o od ét ch M etti H Determinación del valor de hematocrito mediante centrifugación Determinación del valor de hematocrito mediante centrifugación El valor de hematocrito indica el porcentaje volumétrico de eritrocitos en sangre. El método de referencia para la determinación del hematocrito es la centrifugación. Mediante la centrifugación se separan los componentes sólidos de la sangre de los líquidos y se envasan herméticamente. Este método está establecido en la norma 1) DIN 58933-1 . A continuación, los tubos capilares de vidrio “… se centrifugan hasta que el producto alcance una aceleración centrífuga relativa mínima que actúe sobre los eritrocitos (RCF > 5.000) y un valor numérico de tiempo de centrifugado en minutos de por lo menos 100.000.” Productos Hettich para la determinación del valor de hematocrito: 1. Determinación del hematocrito con tubos capilares estándar Nº. ref. 2074 y 1072 a) Llenado Al llenar los tubos capilares hay que tener en cuenta que el extremo opuesto al orificio de llenado de estos permanezca seco. Para determinar el hematocrito se llenarán los tubos capilares hasta un 75 % aprox. de su capacidad. b) Cierre Hay que cerrar el extremo seco de los tubos capilares con masilla. Para ello, los tubos capilares deben pincharse en la masilla de manera vertical hasta que el borde de los tubos capilares toque el fondo de la placa de masilla. Incline ligeramente los tubos capilares hacia un lado y sáquelos de la masilla. c) Centrifugado Colóquelos con el extremo cerrado hacia afuera en el rotor de hematocrito y ponga la tapa del rotor. La fórmula para calcular el tiempo de centrifugado es: HAEMATOKRIT 200 Centrífuga para hematocrito Nº. referencia 1801 100.000 RCF [ ] = tiempo min Ejemplo: 100.000 Con una RCF = 20.000, sería = 5 min 20.000 d) Lectura del valor de hematocrito Determine el valor de hematocrito mediante el disco de lectura que, a su vez, es la tapa del rotor. Rotor, 24 posiciones Nº. referencia 2076 para tubos capilares estándar, con tapa con disco de lectura Otros modelos de centrífuga en los que pueden centrifugarse tubos capilares para hematocrito: MIKRO 220 MIKRO 220 R UNIVERSAL 320 UNIVERSAL 320 R 1) nº. nº. nº. nº. ref. ref. ref. ref. 2200 2205 1401 1406 (en (en (en (en el el el el rotor rotor rotor rotor nº. nº. nº. nº. 1023) 1023) 1650) 1650) orma DIN 58933-1: Hematología. Procedimiento de determinación de la fracción volumétrica de eritrocitos en sangre. Parte 1: método de referencia basado en la centrifugación. N Berlín: Editorial Beuth Verlag, enero de 1995. 2 2. Determinación del hematocrito con tubos capilares autosellantes Nº. referencia 1071 a) Llenado Introduzca la sangre por el extremo abierto y deje que la columna de sangre baje en dirección al tapón. La sangre debe tocar el tapón. b) Cierre Golpee los tubos capilares con el extremo cerrado tres veces contra la mesa de laboratorio. Esto intensifica el contacto con el material del tapón y favorece el proceso de sellado. Sólo de este modo se sellan los tubos capilares. c) y d) véase el punto 1 Dependiendo del modelo, los tubos capilares tienen distintos volúmenes y dimensiones: básico reforzado con mylar autosellante y reforzado con mylar Nº. referencia 2074 1072 1071 Contenido total sin tapón (µl) 49,9 73,9 Diámetro interior (mm) 0,92 1,12 75 75 37,4 55,4 Longitud total (mm) Contenido con llenado al 75 % (µl) 5. Manera de proceder en caso de rotura del vidrio Atención: riesgo de herida. Lo más recomendable es que trabaje con guantes dobles. Por si acaso saltaran cristales, póngase gafas de seguridad y mascarilla protectora. 3. Información sobre los distintos tubos capilares Tubos capilares estándar a)Extraiga con cuidado las cápsulas de recepción del rotor de hematocrito. Ponga el rotor, la tapa y las cápsulas de recepción en agua fría hasta que los restos de sangre se hayan desprendido por completo. b) A continuación, ponga todas las piezas en una solución desinfectante adecuada. Con respecto a su concentración y tiempo de actuación, le rogamos que proceda según las indicaciones del fabricante. c) Enjuague las piezas con agua fría y séquelas. d) Ahora puede volver a colocarlas en la centrífuga. 4. Limpieza y desinfección del rotor de hematocrito a) Quite la tapa del rotor con cuidado. b) Quite los cristales más grandes con las pinzas. c) Extraiga el rotor. Saque lentamente y con cuidado, con ayuda de las pinzas, las cápsulas de recepción afectadas o el anillo de obturación (en modelos más antiguos). Advertencia Le rogamos que no vuelva a utilizar las cápsulas de recepción afectadas o el anillo de obturación. Es casi imposible eliminar todas las esquirlas de estas piezas y las que queden provocarán más roturas del vidrio. d) Limpie y desinfecte el resto de piezas tal y como se describe en el apartado 4. Advertencia Ni el rotor de hematocrito, ni la tapa, ni las cápsulas de recepción ni los anillos de obturación son autoclavables. El rotor y la tapa deben limpiarse no sólo en caso de rotura del vidrio (véase el punto 5), sino también en caso de tubos capilares con pérdidas. En dicho caso, le rogamos que proceda como sigue: Andreas Hettich GmbH & Co. KG Föhrenstr. 12 D -78532 Tuttlingen Alemania www.hettichlab.com [email protected] [email protected] Tel.+49 (0)7461 / 7 05 -0 Fax+49 (0)7461 / 7 05 -11 22 Ventas nacional: -12 00 Ventas internacional: -12 01 Atención al cliente nacional: -12 02 Atención al cliente internacional: -12 03 M-HCT-ES.0614 © by Andreas Hettich GmbH & Co. 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