es empírico, por lo que en ocasiones no aportan resultados satisfactorios. No obstante, en los últimos años se han venido incrementando los estudios científicos de las plantas, con el propósito de conocer sus principios activos y el mecanismo de acción de los mismos (Argueta, V. 1994). En el Instituto de Química de la UNAM se tiene gran experiencia en la fotoquímica, desde hace varios años se ha venido trabajado al respecto con plantas de uso medicinal como son las de los géneros Geranium y Physallis . El género Geranium pertenece a la familia Geraniaceae, del cual se conocen 300 especies y de éstas 43 existen en México y Centro América. Este género ha empezado a estudiarse recientemente y ha demostrado tener compuestos de interés farmacológico (Calzada, F., 1999; Quijano, L. 2003 ). Geranium robertianum, es una planta europea que tiene una larga historia de uso en la medicina popular, con propiedades tan diversas como: astringentes, hemostáticas, diuréticas y cicatrizantes, contra las diarreas ligeras, dolor de muelas, hemorragias nasales, inflamación de las articulaciones, heridas y ulceraciones dérmicas y bucales, conjuntivitis, estomatitis, aftas bucales, faringitis, amigdalitis, dermatitis, eritemas, prurito y vulvovaginitis (Serkedjieva, J. 1998; Serkedjieva, J. 1999; Ivancheva, S. 2000; Okabe, S. 2001). El aceite esencial de G. robertianum tiene propiedades analgésicas y antisépticas, y lo constituyen más de 100 componentes, de los cuales al menos 72 están identificados. Entre ellos se encuentran principalmente monoterpenos y flavonoides (Quijano, L. 2003). Geranium pratense subsp. finitimum W., es un geranio muy utilizado en la medicina tradicional Turca donde recibe el nombre de ``Turnagagasi''. Las partes aéreas de la planta son utilizadas contra la diarrea, diurético, homoestático, tónico y droga antidiabética. Adicionalmente se estudió la habilidad de algunos flavonoides purificados para atrapar radicales libres (Akdemir, S. 2001). Esta especie también se ha estudiado en Mongolia, donde se observó la influencia de extractos metanólicos sobre la -amilasa en ratones inhibiendo la enzima en un 43.9% (Kobayashi, K. et al., 2003). El género physiallis pertenecen a la familia Solanaceae, en esta se incluye una amplia variedad de plantas con potenciales económico y farmacológico importantes. Posee cerca de 90 géneros y más de 2 600 especies, son de distribución cosmopolita pero centrada en la zona tropical. Muchas de las especies son de interés económico, ya sea como cultivos industriales (tabaco, Nicotiana tabacum), cultivos medicinales (belladona, Atropa belladonna), cultivos ornamentales (petunia, Petunia hybrida) y especialmente, como cultivos hortícolas, entre los que hay varios como papa, tomate, pimiento, ají y berenjena de importancia mundial. Los whitaesteroides son los compuestos que se presentan predominantemente en especies de la familia Solanaceae. Los géneros en los que se han identificado whitanólidos son: Acnistus, Datura, Deprea, Discopodium, Dunalia, Exodeconus, Hyoscyamus, Iochroma, Jaborosa, Lycium, Nicandra, Physalis, Salpichroa, Tubocapsicum, Vassobia, Withania, Whiteringia. Diversas estructuras de estos derivados ergostánicos se encuentran en los géneros Whitania Y Phisalis que producen en mayor cantidad Whitanólidos y Physalinas respectivamente. Más de 300 whitanólidos han sido aislados de unos cuantos géneros de la subfamilia Solanoideae. Un gran número de las especies productoras de whitaesteroides están incorporadas en los sistemas de medicina tradicional en muchas regiones del mundo. Las actividades biológicas identificadas en los whitaesteroides incluyen: antimicrobiana, antiinflamatoria, inmunomoduladora, antitumoral y como tripanocida, entre otras. En el laboratorio de investigación básica del Departamento de Salud Pública de la Facultad de Medicina, estamos interesados en desarrollar sistemas para el diagnóstico rápido de enfermedades infecciosas, así como para el control y tratamiento de las mismas. Por tal motivo los proyectos sobre fitoquímica del Instituto de Química, son coincidentes con los que venimos desarrollando en la Facultad de Medicina, ya que existe la posibilidad de que los productos que se obtienen de las plantas puedan ser utilizados para el tratamiento y/o prevención de algunos padecimientos. Con el propósito de complementar nuestros proyectos, desde hace algún tiempo venimos trabajando en colaboración obteniendo buenos resultados. Como parte de dicha colaboración se evaluó la actividad antimicrobiana de extractos acuosos de Byrsonima crassifolia (nanche), Larrea tridentata (gobernadora), Geranium mexicanum (Geranio) y Psidium guajava (Guayaba), plantas utilizadas tradicionalmente contra la diarrea. Los resultados obtenidos mostraron que algunos de los extractos (infusiones) analizados, contienen compuestos con actividad bactericida y o bacteriostática contra cepas de E. coli aisladas de cuadros clínicos. En el mismo estudio con los compuestos que no mostraron efecto antimicrobiano, se analizó la capacidad de estos para inhibir la adherencia, propiedad fundamental de las bacterias durante el proceso de colonización del hospedero. Los resultados obtenidos fueron satisfactorios ya que se inhibió la adherencia de cepas de E. coli incluidas en el estudio (Vázquez, S 2001 tesis