GUÍA DE MANEJO PARA MICROPIPETAS MANUALES Fecha de actualización: Agosto de 2013 La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas. Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente son estériles. Existen varios tipos de puntas para los diferentes volúmenes de pipeteo. Uso de Micropipetas: 1. Esquemas 1. Botón pulsador 2. Tornillo del botón pulsador 3. Rueda dentada de graduación del volumen. 4. Cono de la pipeta. 5. Expulsor de punta. 6. Punta o “tip” descartable Figura 1. Esquema micropipeta 1 de 6 1. 2. 3. 4. 5. 6. Embolo o mando de pipeteado Control de volumen. Zona de sujeción. Display Vástago de la pipeta. Zona de acoplamiento. Figura 2. Esquema micropipeta 1. Graduación del volumen. Para graduar el volumen de la micropipeta identifique la rueda, control y/o tornillo de graduación (Figura 1 y 2): Seleccione la micropipeta y las puntas que va a utilizar teniendo en cuenta el volumen de solución a pipetear: Tipo de Micropipeta P10 P20 P100 P200 P1000 Volumen 0,5 µl - 10 µl 0,5 µl - 20 µl 10 µl -100 µl 20 µl -200 µl 100 µl -1000 µl Tipo de punta Amarillas o blancas Amarillas o blancas Amarillas Amarillas Azules o blancas Seleccione el volumen por medio de la rueda y/o tornillo de graduación, de forma firme pero suavemente de vuelta al tornillo mientras observa el cambio de la numeración del display. Teniendo cuidado de exceder los límites de la micropipeta. Ponga la punta correspondiente, presione la punta firmemente usando un movimiento de torsión ligero. 2 de 6 2. Operación del Equipo: Aspiración y dispensación a. Presione el botón superior hasta el primer tope positivo, figura 3. Figura . Figura 3 b. Sostenga la pipeta verticalmente, sumerja la punta en el líquido. La profundidad a la que la punta se sumerge en la muestra depende del modelo; en general menos de 6 mm. figura 4 Figura 4 3 de 6 c. Suelte el botón despacio y fácilmente para aspirar, figura 4 .Espere unos segundos y entonces retire la punta del líquido. Figura 4 d. Ubique la punta de la pipeta en la pared interior del vaso en un ángulo de 10 a 40 grados. Presione el botón suavemente hasta el primer tope. figura 5. Espere un segundo. Figura 5 e. Presione el botón hasta el segundo tope para expeler cualquier remanente de líquido figura 6. Mantenga el botón presionado hasta el final, remueva la pipeta por arrastre sobre la superficie del vaso. Figura 6 4 de 6 f. Libere el botón figura 7. Figura 7 g. Expulse la punta presionando el botón de eyección figura 8. Figura 8 Es necesario el cambio de la punta si el líquido es diferente al ya muestreado o si el volumen establecido es cambiado. Cuando se pipetean líquidos que tienen una viscosidad y densidad diferentes a la del agua, por ejemplo solventes orgánicos, una película de líquido se forma sobre las paredes internas de la punta. Esta película puede crear error. Desde que la película remanentes sea constante en sucesivas pipeteadas con la misma punta, este error puede ser evitado mediante la formación de la película antes de transferir la primera muestra; esto es hacer una aspiración de la muestra y dispensarla en el mismo vaso, cuando la película es formada ya todas las muestras siguientes tendrán mejor exactitud y repetibilidad. 5 de 6 Esta operación de pre-enjuague deberá ser repetida cuando el volumen a ser aspirado cambia o cuando se usa una nueva punta. 3. Recomendaciones: No pipetear volúmenes que sobrepasen la capacidad de la micropipeta. Durante el uso y manejo las micropipetas deben permanecer en forma vertical. Ubicar las pipetas en soportes adecuados o en el embalaje original sin puntas. Mantener limpias las micropipetas. Si sus micropipetas son autoclavables y son sometidas a este proceso, estas deberán ser verificadas antes de su uso. Evite autoclavar las micropipetas si esta característica no se encuentra dentro de las especificaciones. Una vez terminado el uso de la micropipeta debe limpiarse el área de acoplamiento con una servilleta para evitar contaminación. 6 de 6