fc2. pruebas pretransfunsionales y su control de calidad

RESPYN
Revista Salud Pública y Nutrición
Edición Especial 3-2012
23 y 24 de Agosto 2011; Monterrey, N.L., México
PRUEBAS
Questions?!
PRETRANSFUSIONALES Y SU
CONTROL DE CALIDAD
Pruebas Pre-transfusionales?
Es un conjunto de procedimiento
in vitro que nos permiten conocer
si hay afinidad inmunológica entre
el hemocomponente a transfundir
de un donador hacia un receptor
( paciente).
OBJETIVO
SELECCIONAR COMPONENTES SANGUÍNEOS QUE
UNA VEZ TRANSFUNDIDOS TENDRÁN
UNASOBREVIVENCIA ACEPTABLE, CON EL MENOR
RIESGO ASOCIADO PARA EL RECEPTOR POTENCIAL
OBJETIVO
COMPATIBILIDAD ABO
ENTRE COMPONENTE
Y
RECEPTOR
OBJETIVO
DETECTAR LA MAYORIA
DE ANTICUERPOS
INESPERADOS
CLINICAMENTE
SIGNIFICATIVOS
(ACTIVOS A 37 °C)
SOLICITUD
ABO / Rh
RASTREO
AUTO
PCM / PCm
CONTROL
METODO
MUESTRA
OPERADOR
PRUEBAS
PRETRASFUSIONALES
PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES
PRUEBA MAYOR
PRUEBA MENOR
AUTOTESTIGO
D
R
A
PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES
R
Prueba Menor
D
Prueba Mayor
AC
Autocontrol
GR receptor
+
Suero donador
GR donador
+
Suero receptor
GR receptor
+
Suero receptor
PRUEBAS SEROLOGICAS
TIPIFICACIÓN SABO
TIPIFICACION Rh
DESARROLLO DE LA
PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD
SOLICITUD

Datos del Hospital, Instituto o unidad medica que solicita

Datos generales del paciente ( nombre, edad, sexo, cama, número de ingreso etc.)

Diagnóstico ( legible y sin iníciales)

Tipo de transfusión (urgente, ordinario, programada)

Datos previos de transfusión.
SOLICITUD

Medicamentos que este recibiendo ( antibióticos )

Datos clínicos ( Hb. Hto. TP, TPT, Plaquetas)

Unidad o componente sanguíneo solicitado ( Qué? y Cuántos?, características
requeridas)

