- Teórico Práctico 1 - CATEDRA DE GENETICA Y MEJORAMIENTO VEGETAL Y ANIMAL FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE ENTRE RIOS UNIDAD TEMÁTICA N°1: GENÉTICA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA. GUIA TRABAJO PRACTICO N° 1: Temario : Ciclo celular. División celular. Propiedades físico-químicas del material hereditario. Cambios en la estructura de los cromosomas: adición o deleción de segmentos y reorganización de la secuencia lineal. Replicación de los ácidos nucleicos. Código Genético. Transcripción. Traducción. Base molecular de la mutación. Recombinación general: modelos. Diferenciación celular y regulación génica en eucariontes. Objetivos del trabajo práctico: comprender los fenómenos genéticos basados en procesos moleculares complejos. Problemas teórico-prácticos: se resolverán en forma grupal con consulta bibliográfica y de apuntes. Bibliografía: Alberts, B ; Bray, D ; Lewis, J ; Raff, M ; Roberts, K ; Watson, J. 1992. Biología Molecular de la Célula. Ed. Omega. Curtis, H ; Sue Barnes, N.. 2000. Biología. 6ª Edición. Ed. Médica Panamericana. Lacadena, J.R.. 1988. Genética. Ed. Agesa. Strickberger, M.W.. 1988. Genética. Ed. Omega. Suzuki, D. T.; Griffiths, A.J.F.; Miller, J.H.; Lewontin, R.C.. 1994. Genética. Ed. Interamericana. Griffiths, A.J.F.; Miller, J.H.; Suzuki, D. T.; Lewontin, R.C.; Gelbart, W. M.. 1998. Genética. Quinta Edición. Ed. McGraw-Hill – Interamericana. Lodish, H.; Berk, A.; Zipursky, S.L.; Matsudaria, P. Baltimore, D; Darnell, J.. 2002. Biología Celular y Molecular. Ed. Médica Panamericana. PROBLEMAS A resolver en clase: 9-10-13-16-22-23. 1- Los cromosomas se replican: a) durante la intercinesis, b) durante la fase S de la interfase, c) sólo una vez durante todo el proceso, d) a y b, e) b y c. 2- La unidad básica estructural del cromosoma es: a) el centrómero, b) el nucleosoma, c)el telómero, d) todas las pociones anteriores, e) ninguna de las opciones anteriores. Genética y Mejoramiento Vegetal y Animal 1 - Teórico Práctico 1 - 3- Entre las propiedades del ADN se encuentra su capacidad de desnaturalizarse y renaturalizarse en determinadas condiciones: a) Averigüe cuales son las condiciones en las cuales el ADN se desnaturaliza y renaturaliza. b) ¿Qué técnica se desarrolló a partir de esta propiedad?. Mencione al menos dos aplicaciones de esta técnica. 4- Los dos juegos de cromosomas presentes en las células de los organismos diploides se deben a: a) la duplicación de una célula haploide, b) el aporte de un juego haploide por cada progenitor, c) un proceso de reducción dentro de una célula tetraploide, d) todas las opciones anteriores, e) ninguna de las opciones anteriores. 5- La duplicación del ADN, anterior a la mitosis y la meiosis, ocurre en la misma fase. a) verdadero b) falso. 6- El entrecruzamiento va acompañado por el rompimiento de los cromosomas. a) verdadero b) falso. 7- La replicación es mucho más lenta en los eucariotas (40 a 50 pares de bases por segundo) que en los procariotas ( 500 pares de bases por segundo); sin embargo, el genoma eucariótico es mucho más complejo. Según su opinión y en base a sus conocimientos, ¿qué mecanismo habrá surgido evolutivamente en los eucariotas que compense esa lentitud de replicación?. 8- Investigue de qué manera producen mutaciones los mutágenos químicos y las radiaciones ionizantes. 9- A través de un gráfico muestre la variación de la cantidad de ADN a lo largo del ciclo celular cuando la división que ocurre es una mitosis y también para el caso de una división meiótica. Considere dos casos: a) la célula que cumple el ciclo es diploide, b) la célula que cumple el ciclo es haploide. 10- El peso molecular del ADN (doble hélice) de un cromosoma bacteriano es 3 x 10 9 , cada par nucleotídico tiene un peso de 660 y la distancia entre bases adyacentes es 3,4 Å. ¿Cuál es el largo de ésta molécula de ADN ?. 