IA-RECAA-PO-001 Procedimiento Operativo Cromatógrafo
Anuncio
LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 1 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección 1- OBJETIVO Asegurar el manejo correcto de este equipo. 2- ALCANCE Aplica para el HPLC acoplado a un sistema post columna utilizado en la determinación de Histamina. 3- RESPONSABILIDAD Y AUTORIDAD 3.1 Jefe de Sección: Supervisión de la aplicación adecuada del documento. 3.2 Analista: Aplicar lo establecido en este procedimiento 4- DEFINICIONES No Aplica 5- ABREVIATURAS Y/O SIGLAS IA: Inocuidad de Alimentos RECAA: Residuos y Contaminantes en Alimentos de Origen Acuático PO: Procedimiento Operativo BT: Bitácora RE: Registro 6- REFERENCIAS Y/O BIBLIOGRAFIA 6.1. Control de uso Cromatógrafo Liquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna. IA-RECAA-PO-001-BT-001 6.2. Manual de equipo. 7- DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO 7.1. Encender todos los módulos: bomba, desgasificador, automuestreador, detector de fluorescencia, presionando el botón ubicado en el extremo inferior izquierdo de cada módulo. 7.2. Encender la computadora y el monitor. 7.3. Abrir el software del Cromatógrafo: “Instrument 1 Online” y configurar los módulos a usar en caso de ser necesario. 7.4. Encender el pickering, presionando el botón ubicada en la parte trasera del equipo, parte inferior © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 2 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección izquierda. 7.5. Abrir la llave de purga, ubicada en la parte frontal de la bomba, girando suavemente hacia la izquierda. 7.6. Seleccionar la opción “Method” luego en el menú que se despliega seleccionar Histamina.M. Histamina.M 7.7. Pulsar en el icono de la bomba y cambiar el flujo a 5 mL, purgar por dos minutos, cada uno de los siguientes reactivos: metanol, agua, K-130 y K-600. Revisar que la bomba esté encendida. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 3 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección Dar click 7.8. Pulsar en el icono de la bomba, cambiar el flujo a 0,8 mL/ min y cerrar la llave de purga, girando suavemente hacia la derecha, hasta el tope. 7.9. Dejar correr el método por aproximadamente 30 minutos, con el fin de eliminar todo el metanol de las tuberías y evitar que este, entre en contacto con la columna. 7.10. Pulsar en el icono de la bomba, cambiar el flujo a 0,0 mL/ min. 7.11. Se conecta la precolumna junto con la columna a la tubería que viene del automuestreador y la sección final de la columna se conecta a la tubería que va al Mix Manifold. (Utilizar las llaves para socar con cuidado y chequear fugas). 7.12. Si necesita cambiar el nombre del operador: seleccionar: View, Change Acces Level y poner el nombre correspondiente. 7.13. Seleccionar cada una de las botellas, dando un click sobre cada una de ellas y digitar el volumen en cada botella. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 4 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección 7.14. Pulsar en el icono de la bomba, cambiar el flujo a 0,8 mL/ min y verificar que el reactivo seleccionado sea el K-600, con el programa establecido. 7.15. Crear una secuencia nueva, para esto seleccionar: Secuencia, en la barra principal, seleccionar en el menú que se despliega: Nueva secuencia, luego seleccionar Tabla de secuencia, ingresar los datos de la siguiente manera: en la columna VIAL digitar la posición da cada estándar o muestra en la bandeja del automuestreador (únicamente el número), en la columna de NOMBRE DE MUESTRA identificar cada muestra y en el nombre de método seleccionar Histamina, en la columna INJ/VIAL digitar 1 para todas las muestras, la ultima línea debe tener el K-130 y el método de Regeneración. Seleccionar Ok. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 5 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección 7.16. Seleccionar en la opción Secuencia, parámetros de secuencia y seleccionar en Path: C:/Chem32/1/DATA, y digitar en el subdirectorio la fecha en el siguiente orden: H, día, mes, año. Si se corre más de una secuencia en el día, seguido de la fecha se numera en forma consecutiva. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 6 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección 7.17. En el cuadro Shutdown, dar un check en la opcion Post-Sequence Command/Macro, luego seleccionar en el menú: Macro SHUTDOWN.MAC, go. Seleccionar Prefix/Counter. Luego seleccionar Ok. 7.18. En “SECUENCIA” se selecciona la opción “SALVAR SECUENCIA COMO”, se guarda con el mismo nombre de la corrida H dd MM AA y se da OK 7.19. Encender el detector desde ícono del detector en el software. 7.20. Abrir el software del pickering Pinaccle PCX. 7.21. Se selecciona Control, Refill, una vez lleno el reactor, seleccionar homogenizar la bomba con el OPA, Empty, lo cual permitirá © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 7 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección Control 7.22. Se selecciona secuencia. Sequence 7.23. Se crea la secuencia, para esto, seleccionar “Edit/Delet”, luego “Create Sequence”, se nombra de la siguiente manera: día, mes, año; se selecciona el método Histamina, se digita el número de corridas y se guarda. Se carga la secuencia creada anteriormente en “Load”. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 8 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección 7.24. Seleccionar Control, Enable, esperar para alcanzar las temperaturas de trabajo (40ºC la columna y 45 ºC el reactor) 7.25. Seleccionar Refill. 7.26. En secuencia, seleccionar iniciar secuencia en el software del Pickering. 7.27. Seleccionar iniciar secuencia en el software del HPLC. 7.28. Una vez finalizada la secuencia, correr por 20 minutos K-130 con flujo de 0,8 mL/min, para terminar de regenerar la columna pulsando en el icono de la bomba: 7.29. Pulsar en el icono de la bomba, cambiar el flujo a 0,0 mL/ min. 7.30. Se desconecta la precolumna junto con la columna y se le colocan los tapones. 7.31. Colocar el conector. (Utilizar las llaves para socar con cuidado y chequear fugas). 7.32. Pulsar en el icono de la bomba y correr agua por 2 horas a un flujo de 0,7 mL/min 7.33. Pulsar en el icono de la bomba y correr (agua: metanol 80:20) por 40 minutos. 7.34. Desechar los residuos de OPA, en el recipiente correspondiente, lavar el reservorio y dejar con (agua: metanol 80:20), cerrar y abrir el software del reactor post columna. 7.35. Seleccionar en el software del Reactor Post Columna: Control, Refill, Empty, lo cual permitirá limpiar la bomba. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 9 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección Control 7.36. Seleccionar en el software del Reactor Post Columna: Control, Flush. La mezcla (agua: metanol 80:20) del reservorio del Wash se debe cambiar cada mes. 7.37. Cerrar todas las ventanas del software del reactor post columna. 7.38. Apagar el Reactor Post Columna. 7.39. Para realizar el análisis de datos seleccionar en el menú principal Data Analisis, ya sea en el software online o bien en el offline 7.40. Seleccionar File, Load Signal, Folders, C:/Chem32/1/DATA, el nombre con que se guardo la secuencia y luego dar doble click en el DEL-LC. 7.41. Cargar el cromatograma del primer nivel de la curva, seleccionar en calibración: nueva Tabla de © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 07-07-10 Procedimiento Operativo Cromatógrafo Líquido LC1200 acoplado a Reactor Post-Columna Versión 03 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Analista de Laboratorio Código: IA-RECAA-PO-001 Página - 10 - de 10 Aprobado por: Jefe de Sección Calibración y digitar la concentración del primer nivel de la curva, dar clic en Ok. 7.42. Cargar el cromatograma del nivel correspondiente, en calibración seleccionar Add Level, digitar la concentración y dar Ok, repetir este paso con cada punto de la curva. En la tabla de calibración digitar Histamina como nombre del compuesto. 7.43. Imprimir la tabla y la curva, para esto seleccionar File, Print y seleccionar Calib Table + Curves. 7.44. Cargar el cromatograma del blanco, seleccionar Print, Report, Ok, en la pantalla aparecerá el reporte, seleccionar Print. Repetir este paso con la referencia los controles y las muestras. 7.45. Guardar la secuencia dando clic en el icono 7.46 Una vez finalizado el análisis se utiliza la bitácora del equipo IA-RECAA-PO-001-BT-001 para anotar el uso y cualquier observación sobre el funcionamiento del mismo. 7.47. Apagar cada modulo del LC1200 8- ANEXOS No Aplica © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada