Solicitud de servicios

Solicitud de Servicio de secuenciación de ADN.
POR FAVOR, VER RECOMENDACIONES EN LA PAGINA SIGUIENTE. GRACIAS.
INSTITUCION SOLICITANTE
Institución: ______________
Departamento: ________________
Nombre del investigador: ______________________________
Fax: _______________________
Formato en que desea los resultados:
Forma de Pago:
Nombre de la
Muestra
Correo electrónico: ____________________________________________
 Correo electrónico
 Fondo Externo:
# Proyecto: _______________________
Tipo de ADN
templado
Teléfono: ______________
Método de
Purificación
Tamaño del
ADN templado
 Fondo IVIC
# Partida: _______________________
Nombre del
Primer
Temperatura de
Annealing del
primer
(Optimizada
para PCR)
Área de
Investigación
LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS DEPENDERA DE LA PUREZA DE LA MUESTRA Y DE LA
EXACTITUD EN SU CUANTIFICACION.
SOLO PARA USO DEL LABORATORIO (CeSAAN)
Fecha Cuantificación: ____________
Fecha de reacción PCR: ________________
Fecha recepción muestra: __________________
Fecha de corrida: ________________
Fecha entrega de resultados: ___________________
RECOMENDACIONES PARA EL USO DEL SERVICIO
1. Llene todos los datos que se solicitan.
2. Entregar solamente la primera página junto con las muestras y anexe una fotografía (o fotocopia)
de la electroforesis (Obligatorio) en gel de agarosa del ADN a secuenciar.
3. Necesitamos que envíe el volumen de muestra indicado en la Tabla 1 y el o los “primer”(s) por
separado a una concentración de 5 pmol / l.
4. Las muestras pueden entregarse hidratadas (SOLAMENTE en agua bidestilada esterilizada. No
utilizar Tris-EDTA. Los materiales biológicos hidratados deben llegar al laboratorio en
condiciones de almacenamiento adecuadas (máximo 4oC ).
5. Las muestras no deben purificarse por métodos que utilicen extracción fenólica.
6. En la planilla de solicitud del servicio cada columna significa:






Nombre de la muestra: el nombre con que el usuario identifica su muestra.
Tipo del ADN templado : si el ADN es un producto de PCR, plásmido, M13, cósmido, cromosoma
artificial de levadura, ADN genómico de bacteria, ect.
Método de Purificación : método que se utilizó para purificar las muestras, por ejemplo Wizard
(Promega), Concert GIBCO), QIAGEN o Centricon.
Tamaño del ADN templado : tamaño del fragmento de PCR o del segmento clonado en vectores.
Nombre del Primer: nombre del primer que se está enviando junto con la muestra.
Temperatura
de Annealing del “primer” (Optimizada
para PCR) : la temperatura del
“primer” que se está enviando junto con la muestra. Se recomienda colocar la temperatura de
annealing que se haya utilizado en PCR.
7. Las condiciones necesarias para la secuenciación son las siguientes:
- El éxito de la secuencia dependerá de la calidad del ADN.
- La cantidad de adn necesaria para la secuenciación es de
5l, si la muestra esta bien concentrada, 10l – 15l si esta medianamente
concentrada y 20l si la concentración del mismo es baja.
- Las cantidades de ADN que se exigen de acuerdo con el tipo y la extensión
del templado son las siguientes:
Templado
Cantidad Optima de primer
(pmoles)
Cantidad Total de ADN
(ng)
5
5
5
5
5
1-3
3 - 10
5 - 20
10 - 40
20 - 50
Cantidad Optima de primer
(pmoles)
Cantidad Total de ADN
(ng)
5
25 - 50
Templado
Cantidad Optima de primer
(pmoles)
Cantidad Total de ADN
(ng)
Plásmidos.
5
150 – 500
Templado
Cantidad Optima de primer
(pmoles)
Cantidad Total de ADN
(ng)
Cósmidos, BACs, YACs
10
0.5 – 1.0
ADN
Genómico
Bacterias
10
2-3
Producto de PCR:
100 – 200 pb
200 – 500 pb
500 – 1000 pb
1000 – 2000 pb
> 2000 pb
Templado
Simple Cadena
de