11- En algunos casos, la mutación de un gen particular se manifiesta como la pérdida de actividad de una enzima específica. ¿Esto significa que la enzima ya no es producida?. Explique. 12- ¿Cuáles son las diferencias que existen entre el transcripto primario y el ARN mensajero?. 13- La secuencia de bases del ADN con sentido que codifica para un ARNm de interés se muestra a continuación: Genética y Mejoramiento Vegetal y Animal 2 - Teórico Práctico 1 - 3`.......... TACTAACTTAGCCTCGCATCA ...........5` a) ¿Qué aminoácidos son codificados por esta secuencia?. b) Una adenina se inserta en la cadena después de la primera guanina de la izquierda. El polipéptido resultante tiene seis aminoácidos de longitud. ¿Dónde está localizado el nuevo codón sin sentido y cuál es la secuencia de aminoácidos del fragmento?. 14- Cite al menos tres diferencias existentes en la transcripción de eucariotas y procariotas. Explique brevemente. 15- Cuando segmentos de eucromatina están próximos o dentro de heterocromatina, se heterocromatinizan y viceversa. Explique cómo pueden ocurrir estos cambios y los efectos que podrían tener en la acción del gen. 16- Explique y esquematice la constitución cromosómica de: a) un autohexaploide con x = 5 b) un pentasómico para el par cromosómico III en un genotipo normalmente diploide y con ocho pares de cromosomas. 17- Se está estudiando un gen de Escherichia coli que codifica para una proteína de interés. Parte de su secuencia es: - Ala – Pro – Trp – Ser – Glu – Lys – Cys – His – Se obtienen una serie de mutantes que carecen de la actividad enzimática correspondiente. Al aislar las proteínas mutantes, encuentran las secuencias siguientes: Mutante 1: Ala – Pro – Trp – Arg – Glu – Lys – Cys – His – Mutante 2: Ala – Pro – Mutante 3: Ala – Pro – Gly – Val – Lys – Asn – Cys – His – Mutante 4: Ala – Pro – Trp – Phe – Phe – Thr – Cys – His – Determine : a)¿Cuál es la base molecular de cada mutación? b)¿Cuál es la secuencia de ADN que determina esta parte de la proteína?. 18- ¿En qué lugar de la célula se produce la síntesis de los tres tipos de ARN?, explique brevemente. 19- Indique las estructuras y principales características físico químicas de los tres tipos de ARN. Esquematice cada caso. 20- Busque al menos tres ejemplos de poliploides que considere de importancia agronómica. Describa brevemente su constitución cromosómica y sus propiedades. Genética y Mejoramiento Vegetal y Animal 3 - Teórico Práctico 1 - 21- En una disputa de paternidad, dos hombres dicen ser el padre de un niño. Para resolver el caso, los investigadores forenses utilizan la huella del ADN. Los datos de mayor relevancia aparecen en la figura a continuación donde M es la huella de la madre, C la del niño y 1 y 2 son los posibles padres. a) Verifique si es posible, con este análisis, discernir cual es el padre. Explique su respuesta. b) Si el niño presenta alguna banda que no presentan sus padres, ¿cuál podría ser la explicación?. 22- La inserción de un nucleótido en el ADN seguida de la deleción de otro 20 pb más adelante provoca un cambio en la secuencia de la proteína de a - His - Thr - Glu - Asp - Trp - Leu - His - Gln - Asp - His - Asp – Arg – Gly - Leu - Ala - Thr - Ser - Asp – a) ¿Qué nucleótido se ha añadido y cuál se ha quitado?. b) ¿ Cuales son las secuencias de ARNm original y del nuevo ARNm? Genética y Mejoramiento Vegetal y Animal 4 - Teórico Práctico 1 - Código Genético Segunda letra U UUU U UUC UUA Primera letra A UCU UAU UCC UAC Serina Tirosina UGU UGC Cisteína U C UGA Terminación A UCG UAG Terminación UGG Triptofano G CUU CCU CAU CUC CCC CAC CUA Leucina Leucina UCA G Terminación CCA Prolina CAA CUG CCG CAG AUU ACU AAU AUC Isoleucina AUA AUG G A UAA UUG C Fenilalanina C ACC ACA Formilmet. Metionina Treonina AAC AAA Histidina Glutamina Asparagina Lisina CGU U CGC C CGA Arginina CGG AGU AGC AGA A G Serina Arginina U C A ACG AAG AGG G GUU GCU GAU GGU U GUC GCC GAC GGC C GUA GUG Valina GCA GCG Alanina GAA GAG Ac. Aspártico Ac. Glutámico Genética y Mejoramiento Vegetal y Animal GGA GGG Glicina A G 5