Fecha y Hora en que se realizara la transfusión

Nombre completo y firma del médico que solicita la transfusión
SOLICITUD
UNIDAD MEDICA
PACIENTE
DATOS
CLINICOS
UNIDAD A
TRANSFUNDIR
DATOS DEL
RESPONSABLE
SOLICITUD DE PRODUCTOS
SANGUÍNEOS
NOMBRE Y APELLIDOS
No. DE REGISTRO
FECHA DE
EXTRACCION
SOLICITUD DE PRODUCTOS
SANGUÍNEOS
TIPO Y CANTIDAD DEL PRODUCTO
SOLICITADO (CE, PL, 250 ml,100ml)
DIAGNOSTICO O TIPO DE CIRUGIA
(LES, BYPASS)
GRADO DE URGENCIA
SOLICITUD DE PRODUCTOS
SANGUÍNEOS
ANTECEDENTES
TRANSFUSIONALES
ANTECEDENTES DE
REACCIONES
TRANSFUSIONALES Y
TIPO DE REACCION
SOLICITUD DE PRODUCTOS
SANGUÍNEOS
EN MUJERES No DE
EMBARAZOS Y
ABORTOS
MEDICO SOLICITANTE,
SERVICIO
HORA Y FECHA DE LA
SOLICITUD
PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES
ROTULADO ADECUADO DE
LA MUESTRA
NOMBRE Y APELLIDOS
No. DE REGISTRO
FECHA DE EXTRACCION
(ISO9000)
CONFIRMACION DE LA
IDENTIDAD DE LA
MUESTRA
CONFIRMACION DE LA
IDENTIDAD DE LA
MUESTRA
CHECAR ROTULADO DEL
TUBO CON LA SOLICITUD
MEDIDAS DE SEGURIDAD Y
CONTROL DE CALIDAD
REACTIVOS EMPLEADOS
DE LA MUESTRA PROBLEMA
DEL PILOTO DEL DONADOR
DE LA PRUEBA CRUZADA
HEMOCOMPONENTE
LAS UNIDADES A TRANSFUNDIR DEBERÁN DE CUMPLIR CON
LOS REQUISITOS DE SEGURIDAD NECESARIOS:
1.- GRUPO SANGUÍNEO Y Rh
2.-SEROLOGÍA NO REACTIVA.
3.-IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE.
4.-FECHA DE EXTRACIÓN Y CADUCIDAD.
5.-DATOS DE HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO.
6.-TIPO DE HEMOCOMPONENTE.
7.-VOLUMEN Y CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y/O
TRATAMIENTO ESPECIAL.
PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD
El inciso 10 de la NOM-003-SSA2-1993 par la disposición de la sangre
humana y sus componentes con fines terapéuticos que
corresponde a la sección de Hemocompatibilidad y Receptores,
establece las características pertinentes de la prueba cruzada.
10.15 Las pruebas cruzadas de compatibilidad sanguínea,
Deberán incluir aquéllas que permitan demostrar la ausencia de
anticuerpos específicos regulares o irregulares de importancia
clínica en el suero del receptor, contra los eritrocitos del disponente
(prueba mayor)
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Asimismo, es recomendable demostrar la ausencia de
anticuerpos iregulares de importancia clínica en el suero del
disponente, contra los eritrocitos del receptor (prueba menor)
Las pruebas cruzadas incluirán pruebas de aglutinación en
medio salino, así como, en algún medio facilitador de la
reacción, rutinariamente se empleará la prueba de
antiglobulina humana (prueba de Coombs)
Las pruebas cruzadas deberán incluir un control que
permita detectar la presencia de autoanticuerpos.
A manera de control del procedimiento y del reactivo, en
cada prueba de Coombs interpretada como negativa, es
recomendable agregar células sensibilizadas con
inmunoglobulina G
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
La prueba cruzada presentará de una tres fases,
dependiendo del medio en el que desarrolle. La
más común emplea medio salino, por ende se
divide en tres fases:
Salina rápida: descarta incompatibilidad ABO.
Puede presentar aglutinación cuando hay
presencia
de
Roleaux,
presencia
de
autoanticuerpos o aloanticuerpos, tubo de
muestra contaminado.
 Salina a 37ºC: Incubación a 37ºC al menos 1 hora.
Detecta anticuerpos de tipo IgG. Puede haber
aglutinación en presencia de autoanticuerpos o
aloanticuerpos. Permite diferenciar la presencia
de anticuerpos fríos de los calientes.
 Salina Coombs Fase final en la que se agrega el
suero
de
Coombs
(poliespecífico
o
monoespecífico).Detecta anticuerpo clínicamente
significativos.
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Existen diferentes tipos de reactivos de
Coombs.
– Gel-Coombs poliespecífico (anti-IgG +
anti-C3d)
– Gel- Coombs monoespecífico
– ( anti-IgG)
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Potenciadores
 LISS (Low Ionic Strength Saline): Incrementa la
captura de anticuerpos , disminuye el tiempo de
incubación.
 ENZIMAS
PROTEOLITICAS: (papaína, ficina,
tripsina, bromelina) amplifica detección de
anticuerpos
anti-Rh,
Kidd,
Lewis,
autoanticuerpos calientes y frios (excepción de
Pr)
 SOLUCIONES
DE POLICATIONES (Polibrenos,
sulfato de protamina) Induce
agragación
reversible, genera complejos Ag-Ab intactos,
altamente sensible.

RASTREO
●
Dentro de el protocolo de pruebas PRETANSFUSIONALES y de
REACCIÓN TRANSFUSIONAL se sugiere la búsqueda de
anticuerpos diferentes al sistema ABO para aquellos pacientes que
reporten dentro de la historia clínica un factor de riesgo.
SE REALIZA A PACIENTES:
POLITRANSFUNDIDOS
MUJERES EMBARAZADAS Rh NEGATIVO
REACCION HEMOLITICA TRANSFUSIONALES
RASTREO

10.9 Los plasmas, incluyendo el contenido en las unidades de
concentrados
de
plaquetas
o
leucocitos……..
Es
recomendable practicar una prueba menor
o haber
comprobado, mediante pruebas de rastreo, la ausencia de
anticuerpos
irregulares
de
importancia
clínica,
particularmente cundo el plasma provenga de disponente con
antecedentes propiciadores de aloinmunización.
● 10.16
No se ha comprobado que el rastreo rutinario de
anticuerpos irregulares, en el suero del receptor y del
disponente, pueda sustituir a la prueba cruzada de
compatibilidad.
Pruebas
Pretransfusionales
NEONATOS
NEONATO Y LACTANTE
PEQUEÑO
INMUNOLOGICAMENTE
INMADUROS
RARA ALOINMUNIZACIÓN
CONTRA AGS
ERITROCITARIOS DURANTE
PERIODO NEONATAL
NEONATO Y LACTANTE
PEQUEÑO
PRUEBAS REITERADAS
INCREMENTAN PERDIDA DE
SANGRE IATROGÉNICA
NEONATO Y LACTANTE
PEQUEÑO
ESTANDARES DE LA
AABB
LIMITADAS PRUEBAS
SEROLÓGICAS
EN NEONATOS MENORES DE
4 MESES
TIPIFICACIÓN ABO, Rh ,
RASTREO DE ANTICUERPOS
(SUERO,PLASMA DE
NEONATO O MAMA.)
NEONATO Y LACTANTE
PEQUEÑO
RASTREO DE
ANTICUERPOS
NEGATIVO
OMITIR PRUEBAS DE
COMPATIBILIDAD Y
TIPIFICACIÓN ABO,
Rh
NEONATO Y LACTANTE
PEQUEÑO
TRANSFUNDIR C.E. GRUPO
O y PL DEL
GRUPO ABO DEL
NEONATO.
PRESENCIA DE Ac: DAR
C.E. CARENTE DEL AG
CORRESPONDIENTE
TECNOLOGIA
ACTUALIZADA EN B. S.
MICROPLACAS
FASE SOLIDA
Metodologías Aplicadas a
Banco de Sangre
TECNOLOGIA DE
GEL
VENTAJAS
MAYOR SENSIBILIDAD
MAYOR ESPECIFICIDAD
USO EN URGENCIAS
20´ PARA ENTREGAR
SANGRE
SOLUCION A LOS
PROBLEMAS MAS COMUNES
Interpretación de los resultados
de la detección de Acs y pruebas
de Compatibilidad
INTERPRETACION
PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD
RASTREO DE
ANTICUERPOS
COMPATIBLE
NEGATIVO
S/R INCOMPATIBLE
NEGATIVO
S/C INCOMPATIBLE
NEGATIVO
COMPATIBLE
POSITIVO
INCOMPATIBLE
POSITIVO
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
1.- Presencia de aloanticuerpo
con autotestigo negativo
La especificidad del Ac o los Acs
debe ser identificada.
Confirmar las unidades
compatibles carezcan del Ag
correspondiente. (anti-c)
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES.
Si hay presentes
mezclas de Acs.
Un Ac que reacciona
con un Ag de alta
incidencia.
( los hermanos son
la opción para
sangre compatible)
El Ac está presente en
concentraciones muy
bajas
ENVIAR LA
MUESTRA A UN
LABORATORIO
DE REFERENCIA
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS
CRUZADAS INCOMPATIBLES.
2.- Aloanticuerpo presente y control
autologo positivo.
Pacientes que han recibido sangre en los 2 o
3 meses precedentes.
Pacientes con reacción transfusional.
