PROTOZOARIOS INTESTINALES PATÓGENOS INTRODUCCIÓN 2 Los protozoarios son organismos unicelulares Reino Protista, subreino Protozoa Eucariotas Pueden reproducirse asexuada o sexuadamente Movilidad variable dependiendo de sus órganos de locomoción La mayoría tienen nutrición de tipo heterótrofa (incapaces de transformar C inorgánico en C orgánico). Pueden vivir libremente o actuar como parásitos Pueden parasitar a distintos animales y a la especie humana. ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA EUCARIOTAS 3 Con membrana nuclear Con nucleolo Membrana celular Con citoesqueleto Con organelos: mitocondrias, RE, Golgi, vacuolas y lisosomas Capaces de realizar endocitosis y exocitosis Con ribosomas compuestos por subunidades 40S y 60S ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS RELEVANTES 4 ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA NÚCLEO CROMATINA central y periférica NUCLEOLOS MEMBRANA NUCLEAR CITOPLASMA (ecto y endoplasma) VACUOLAS RE, RIBOSOMAS, GOLGI MITOCONDRIAS LISOSOMAS (contienen proteasas) ELEMENTOS DE SOSTÉN (AXOSTILO) WFB (cuerpos formadores de pared) MEMBRANA PLASMÁTICA simple o rodeada de glicocálix 5 DISTINTAS ETAPAS BIOLÓGICAS TROFOZOÍTO: es la forma activa del protozoario, en la cual se alimenta, se reproduce, se moviliza y ejerce su acción patógena. QUISTE: es la forma de resistencia (a la desecación, a los cambios de temperatura, pH, humedad, concentración de oxígeno, etc) y de transmisión (etapa infectante), y también de multiplicación. OOQUISTE: proviene de la fusión de los GAMETOS, correspondiente a la etapa sexuada de reproducción, y aparece solo en algunas especies. También se denomina cigoto o cigote. ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA FORMAS DE REPRODUCCIÓN DE LOS PROTOZOARIOS 6 ASEXUADA FISIÓN BINARIA DIVISIÓN MÚLTIPLE BROTAMIENTO EXTERNO o plasmotomía ENDODIOGENIA: formación de 2 células hijas por brotamiento interno ESQUIZOGONIA: división del núcleo celular en gran número de núcleos secundarios que se rodean de citoplasma. MEROGONIA: produce merozoítos y esquizontes ESPOROGONIA: produce esporozoítos SEXUADA GAMETOGONIA: produce gametos y un cigoto ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA FORMAS DE DESPLAZAMIENTO DE LOS PROTOZOARIOS 7 SEUDÓPODOS: prolongaciones del citoplasma: LOBÓPODOS: digitiformes con ecto y endoplasma (ej. E.histolytica) FILÓPODOS: filamentosas, solo ectoplasma (ej. Acanthamoeba) FLAGELOS CILIAS COMPLEJO APICAL ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA TAXONOMÍA 8 PA R Á S ITOS HU M A N OS : ( C A R AC T E R Í ST I C A S 4 P HY LU M . N U C L EA R ES , D E R E P RO D U C C I Ó N Y D E LO C O M O C I Ó N ) REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA • Sub Phylum Mastigophora • Sub Phylum Sarcodina PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970) • Clase Sporozoa PHYLUM MICROSPORA • Orden Microsporita PHYLUM CILIOPHORA • Orden Trichostomatida ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA REINO PROTISTA 9 SUB REINO PROTOZOA PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA Sub Phylum Mastigophora Orden Tricomonadida Género Trichomonas -T.vaginalis Género Pentatrichomonas - P.hominis Orden Retortamonadida Género Chilomastix - Ch.mesnilii Género Retortamonas -R.intestinalis Orden Diplomonadida Género Giardia - G.lamblia (Stiles 1915) Sub Phylum Sarcodina Orden Amoebida Género Entamoeba - E.histolytica (Schaudinn 1903) Género Blastocystis - B.hominis (Zierdt, 1989) ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA REINO PROTISTA 10 SUB REINO PROTOZOA PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970) Clase Sporozoa. Sub Clase Coccidia Género Isospora - I.belli Género Cryptosporidium - C.parvum Género Cyclospora - C.cayetanensis ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA REINO PROTISTA 11 SUB REINO PROTOZOA PHYLUM MICROSPORA Orden Microsporita Género Encephalitozoon - E.intestinalis Género Enterocytozoon - E.bieneusi PHYLUM CILIOPHORA Orden Trichostomatida Género Balantidium - B.coli (Malmsten 1857) ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 12 CLASIFICACIÓN DE PROTOZOOS DE INTERÉS MÉDICO SEGÚN LOCALIZACIÓN EN EL HUÉSPED TUBO DIGESTIVO Y VÍAS GÉNITOURINARIAS PATÓGENOS PRIMARIOS • Giardia lamblia (GIARDIASIS) • Entamoeba histolytica (AMIBIASIS) • Trichomonas vaginalis (TRICOMONIASIS) OPORTUNISTAS EMERGENTES • Isospora belli (ISOSPOROSIS) • Cryptosporidium spp. (CRIPTOSPORIDIOSIS) • Cyclospora cayetanensis (CICLOSPOROSIS) • Enterocytozoon bieneusi (MICROSPORIDIOSIS) • Encephalitozoon intestinalis (MICROSPORIDIOSIS) PATOGENICIDAD DISCUTIDA • Entamoeba coli • Endolimax nana • Chilomastix mesnilii • Iodamoeba bütschlii • Blastocystis hominis • Pentatrichomonas hominis 13 IMPORTANCIA DE LOS PROTOZOARIOS INTESTINALES • Diarrea aguda • Diarrea prolongada • Diarrea crónica • Diarrea con deshidratación • Síndrome de malabsorción • Síndrome disentérico ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 14 AGENTES ETIOLÓGICOS PROTOZOOS PATÓGENOS Giardia lamblia ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA Entamoeba histolytica Giardia lamblia ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 15 Giardia lamblia 16 Flagelado intestinal con 2 formas evolutivas: Trofozoíto fijado al duodeno por discos suctorios Quiste resistente que se elimina al exterior Prevalencia: 10-20% población infantil, 3% población adulta. Epidemiología:cosmopolita Localización: epitelio de intestino delgado ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA Giardia lamblia 17 Mecanismos de adhesión Lectinas (proteínas parasitarias que se unen a azúcares de la membrana superficial de los enterocitos) Vesículas periféricas con función de lisosomas Transmisión Quistes (ciclo fecal-oral) Interhumana - zoonosis? ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 18 Giardia lamblia ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 19 Giardia lamblia CICLO EVOLUTIVO ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA PATOGENIA DE LA GIARDIASIS 20 Daño directo Factor mecánico (disco suctorio) Bloqueo o tapizado de la mucosa intestinal Competencia por nutrientes Factor químico (productos de excreción-secreción) Daño indirecto Factor enzimático (disacaridasas) Disminución de sales biliares Factores inmunológicos Mecanismos de defensa intestinal ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 21 MICROFOTOGRAFÍAS ELECTRÓNICAS Trofozoítos de Giardia lamblia tapizando enterocitos y con mayor aumento enfoque de disco suctorio ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS 22 Examen coproparasitario Directo, enriquecimiento y macroscópico Seriado: 3 muestras sucesivas Sondeo duodenal Biopsia de intestino delgado ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 23 BIOPSIA DUODENAL ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS 24 DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES (Coproantígenos): ANALISIS DE ADN: EIA, inmunocromatografía, IFD PCR DETECCIÓN DE ANTICUERPOS: IFI, ID, EIA, IB ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 25 GIARDIASIS EN POBLACIÓN HOSPITALARIA Atención hospitalaria ambulatoria (CHPR) 1984: 21% (n=4152) 1986: 19% (n=4641) 1988: 18% (n=6433) 1990: 18% (n=5967) 1992: 18% (n=5646) 1994: 19% (n=5329) 1996: 16% (n=6763) 1998: 17% (n=4467) 2000: 11% (n=2986) 2002: 16% (n=3282) 2004: 17% (n=3675) ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA Comunicación personal Dra.Zanetta 26 GIARDIASIS EN POBLACIÓN MUTUAL Atención mutual (MUCAM) 1er. semestre 99: 9% de giardiasis en 1352 coproparasitarios. Sanabria D y cols. Lab al Día. 1999 1er semestre 05: 5% giardiasis en 2136 coproparasitarios. Basmadjian Y y cols. XVII Congr Latinoameric de Parasitología. 2005 ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 27 GIARDIASIS Y DIARREA Diarrea aguda infantil 1 caso de giardiasis en 153 niños hospitalizados por DAI Ferrari AM y cols. Arch Pediatr Urug.1983 Diarrea aguda de la comunidad 18% (13/72) niños con diarrea y 7% (3/44) niños sin diarrea Montano A y cols. Diarrea Aguda Uruguay. IDRC.1991 ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA GIARDIASIS Y DIARREA 28 Diarrea crónica 46% de 155 niños de 1-5 años, de bajo msec con diarrea crónica. 57% en el grupo de 1-3 años. Zanetta E y cols. VI Congreso FLAP. 1983 Diarrea persistente 3,5% (8/224) en niños hospitalizados. Torres ME y cols. Journ Clin Microbiol. 2001 ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA % Parasitismo 29 20 Giardiasis Giardiasis Casos Niños Nuevos 10 Giardiasis Casos Niños Controlados 0 2006 2007 2008 Año Año Giardiasis Giardiasis Casos Niños Nuevos Giardiasis Casos Niños Controlados 2006 12,6 8,4 3,9 2007 14,6 10,7 3,9 2008 12,9 8,5 4,4 Gráfico de tendencias comparativas – Giardiasis. CEI 2006-2008. Montevideo, Uruguay. ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA GIARDIASIS RECURRENTES 30 Portadores sanos o con diarrea. 6 controles (1/semestre): 14% (49/355) (+ en 3 o más de las muestras) Reinfección? Resistencia a la medicación? Giardiasis crónica? Zanetta E y cols. Giardiasis persistente. Chile 1995 ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 31 GIARDIASIS EN ADULTOS Manipuladores de alimentos (H.Clínicas) 30% de individuos parasitados (34/110), 1 con giardiasis. Salvatella R y cols. Rev Urug Patol Clin 1996. Población de Hospital de adultos (H.Pasteur) 29% de muestras positivas en 230 estudios del primer semestre de 1999, diagnosticando 14 giardiasis (6%). Acuña AM y cols. Lab al Día 1999. ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 32 • CLASIFICACIÓN DE Giardia lamblia Desde el punto de vista taxonómico G.lamblia se clasifica en 7 genotipos (A-G): Genotipos A y B son los que muestran mayor potencial zoonótico. • Puesta a punto de estrategia de Biología Molecular para determinar Genotipos de G. lamblia circulantes en Uruguay:PCR – RFLP a partir de la amplificación restricciòn de un fragmento del gen que codifica para una enzima (glutamatodeshidrogenasa) de este protozoo. • 16 muestras de niños con giardiasis: 14 GA (13 AIII y 1 AI) 2 GB (BIII) . ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA Ureta A y cols. XX Congr.Lat Americ Microbiología,2010 Entamoeba histolytica ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 33 Entamoeba histolytica 34 Ameba con 2 formas evolutivas: Trofozoíto: vive en intestino grueso humano y puede invadir y atravesar mucosa intestinal Quiste: se elimina al exterior con las heces Prevalencia en Uruguay: 1-2% adultos y niños mayores de 5 años (95% portadores sanos u oligosintomáticos). ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 35 Entamoeba histolytica Localización: Intestino grueso Adhesión: Lectinas Invasión por E. histolytica: proteasas, erosión ulceración en “botón de camisa” complicaciones extraintestinales Transmisión: quistes en heces ciclo fecal-oral (manipuladores de alimentos) ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 36 Entamoeba histolytica - dispar ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 37 Entamoeba histolytica CICLO EVOLUTIVO ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS 38 Coproparasitario seriado: Observado por técnico entrenado Con técnicas de enriquecimiento Con control de calidad Rectosigmoidoscopía Serología en amibiasis tisular ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 39 DIFICULTADES EN EL DIAGNÓSTICO Imposible diferenciación morfológica entre las especies englobadas en el denominado “complejo Entamoeba” E.histolytica: puede causar enfermedad invasiva intestinal y extraintestinal E.dispar: no ¿Interconversión entre ambas? ¿Coexistencia de ambas especies en el huésped? DEBERÍA INFORMARSE COMO E.histolytica/dispar ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS 40 DETECCIÓN DE ANTICUERPOS: DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES (Coproantígenos): HAI, AL, IEF, CIE, IFI, FC, ELISA ELISA, inmunocromatografía ANALISIS DE ADN: PCR ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 41 ¿EXISTE AMEBIASIS EN URUGUAY? 0,1-1,5% en población de nivel socio económico deficitario, corresponden a Entamoeba histolytica-dispar Mayoría paucisintomáticos: Entamoeba dispar? Viajeros que provienen de zonas endémicas generalmente sintomáticos: Entamoeba histolytica? ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA CONTROL DE LAS PROTOZOOSIS INTESTINALES 42 1. Educación en salud 2. Saneamiento adecuado 3. Tratamiento de los casos diagnosticados ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA PROFILAXIS DE INFECCIONES POR PROTOZOOS INTESTINALES 43 LAVADO DE MANOS Previo a la ingesta de alimentos Posterior al uso del baño Riguroso en relación con la preparación de alimentos LAVADO DE FRUTAS Y VERDURAS HIGIENE AMBIENTAL Limpieza minuciosa de mesadas y utensilios de cocina Desinfección de baños y área de cambio de pañales Lavado de pisos y áreas de juego Higiene de juguetes ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 44 MUCHAS GRACIAS ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA