presentacion de espectro 2013

CONTROL DE LA MASTITIS SUBCLÍNICA
Las células de la glándula mamaria en vacas con diferentes estadios de secreción.
En la glándula mamaria de la vaca, existen varios tipos celulares en la secreción láctea:
los leucocitos polimorfonucleares (lpn), las células mononucleares entre las que
destacan los macrófagos (mac) y los linfocitos (linf), y las células epiteliales que
descaman de los acinos glandulares. El número y proporciones de estas células varía en
relación a los diferentes estadios de la lactancia, del período de no lactancia, mejor
conocido como período seco. Por razones obvias, estos tipos celulares se incrementan
durante la lactancia por la presencia de factores inflamatorios físicos, químicos o
infecciosos.
Para el productor de bovinos de leche el conjunto de células es conocido como “células
somáticas “. Esta terminología proviene de las células que componen el cuerpo para
diferenciarlas de las germinales que derivan de los ovarios y testículos como ovocitos y
espermatozoides respectivamente. Las células somáticas de la inflamación de la
glándula mamaria derivan principalmente de la sangre y del tejido linfoide. Este
conjunto de células tienen la función especializada de reconocimiento, fagocitosis
(ingestión y degradación en el citoplasma celular) y eliminación de todo aquello que el
organismo reconoce como extraño.
De acuerdo con lo establecido años atrás, el período de lactancia se divide en dos;
1.-El período de lactancia que se inicia inmediatamente terminado el calostro hasta el
momento del secado (Smith 1982).
Durante el período de lactancia en condiciones fisiológicas, el número promedio de
células somáticas es de 200.000.00 por mililitro. Entre ellas, el 12 % corresponden
a lpn, el 60 % a mac y el 28 % a linf. En la glándula mamaria sin otros elementos de
atracción de células inflamatorias, (somáticas) la presencia de células especializadas en
fagocitosis como los polimorfonucleares neutrófilos y los macrófagos, encuentra su
explicación fisiológica en los siguientes argumentos;
a) las células epiteliales de los acinos glandulares producen gránulos de caseína y
lípidos, componentes proteicos y grasos de la leche respectivamente. Estos elementos
per se son productos estimulantes de la confluencia de lpn por quimiotaxis en las luces
de los acinos glandulares. Los lpn en los acinos glandulares, se encuentran
continuamente fagocitando caseína y grasa y se especula que su capacidad de
fagocitosis contra agentes bacterianos se encuentra en decrecimiento por el desgaste o
actividad fagocítica de estos elementos constitutivos de la leche en formación.
b) Como toda célula del organismo el recambio de nuevos elementos celulares obedece
al código genético pre establecido en el ADN en relación al tiempo de viabilidad
celular. De algunas células se conoce su tiempo de permanencia entre los tejidos pero
todas son reguladas por el mecanismo de muerte celular programada (apoptosis).
En los acinos glandulares de una vaca en etapa de lactancia es posible observar los
signos morfológicos de apoptosis, como la condensación de la cromatina nuclear y
fragmentación de la misma. La célula muerta se reduce a fragmentos que tienden a ser
eliminados hacia las luces glandulares donde por su tamaño son reclutadas las células
con capacidad fagocítica como los macrófagos lo que explica la presencia “fisiológica
de estos elementos celulares de la inflamación.
En el período tardío de lactancia se modifica el porcentaje de 200.000.00 a
600.000.00 células somáticas por mililitro entre las cuales, 40 % son lpn, 30 % mac
y 30 % linf. (Blackburn 1966, Shulz 1977, Lee 1980, Paape 1981, Concha 1986).
Es importante tomar en consideración las variaciones fisiológicas entre los períodos de
lactancia, particularmente para no mal interpretar la existencia de factores inflamatorios
específicos o inespecíficos inductores de aumento en el conteo individual de las células
somáticas.
2.-El período de secado terminado con el calostro. (Smith 1982).
Durante el período seco se reconoce “el temprano” con activa involución de la glándula
y con duración de aproximadamente 28 días.
La concentración de células durante los primeros siete días del secado se
incrementa notablemente encontrando hasta 1.800.000.00 células por mililitro
disminuyendo progresivamente hasta presentar 250.000.00 células /m l.
