Patrones de adherencia de Escherichia coli patogénica aviar

Revista Digital de la Universidad Autónoma de Zacatecas
Nueva época. Publicación cuatrimestral. 8, 9, 10 de Noviembre 2006, volumen 2, número 3 Especial.
ISSN 0188-5367
Patrones de adherencia de Escherichia coli
patogénica aviar a células MDCK
Dirsha Yanelí De Santiago Franco
Patrocinio del Pilar Miranda Delgado
Yolanda Almanza Márquez
Rosa María Ramírez Santoyo
Unidad Académica de Biología Experimental
Universidad Autónoma de Zacatecas
Resumen
La colibacilosis es una de las principales causas de mortalidad en pollos y
pavos y produce significativas pérdidas en la industria avícola.
Escherichia coli patogénica aviar (APEC) causa diferentes síndromes. Uno
de los más importantes es la enfermedad respiratoria que puede
complicarse y convertirse en septicemia. Se reconoce que para el
desarrollo de la enfermedad es un prerrequisito que la bacteria colonice
los tejidos del huésped.
En APEC no se han descrito los patrones de adherencia bacteriana in
vitro a células epiteliales, como se ha hecho en el caso de E. coli
diarriogénicas de humanos para describir los diferentes patotipos
bacterianos. El objetivo de este trabajo fue establecer sí E. coli
patogénica aviar es capaz de adherirse a células epiteliales MDCK y
determinar los patrones de adherencia. Para ello se utilizaron 20 cepas
APEC aisladas de casos clínicos de septicemia aviar registradas en
nuestro cepario. También se cultivaron células MDCK en medio DMEM
suplementado con 10% de suero fetal bovino y 0.8% de insulina. En los
ensayos de adherencia las células epiteliales en monocapa se
mantuvieron en cajas de 24 pozos conteniendo 1X105 célula/ml, se
infectaron con las diferentes cepas APEC a una concentracion de 107
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UFC/ml y se incubaron por 90 min. a 37°C, 5%CO2 y 85% de humedad
relativa, en medio DMEM libre de antibióticos.
Después se lavaron tres veces con solución buffer de fosfatos para
eliminar las bacterias no adherentes. Las monocapas celulares con
bacterias adheridas fueron fijadas con metanol y teñidas con Giemsa.
Finalmente se observó con ayuda del microscopio. Los resultados nos
permitieron
determinar
que
cuatro
de
las
cepas
no
mostraron
adherencia a este tipo celular. De las cepas adherentes la mayoría
presentó un patrón denominado difuso en el que la bacteria se unió a
toda la superficie celular. Además, en tres de estas cepas se efectuó una
adhesión agregativa y en cuatro cepas también se observó el patrón
localizado en el cual la bacteria forma microcolonias en la superficie
celular de áreas localizadas. En conclusión este trabajo demostró
diferentes patrones de adherencia de APEC a células epiteliales MDCK y
este modelo nos permitirá determinar que adhesinas median este evento.
Palabras clave: adherencia, Escherichia coli, colisepticemia aviar.
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