licenciatura). Dada la importancia de las anteriores observaciones en otro estudio (Mendoza E., 2003 tesis licenciatura), se analizó la actividad de diferentes extractos del geranio y la concentración a la que eran efectivos para inhibir la adherencia de cepas de E. coli con los patrones agregativo, difuso y localizado a células HEp2. Los resultados obtenidos mostraron que algunos extractos inhibían específicamente la adherencia de tipo localizado, mientras que en otros el efecto fue menos específico. Con especies del género Physiallis (chenopodifolia, pruinosa y cinerascens) se analizaron extractos de diferentes partes de las plantas. Los resultados obtenidos mostraron que algunos de los extractos tienen compuestos con actividad antimicrobiana principalmente contra Staphylococcus sp (Góme R. O. 2003, Fiallega G. G. 2004 y Olivera D. N 2004). Con el propósito de conocer que propiedades pudieran tener los compuestos que no mostraron actividad antimicrobiana, se realizaron ensayos preliminares de inhibición de la adherencia de Staphylococcus sp al poliestireno, los resultados obtenidos fueron alentadores. Justificación En nuestro país hay un extendido uso de las plantas como remedio para el manejo de diferentes enfermedades infecciosas, este conocimiento tradicional, ha sido usado desde hace mucho tiempo y se ha transmitido de generación en generación. Sin embargo, no se cuenta con muchos datos en relación con los principios activos que puedan tener estas plantas y lo que puedan aportar a la ciencia, en cuanto a alternativas farmacológicas y de uso en terapias contra estos padecimientos. Los resultados obtenidos hasta el momento, señalan que los extractos de Geranium y physiallis poseen compuestos con actividad de antimicrobianos y con propiedades para inhibir la adherencia. De lograr el aislamiento e identificación de dichos compuestos, se abriría la posibilidad por un lado de utilizarlos para prevenir la colonización de los microorganismos por dos posibles mecanismos. Uno de ellos sería inhibiendo el crecimiento por el efecto antibacteriano y el otro interfiriendo en el proceso de colonización. Objetivo general Conformar un grupo multidiciplinario para identificar y definir la actividad de compuestos de plantas utilizadas de manera tradicional en el tratamiento de enfermedades infecciosas. Objetivos particulares Realizar un estudio biodirigído, para identificar en extractos de plantas de los géneros Geranium (Geranio) y Physiallis (tomate), efectos de inhibición de la adherencia y del crecimiento de bacterias asociadas con infecciones respiratorias e intestinales . Identificar los compuestos presentes en los extractos de Geranium mexicanum (Geranio), que poseen actividad antimicrobiana y / o antiadherente contra cepas de bacterias patógenas (E. coli y Staphylococcus), con el propósito de utilizarlos para el control o tratamiento de padecimientos ocasionados por éstas bacterias. REFERENCIAS Argueta, V. 1994. Atlas de la medicina tradicional Mexicana. Vol: I, II y III. Instituto Nacional Indigenista. Akdemir, Z., 2001. Polyphenolic compounds from Geranium pratense and their free radical scavenging activities. Phytochem., 56:189-193. Beachey E. H., 1981. Bacterial Adherence: Adhesin-Receptor Interactions Mediating the Atthachment of Bacteria to Mucosal Surfaces. J. Infect. Dis.; 143:325-345. Bye, R.; Linares, E. y Estrada, E. 1995. Biological diversity of medicinal plants in México. Phytochemistry of medicinal plants, Vol. 29, Chapter 4, págs. 61-85. Cravioto A., Gross R. J., Scotland S. M., Rowe B., 1979. An adhesive Factor Found in Strains of Escherichia coli Belonging to the Traditional Infantile Enteropathogenic Serotypes. Curr Microbiol. 3:95-99. Cravioto A., Tello A., Villafan H. Ruiz J., Del Vedovo S., Neeser J. R., 1991. Inhibition of Localized Adhesion of Enteropathogenic Escherichia coli to HEp-2 Cells by Immunoglobulin and Oligosaccharide Fractions of Human Colostrum and Breast Milk. J. Infec. Dis.; 163:1247-1255. Cristensen G. D., 1985. Aherence of Coagulase-Negative Staphylococcy. J. Clin. Microbiol., 22:996-1006. Ivancheva, S., 2000. A chemosystematic study of eleven Geranium species. Biochem. System. Ecol., 28:255-260. Kiers J.L., 2002. Inhibition of Adhesion of Enterotoxigenic Escherichia coli K88 by Soya Bean Tempe. Appl. Microbiol., 35:311-315. Mendoza E., 2003. Estudio del Efecto Antibacteriano y Antiadherente de Extractos de Geranium sp. Tesis de Licenciatura, Facultad de Cierncias, UNAM. Quijano, L. 2003. Geranium robertianum. Folium 6 instituto de química, UNAM. Vázquez, S., 2001. Actividad antibacteriana de extractos vegetales contra cepas de Escherichia coli de origen clínico. Tesis de Licenciatura, ENEP Iztacala, UNAM. Inhibición de la Adherencia y del Crecimiento de bacterias, inducido por Compuestos Presentes en Extractos de Plantas de uso Tradicional en la Medicina. Carlos Eslava1, Manuel Jiménez2, Emma Maldonado2, Ezequiel Mendoza1,2, Oscar Rangel1,2. 1 Facultad de Medicina, UNAM; 2 Instituto de Química, UNAM. Eje temático: Investigación multi e interdisciplinaria. Área: Ciencias Biológicas y de la Salud Carlos A. Eslava Campos Laboratorio de Investigación Básica Departamento de Salud Pública Unidad de Posgrado e Investigación Facultad de Medicina, UNAM Tel/Fax 5255-56220822 E-mail: [email protected]