El período de calostro se inicia 15 días antes del parto y finaliza tres días después. El
conteo celular en el período calostral post parto es entre 10.000 a 280.000 células /ml.
RELACION ENTRE EL CONTEO DE CELULAS SOMATICAS Y LAS
INFECCIONES EN LA UBRE.
Los programas de control de células somáticas en tanque de enfriamiento son hoy en día
bien aceptados por los productores de leche y promocionados por las instituciones de
comercialización de los productores. Este binomio productor y comercializador da por
sentado que es conveniente establecer los límites inferiores y superiores sobre el conteo
de células somáticas en tanque. Las razones son varias y destacan para los productores
la relación entre el mencionado conteo celular y el posible número de vacas con
potencial infección. Para los comercializadores el colocar excelente calidad de leche en
sus mercados. Muchos investigadores y médicos veterinarios concuerdan en que es
NORMAL encontrar conteos en tanque en rangos de 200.000.00 células /ml. Dos
estudios realizados en las universidades de Cornell y Pensilvania en USA, relacionan el
conteo de células somáticas en tanque con el número de vacas infectadas.
Con porcentajes de 100.000 a 199.000 son 15 % las vacas enfermas, entre 200.000 a
299.000 son 32 %, de 300.000 a 399.000 son 42 %, de 400.000 a 499.000 son 55 % ,
de 500.000 a 599.000 son 58 % .
El desafío constante a la glándula mamaria por bacterias coliformes en donde
predomina la E coli. Las bacterias de ambientales residentes en la piel del pezón y en las
manos del operador del equipo y en el propio equipo, establecen que en conjunto, la
leche aún diluida en el tanque de enfriamiento, manifieste esas proporciones de células
somáticas.
Las mastitis sub- clínicas pasan desapercibidas porque no manifiestan los signos de una
mastitis aguda, sin embargo son las responsables de las proporciones de células
somáticas que se encuentran en la leche en el tanque, asumiendo que la leche de vacas
con mastitis clínica ha sido descartada. La mastitis sub-clínica por coliformes y
ambientales, se ha manejado con las medidas de limpieza y recambio de las camas en
los hechaderos, el uso de pre-selladores que desinfectan los pezones antes de la ordeña y
el de selladores después de la misma. La vacunación contra E. coli Staphyococcus
aureus, Streptococcus agalactiae, durante el período del secado contribuye también
como medida preventiva al incrementar la eficiencia de la fagocitosis de bacterias
oportunistas en las luces glandulares.
HASTA DONDE ES PRUDENTE REDUCIR EL SISTEMA DE DEFENSA DE
LA GLANDULA MAMARIA ¿
Conforme con los hallazgos de concentraciones de células somáticas en bovinos sanos
en donde el promedio es de 200.000.00 cel/ml, parecería lógico el hecho de que este
porcentaje ha sido definido por la naturaleza a fin de proteger a la glándula contra las
posibles invasiones bacterianas. Sin embargo existen datos sobre que la relación 200 a
300 mil cel /ml establecen una mejor línea de contra-ataque en caso de iniciarse una
infección.
Así mismo hay datos en los cuales al inmunosuprimir las defensas de la glándula
mamaria, esta es más susceptible a las infecciones. El punto tiene lógica ya que de
existir en el sitio los recursos celulares cuando se inicia una infección, ésta por razones
obvias puede ser contra- restada con mayor eficiencia.
Es conveniente no confundir entre los porcentajes individuales con los de tanque, ya
que ambos son del mismo numeral. En el último se están midiendo las concentraciones
porcentuales de la leche diluida y que tiene como propósito el identificar los posibles
casos con mastitis clínica o sub-clínica. Si las compañías comercializadoras premian a
los ganaderos socios con mejores precios por su leche con bajas cuentas celulares, debe
de tomarse por los ganaderos como el conjunto de esfuerzos para producir con mayor
eficiencia e higiene.
