QUARTA EDICIÓ DE SABADELL UNIVERSITAT DEL 4 A L 8 DE JULIOL DE 2005 Tecnologia de les llets fermentades S7. El paper de l’alimentació al llarg de la història José Antonio Mateos, doctor en farmàcia Sabadell, juliol de 2005 SABADELL UNIVERSITAT 2005 JA Mateos Leches fermentadas y yogur. Ciencia y tecnología 1. Introducción 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica 3. “Starters” o cultivos iniciadores •Características •Preparación y utilización 4. Tratamiento de la leche 5. Bioquímica de la textura 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas Historia • Citas bíblicas • Relieve sumerio en piedra año 2900 - 2400 a.c. • Elia Metchnikoff (1908) sugiere que los pueblos alimentados con leches fermentadas viven más Fuen el primero en establecer la relación tradición - ciencia Estableció las bases de la microbiología positiva GRAVADOS SUMERIOS 1. Introducción 1. Introducción E. Metchnikoff. The prolongation of life (1907) Premio Nobel de Medicina en 1908 1. Introducción Tipos de leches fermentadas (FIL) 1. Productos fermentados por microorganismos termófilos *Fermento único: Leche acidófila (Lactobacillus acidophilus) *Fermentos mixtos: -Yogur (Streptococcus thermophilus y Lactobacillus -------delbruekii subsp. bulgaricus) -Productos BAT (Bifidobacterium sp., L acidophilus y S ------thermophilus) -BIOGAIA (Streptococcus thermophilus y Lactobacillus -------reuteri) 1. Introducción Tipos de leches fermentadas (FIL) 2. Productos fermentados por microorganismos mesófilos *Fermentación láctica: -Leche acidificada o Buttermilk (Lactococcus lactis y sus subsp. y/o-Leuconostoc mesenteroides y sus subsp.) *Fermentación láctica y alcohólica: -Kéfir (gránulos de kéfir) -Koumis (Lactobacillus delbruekii subsp. Bulgaricus y ---------Kluiveromices marxianus) 1. Introducción NORMA DE CALIDAD PARA YOGUR O YOGHOURT DESTINADO AL MERCADO INTERIOR (1987, MODIFICADA EN 2002 Y 2003) Definición del producto: Se entiende por “yogur” o “yoghourt” el producto de leche coagulada obtenida por fermentación láctica mediante la acción de Lactobacillus bulgaricus y Streptococcus thermophilus a partir de leche pasterizada, ….. Los microorganismos productores de la fermentación láctica deben ser viables y estar presentes en el producto terminado en cantidad mínima de 1 por 107 colonias por gramo o mililitro. Se entiende por “yogur o yoghourt pasteurizado después de la fermentación” el producto obtenido a partir de “yogur” o “yoghourt” que, como consecuencia de la aplicación de un tratamiento por el calor posterior a la fermentación equivalente a una pasteurización, ha perdido la viabilidad de las bacterias lácticas específicas y cumple todos los requisitos establecidos para el yogur en esta norma salvo las excepciones indicadas en la misma. EL YOGUR SEGUN EL CODEX ALIMENTARIUS (FAO&OMS) Leches fermentadas y yogur. Ciencia y tecnología 1. Introducción 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica 3. “Starters” o cultivos iniciadores •Características •Preparación y utilización 4. Tratamiento de la leche 5. Bioquímica de la textura 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica Generalidades • Microorganismos unicelulares procariotas • Se encuentran en el suelo y en medios con altas concentraciones en carbohidratos, proteínas en proceso de lisis, vitaminas y poco oxígeno • En la leche, carne y vegetales • Algunas colonizan el organismo humano • Su metabolito principal es el ácido láctico • Toleran una acidez suave, de alrededor de 4, durante varias semanas • Son Gramm-positivas, anaerobias pero aerotolerantes 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica Generalidades • Según sus metabolitos finales se clasifican en: – Homofermentativas: metabolito final en un 70 - 90 % – Heterofermentativas: ácido acético, CO2, etanol y á. láctico • Según la temperatura de fermentación se clasifican en: – Mesófilas, con una temperatura de crecimiento 25 - 30 º C – Termófilas, con una temperatura de crecimeinto de 40 - 44 º C 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica Metabolismo Necesidades • Carbohidratos (lactosa, glucosa) para producir ATP • Proteínas, péptidos, aminoácidos específicos y derivados de ácidos nucleicos para síntesis proteica • Vitaminas, en particular del grupo B, como catalizadores de reacciones enzimáticas 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica Metabolismo Homofermentativos (S. thermophilus, lactobacilos, lactococos): GLICOLISIS C6 H12 O6 (glucosa) 2 C3 H6 O3 (lactato) + 2 ATP Heterofermentativos (Leuconostoc): RUTA PENTOSA FOSFATO á. Acético, etanol, CO2 + 1 ATP 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica L. bulgaricus Photograph 1: CIRDC + INRA Versailles Plate 1: Lactobacillus casei strain DN114-001 (electron micrograph) L. casei L. acidophilus S. thermophilus Bifidobacterium Bifidobacterium levaduras kefir 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica TIPOS DE FERMENTACION GENERO TIPO DE PRODUCTO FERMENTACION PRINCIPAL Streptococcus HOMO Lactato L