(Historia transfusional y Dx)
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
3.- Los autoanticuerpos frios Anti-I.
(Crioautoanticuerpos potentes)
Incubar a 37°C 30-60 minutos.
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
4.- Los autoanticuerpos calientes
Rara vez ocasionan discrepancia en las pruebas
ABO.
AAC presente en suero
Coombs Directo
Autoadsorcion en caliente
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
5.- La formación de Rouleaux
La adición de 1-3 gotas de SSI.
La aglutinación por Acs permanece
sin cambios.
RASTREO DE ANTICUERPOS
POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
6.- Problemas relacionados
con los reactivos
Los anticuerpos contra drogas
y aditivos.
CASO CLINICO 1
Paciente Guadalupe Alarcón Pérez
-
Dx. Anemia Hemolítica en estudio
Embarazos (el último) fue hace 3 años
AT= 0
2 Hermanas fallecen por LES
Grupo Sanguíneo O Positivo
CASO CLINICO 1
Paciente Guadalupe Alarcón Pérez
-
Coombs Directo PositivoTítulo 32
-
Autotestigo S/C Positivo
-
Eluído Positivo (todas las células)
-
Se cruzaron 37 Unidades de C. E. (varias unidades
dieron compatibles)
Problema
Anti-A Anti-B
4+
4+
AntiAB
Aut
o
Cel
A1
Cel
A2
Cel
B
Cel
O
Anti-D
Control
Rh
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
4+
● Que grupo sanguíneo es?
● Paciente Con 5 g/dL de Hb
● Dx Anenia Hemolítica en estudio
Prueba de compatibilidad
Unidad
Gel D
Gel R
Gel
A
Tubo
D
C. mono
Tubo
R
C. mono
Tubo
A
C. mono
103732
2+
4+
4+
+
2+
2+
103777
2+
4+
+
2+
2+
103841
2+
4+
-
2+
2+
Panel de Ac Irregulares
Técnica Cel Cel Cel Cel
1
2
3
4
Cel
5
Cel
6
Cel
7
Cel8 Cel
9
Cel
10
Auto
S/r
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
S/22°
+
-
-
-
-
-
-
+
+
-
-
S/37°
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
S/C
mono
+
+
-
2+
-
+
2+
2+
2+
-
3+
CAGH
Gel poli
2+
2+
2+
1+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
1+
3+
Panel de Ac Irregulares en
Eluido
Técnica
Cel
1
Cel
2
Cel
3
Cel
4
Cel 5 Cel 6 Cel 7 Cel8
Cel 9 Cel
10
S/r
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
S/22°
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
S/37°
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
S/C
mono
2+
2+
+
2+
2+
3+
2+
3+
2+
2+
2+
3+
2+
2+
2+
3+
4+
3+
2+
1+
CAGH
A/C
Panel de Ac Irregulares en
Eluido
Técnica
Cel
R1R1
Cel
R2R2
Cel
rr
Auto
S/r
-
-
-
-
S/22°
-
-
-
-
S/37°
-
-
-
-
S/C
mono
2+
2+
+
2+
2+
3+
2+
2+
CAGH
GEL/C
Cel
C
D
E
c
e
P
S
K
k
Jka
Jkb
Dia
1
+
+
-
-
+
+
-
-
+
-
+
+
2
-
+
+
+
-
-
+
-
+
-
+
-
3
-
-
-
+
+
+
-
-
+
+
-
-
4
+
+
-
+
+
-
+
+
+
+
-
-
5
+
+
-
-
+
+
-
-
+
-
+
-
6
+
+
+
+
+
+
+
-
+
-
+
-
7
+
-
+
+
+
+
-
-
+
-
+
-
8
-
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
-
9
-
+
+
+
-
+
+
-
+
+
+
+
10
+
+
+
+
+
+
-
-
+
+
-
-
CASO CLINICO 1
FENOTIPO R2r, S(-)
C
c
E
e
Neg.
4+
4+
3+
CASO CLINICO
PANEL DE ANTICUERPOS POSITIVO
PROBABLE ANTI-c + ANTI S
ELUIDO DE ANTICUERPOS POSITIVO
PROBABLE ANTI-SISTEMA Rh
[email protected]