EFECTO DE DISRUPTORES ENDOCRINOS SOBRE LA FUNCIONALIDAD DEL OVARIO Y UTERO Enrique H. Luque Laboratorio de Endocrinología y Tumores Hormonodependientes (LETH), Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral. Santa Fe, Argentina. [email protected] Desde el año 1998 nuestro Laboratorio investiga el efecto de compuestos químicos con acción hormonal que contaminan el ambiente y que serían responsables de diversas patologías. Estos químicos son clasificados como disruptores endocrinos (DE) porque interfieren con el normal funcionamiento del sistema endocrino alterando el desarrollo/diferenciación de órganos y tejidos. Los DE en su mayoría poseen acción estrogénica y provienen de diferentes orígenes: pesticidas y herbicidas, derivados de plásticos, detergentes, productos farmacéuticos e industriales. Se encuentran en el ambiente en bajas concentraciones y en productos de uso cotidiano, contaminan cursos de agua, praderas, animales de la fauna, especies de interés zootécnico y también a los humanos. Estos químicos se asocian con alteraciones metabólicas, endocrinas y lesiones preneoplásicas/neoplásicas en tejidos hormonodependientes. Los DE actuarían alterando la señalización de los receptores hormonales, a través de coregulares transcripcionales, vías enzimáticas de la síntesis de esteroides y/o metabólica, además de otros mecanismos menos conocidos. Entre éstos, podemos mencionar los efectos directos sobre los genes a través de cambios en el control epigenético [1]. Esto es importante, ya que alteraciones en el programa genético durante el desarrollo pueden tener consecuencias en años posteriores e inclusive ser responsable de la herencia transgeneracional de las enfermedades. Los DE pueden actuar a muy bajas concentraciones en tejidos específicos, inducir curvas dosis-respuesta no tradicionales, las bajas dosis pueden tener efectos mayores que las altas, la edad en el momento de la exposición del individuo tiene efectos diferentes (ie: la exposición durante el desarrollo fetal o postnatal temprano genera alteraciones que se mantienen en la vida adulta). Los modelos animales sugieren que los DE pueden afectar, no sólo al individuo expuesto, sino también a la cría y generaciones subsecuentes. El mecanismo de transmisión transgeneracional involucra modificaciones no-genómicas de las células germinales como cambios en la metilación del ADN y la acetilación de histonas [1]. Nuestra hipótesis de trabajo supone que la exposición neonatal a dosis “ambientalmente relevantes” (i.e.: aquellas detectadas en el ambiente y a las que estamos expuestos) de DE altera el normal desarrollo de los tejidos target, aumentando la incidencia de patologías reproductivas relacionadas con la fertilidad y los tumores ginecológicos. La exposición a DE puede afectar a las generaciones futuras. Para probar esta hipótesis hemos desarrollado modelos animales de exposición prenatal y postnatal para investigar los efectos adversos in vivo de compuestos químicos DE, fundamentalmente, sobre tejidos target del eje hipotálamo-hipófiso-gonadal y tracto genital [2-12]. La exposición postnatal temprana a bisfenol A (BPA), dietilstilbestrol o endosulfán altera la diferenciación del ovario y útero siendo responsable de cambios funcionales relacionados con una disminución en la fertilidad. En el ovario de la rata y de la oveja la exposición a DE alteró el desarrollo folicular, disminuyó el reservorio de folículos primordiales, aumentó la incidencia de folículos poliovulares, la atresia folicular y la expresión de receptor de andrógenos (RA). En hembras tratadas con gonadotrofinas exógenas la exposición a DE mostró un menor número de folículos en desarrollo, menor expresión de RA y aumento del ARN de growth differentiation factor-9 (GDF-9). También disminuyó la respuesta esteroidogénica con menor expresión de los genes de las enzimas esteroidogénicas y de Eg circulantes. En el útero la exposición a DE alteró su diferenciación y afectó la expresión del gen Hoxa10 relacionado con la implantación. Actualmente, nuestro objetivo es investigar si el efecto adverso observado en el ovario y útero se produce por medio de cambios en el control epigenético. Concretamente, estamos 1 investigando la expresión de enzimas (por RT-PCR en tiempo real medimos el ANRm de DNA-metiltransferasas, histona-deacetilasas clase I e histona metiltransferasa) involucradas en los mecanismos de control epigenético en ovario y útero de ratas adultas expuestas a DE. Se observó una expresión alterada de estas enzimas que difirió según la dosis de BPA administrada perinatalmente, esto podría explicar los cambios en la expresión de genes involucrados en la diferenciación funcional del ovario y útero. La hipótesis que establece que el origen de la salud y enfermedad ocurren durante el desarrollo (fetal o postnatal temprano), describe la interacción existente entre el desarrollo del organismo y el ambiente determinando la susceptibilidad de ciertos individuos a padecer enfermedades a lo largo de su vida. Profundizar en este aspecto tiene importantes implicancias para la salud de los animales y humanos debido al incremento en la incidencia de tumores hormonodependientes y de problemas de fertilidad observada en los últimos años, lo que se asocia con el significativo aumento de químicos DE que contaminan el ambiente. Bibliografía 1. Skinner MK, Manikkam M, Guerrero-Bosagna C. Epigenetic transgenerational actions of endocrine disruptors. Reproductive Toxicology 31: 337-343, 2011. 2. Monje LD, Varayoud J, Luque EH, Ramos JG. Neonatal exposure to bisphenol A (BPA) modifies the abundance of estrogen receptor alpha (ER) transcripts with alternative 5’ unstranslated regions in the female rat preoptic area. Journal of Endocrinology 194: 201-212, 2007. 3. Varayoud J, Ramos JG, Bosquiazzo V, Muñoz-de-Toro M, Luque EH. Developmental exposure to bisphenol A impairs the uterine response to ovarian steroids in the adult. Endocrinology 149: 5848-5860, 2008. 4. 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