Pediococcus HOMO Lactato L, DL HOMO HOMO HETERO (*) Lactato Lactato Lactato : Acetato L, D, DL L, D, DL L, D, DL HETERO Lactato : Acetato : CO2 L, D, DL Leuconostoc HETERO Lactato : Acetato : CO2 D Bifidobacterium HETERO Lactato : Acetato L Lactobacillus Obligatoriamente homo Facultativamente hetero Obligatorimente hetero En caso de fermentación de pentosas, Kandler 1983 ISOMERO DE LACTATO 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica FERMENTACIÓN DE LAS HEXOSAS. PRINCIPALES VIAS (Kandler 1983) GLUCOSA FRUCTOSA 1,6 -P Aldolasa FRUCTOSA 6 -P Acetil-P GLUCOSA 6 -P + Eritrosa 4-P Fosfocetolasa Triosa 3-P ADP Gluconato 6 - P Xilulosa 5-P + CO2 Acetil-P + Triosa 3-P ATP Piruvato Acetil-P ADP Piruvato + ADP Triosa 3-P Piruvato ATP Lactato Acetato 3 : 2 Lactato Bifidus pathway Glicolisis HOMOFERMENTACIÓN ATP Acetato (etanol) Lactato 6-P Gluconate pathway Vías de la fosfocetolasa HETEROFERMENTACIÓN 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica CURVA DE CRECIMIENTO Y ACIDIFICACION DE UNA BACTERIA LACTICA (1) Fase de latencia o adaptación (2) Fase logarítmica (crecimiento activo) (3) Fase máxima o estacionaria (4) Fase decreciente Leches fermentadas y yogur. Ciencia y tecnología 1. Introducción 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica 3. “Starters” o cultivos iniciadores •Características •Preparación y utilización 4. Tratamiento de la leche 5. Bioquímica de la textura 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas 3. Preparación y utilización de cultivos iniciadores o “starters”. Características STARTERS MESOFILOS (10º - 40º C ⇒ 30º C) TIPOS DE STARTERS MESÓFILOS • Streptococcus lactis, S. lactis subsp. Cremoris Lactosa ⇒ ácido láctico como metabolito mayor • Streptococcus lactis subsp. diacetylactis, Leuconosotc lactis, L. mesenteroides subsp. cremoris y dextranicum Lactosa ⇒ ácido láctico Acido cítrico ⇒ acetaldehido + diacetil + CO2 Son productoras de aromas • 3. Preparación y utilización de cultivos iniciadores o “starters”. Características STARTERS TERMOFILOS. CASO ESTUDIO: EL YOGUR SIMBIOSIS BACTERIANA 3. Preparación y utilización de cultivos iniciadores o “starters”. Características STARTERS TERMOFILOS. CASO ESTUDIO: EL YOGUR ESQUEMA DE FACTORES ESTIMULADORES DE LA SIMBIOSIS O COOPERACIÓN Streptococcus thermophilus Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus Aminoácidos + péptidos NH3 Urea de la leche Proteínas lácteas El CO2 estimula en L. bulgaricus la síntesis de a. aspártico. S. thermophilus produce CO2 por descarboxilación de la urea CO2 Acido fórmico El fórmico es precursor de nucleótidos purínicos. Estimula la síntesis de ARN para la síntesis de proteínas Calentamiento de la leche Proteolisis y tratamiento térmico son importantes para crecimiento microbiano 3. Preparación y utilización de cultivos iniciadores o “starters”. Características STARTERS de KEFIR Y KOUMIS TIPOS DE FERMENTACIONES 1. Láctica ⇒ Acido láctico 2. Alcohólica ⇒ Alcohol + CO2 3. Acética ⇒ Acido acético + CO2 3. Preparación y utilización de cultivos iniciadores o “starters”. Preparación y utilización SISTEMAS ALTERNATIVOS CULTIVOS CONCENTRADOS PARA INOCULO DIRECTO Biomasa liofilizada Biomasa congelada Dispersión en leche Descongelación Inóculo directo en leche Leches fermentadas y yogur. Ciencia y tecnología 1. Introducción 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica 3. “Starters” o cultivos iniciadores •Características •Preparación y utilización 4. Tratamiento de la leche 5. Bioquímica de la textura 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas 4. Tratamiento de la leche 4. Tratamiento de la leche 4. Tratamiento de la leche 4. Tratamiento de la leche Leches fermentadas y yogur. Ciencia y tecnología 1. Introducción 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica 3. “Starters” o cultivos iniciadores •Características •Preparación y utilización 4. Tratamiento de la leche 5. Bioquímica de la textura 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas 5. Bioquímica de la textura 1. Producción de ácido láctico durante la fermentación láctica Durante la fermentación el crecimiento bacteriano es rápido para llegar a más de 100 millones por gramo La masa bacteriana lleaga a un 1 % de la masa de leche fermentada Leches fermentadas y yogur. Ciencia y tecnología 1. Introducción 2. Bacterias lácticas y otros microorganismos. Elementos de la bioquímica de la fermentación láctica 3. “Starters” o cultivos iniciadores •Características •Preparación y utilización 4. Tratamiento de la leche 5. Bioquímica de la textura 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas FASES PRINCIPALES DE LA PRODUCCION TRADICIONAL DE YOGUR LECHE Concentración por ebullición Yogur procedente de una fabricación anterior Inóculo Fermentación a temperatura ambiente unas 12 horas YOGUR TRADICIONAL FABRICACION Paradigma de un alimento funcional Preparación del cultivo iniciador Leche + ingredientes Fermentación Enfriado Rellenado envase y mantenimiento en frio 6. Elaboración de yogur y leches fermentadas