1- ANTICUERPOS ANTI

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ACTUALIZACIÓN EN EL
DIAGNÓSTICO DE LAS
ENFERMEDADES AUTOINMUNES
ANTICUERPOS ANTI-dsDNA
AUTOANTICUERPO
Entre los anticuerpos conocidos como anticuerpos
antinucleares (ANA), aquellos dirigidos contra la molécula de
DNA bicatenario muestran lo que puede ser la más fuerte de
las asociaciones clínicas con el lupus eritematoso sistémico
(SLE).
Existen dos tipos de anticuerpos anti-dsDNA, atendiendo
a la naturaleza del antígeno al que se unen: los dirigidos
contra la molécula desnaturalizada de DNA y los dirigidos
contra el DNA nativo, ya sea en su forma de cadena simple
(ssDNA) o de doble cadena (dsDNA). Los anti-dsDNA están
profundamente involucrados con las alteraciones renales
que suelen acompañar al SLE. La avidez de estos anticuerpos
puede también ser relevante en la patogenicidad del SLE.
Los anticuerpos anti-dsDNA són principalmente de la
clase IgG, si bien también pueden encontrarse los isotipos
IgM e IgA, con una clara correlación con la actividad de la
enfermedad(1,2).
ENTIDAD ANTIGÉNICA
ha sido demostrada mediante la correlación entre la actividad
de la enfermedad y la evolución de los títulos de anticuerpo
o de los isotipos. Las fluctuaciones en el nivel de anticuerpos
anti-dsDNA en un paciente generalmente correlacionan
con su estado clínico. Los anticuerpos de elevada avidez,
y en concreto el isotipo IgG, a menudo se utilizan como
marcadores de actividad de la enfermedad en pacientes con
nefritis lúpica. Estos pueden formar inmunocomplejos que
precipitan a nivel de riñón propiciando serias complicaciones
renales al paciente. Por otro lado, los anti-dsDNA de la
clase IgM, ya sean solos o acompañados por IgA, muestran
una fuerte asociación con pacientes con complicaciones
cutáneas(1,5,6).
MÉTODOS DE DETECCIÓN
Existen cuatro métodos principales para la determinación
de los anticuerpos anti-dsDNA. Inmunofluorescencia
indirecta (IFA) en Crithidia luciliae (CLIF): el antígeno, DNA
bicatenario y circular, está localizado en el kinetoplasto y se
conoce como kDNA. El núcleo, el flagelo y el cuerpo basal
pueden proporcionar marcaje fluorescente pero tan sólo debe
considerarse la fluorescencia del kinetoplasto.
Los anticuerpos que reaccionan con el dsDNA son los más
específicos y fiables para el diagnóstico de SLE. Se unen a
epítopos de la estructura fosfodiester presente a lo largo de
la molécula de dsDNA(3). Los anticuerpos de pacientes de
SLE necesitan fragmentos de DNA de un tamaño mínimo de
20-40 pares de base para interaccionar y formar uniones
estables(4).
ASOCIACIONES CLÍNICAS
Aunque la presencia de los ANA es tan sólo uno de los 11
criterios diagnósticos de la American Rheumatism Association,
parece difícil poder emitir un diagnóstico definitivo de SLE en
su ausencia. Los ANA se hallan presentes en más del 95% de
pacientes con SLE. La significación clínica de los anti-dsDNA
Figura 1. Microgafía electrónica de un segmento de kDNA. Reproducido de
Klingbeil et al. (2001) Protist 152, 255–262.
ELISA: se trata del método más sensible. Puede contener
antígenos de origen distinto (bicatenario circular plasmídico,
de timo de ternera,...) y puede adoptar distintos formatos
de inmunoanálisis, como los basados en lectura clásica de
absorbancia, en quimioluminiscencia o en fluorescencia. Con
el ELISA, igual como con la IFA, se pueden detectar anticuerpos
anti-dsDNA tanto de alta como de baja avidez.
BIBLIOGRAFÍA
1. Förger F, Matthias T, Oppermann M, Becker H, Helmke K. Clinical significance
of anti-dsDNA antibody isotypes:IgG/IgM ratio of anti-dsDNA antibodies as
a prognostic marker for lupus nephritis. Lupus 2004; 13 (1): 36-44.
2. Witte T, Hartung K, Matthias T, Sachse C, Fricke M, Deicher H, Kalden JR,
Lakomek HJ, Peter HH, Shmidt RE. Association of IgA anti-dsDNA antibodies
with vasculitis and disease activity in systemic lupus erythematosus.
Rheumatology International 1998; 18(2): 63-69.
3. Pisetsky DS. Antibody responses to DNA in Normal Immunity and Aberrant
Immunity. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology 1998; 5(1):1-6.
4. Ali R, Dersomonian H, Stollar BD. Binding of monoclonal anti-native DNA
autoantibodies to DNA of varying size and conformation. Mol Immunol
1985; 22(12):1415-22.
5. Smeenk R, Hylkema M. Detection of antibodies to DNA: a technical
assessment. Mol Biol Rep 1992;17(1):71-9.
6. Parodi A, Drosera M, Barbien L, Babbini G, Rebora A. Antidouble-stranded
DNA isotypes in lupus erythematosus patients with prevalent cutaneous
presentation. British Journal of Dermatology 2002;174: 754.
Figura 2. Marcaje del kinetoplasto de Crithidia luciliae mediante
inmunofluorescencia indirecta.
7. Derksen RHWM, Bast EJEG, Strooisma T, Jacobs JWG. A comparison
between the Farr radioimmunoassay and a new automated fluorescence
immunoassay for the detection of antibodies against double stranded DNA
in serum. Annals of the Rheumatic Diseases 2002;61:1099-1102.
El método Farr es un radioinmunoanálisis basado en una
inmunoprecipitación a elevadas concentraciones de sales,
utilizando sulfato de amonio, una condición que disocia los
anti-dsDNA de baja avidez de la molécula de DNA. Este tipo
de análisis sólamente detecta anticuerpos de alta avidez, más
específicos para SLE que los de baja avidez(7). Por último,
el método PEG (polietilenglicol) detecta anticuerpos de baja
avidez.
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