NIVELES DE MINERALES EN SANGRE ARTERIAL Y VENOSA EN VACAS
Los niveles de calcio, fósforo, magnesio, potasio y sodio son mayores en la sangre
arterial que en la venosa y se mantienen en valores dentro de normalidad tres meses
después del parto. La ligera reducción de los minerales en la sangre venosa, sugieren el
consumo y transporte de estos minerales durante la producción de la leche. También la
concentración de estos minerales es mayor en las vacas con menor producción de leche
comparadas con las altas productivas (Gabris J, Bajan L 1983). No hay diferencias
significativas en los valores de los minerales de sangre venosa y arterial antes o después
de la lactación en vacas en su mayor pico de producción, sin embargo los niveles de
fósforo están ligeramente aumentados. Existe relación positiva entre niveles de fósforo
magnesio y calcio y el contenido de grasa en vacas de alta producción y relación
negativa de magnesio en las bajas productoras.( Gabris J, Bajan L 1983 b). Las
concentraciones de sodio y magnesio, son significativamente mayores en las vacas con
menor producción comparadas con las vacas altas productoras en las muestras diarias
obtenidas durante la lactancia. Así mismo en las vacas con menor producción, el
contenido de grasa es significativamente mayor que en las altas productoras y tienen
mayor concentración de magnesio, calcio y potasio. Estos datos sugieren la
participación de los minerales en el metabolismo de los rumiantes productores de leche
y el contenido de grasa en la misma (Gabris J, Bajan L 1983 c).
De la información arriba señalada se pude deducir que las concentraciones de minerales
y la interpretación en la conductividad eléctrica son individuales para cada vaca y
dependiente de su estado nutricional, en particular en la aportación de minerales. Estos
factores deberán ser tomados en cuenta en la interpretación de la lectura de
conductividad de cada cuarto y en forma individual cuando la conductividad en alguno
de ellos se determine bajos valores de conductividad y sean sugerentes de cambios
tempranos por inflamación en la ubre.
CAMBIOS TEMPRANOS EN LA COMPOSICIÓN DE LA LECHE EN LA
MASTITIS SUBCLINICA
En la mastitis subclínica se incrementa la conductividad de la leche, cuyo origen está
dado por el incremento en la concentración del sodio y de cloro en la leche. La
excreción del sodio por las células columnares de revestimiento del epitelio de los
acinos glandulares modifica el fino balance de la bomba de sodio y potasio sacando mas
sodio y aceptando potasio, por lo que la concentración del potasio, el mineral de más
alta concentración en la leche, disminuye. Estos cambios en la fisiología celular son
originados por las señales recibidas en la membrana celular de las células acinares por el
estímulo negativo de las toxinas bacterianas. Dado que la mayoría del calcio esta
asociado con la caseína, la destrucción de esta proteína significa que el nivel del calcio
en la leche también disminuye.
Se estudiaron los macrominerales; sodio, potasio, calcio, magnesio y fósforo en la leche
de vacas Friesian en condiciones de producción normal y otras con mastitis subclínica.
La leche de las vacas infectadas y con mastitis subclínica reveló un decremento
significativo en potasio (P < 0.001) así como incremento significativo en sodio y
fósforo (P < 0.01). La comparación entre la leche de vacas sanas con la leche de vacas
con mastitis sub clínica reveló alto incremento significativo en sodio (P < 0.001) y
decremento en potasio (P < 0.05) comparado con la leche de vaca sanas (El Zubeir IE,
ElOwni OA, Mohamed GE 2005.
Las concentraciones de proteínas de la leche con signos inflamatorios tempranos
cambian por modificaciones secretoras de las células de los acinos glandulares,
productores de la secreción láctea. El nivel de la caseína disminuye, (la proteína de
mayor calidad nutricional para humanos), a cambio del incremento en el nivel de otras
proteínas como suero albúmina, lactoferrina, inmunoglobulinas, que afectan en forma
negativa la calidad de productos lácteos como; la cantidad de queso producida, su sabor,
y su calidad. La albúmina de suero, inmunoglobulina, transferrina, y otras proteínas del
origen sanguíneo aumentan su concentración en la leche debida a que la permeabilidad
del endotelio vascular del tejido mamario se encuentra aumentada. La lactoferrina, la
mayor proteína de ligamiento de hierro en secreciones mamarias, incrementa su
concentración. Probablemente porque su producción en el tejido mamario es mayor. La
destrucción de ciertas proteínas comúnmente encontradas en la leche también ocurre en
vacas infectadas con mastitis subclínica debido a la presencia de substancias que las
degradan. La actividad del plasminógeno incrementa substancialmente durante un
episodio de mastitis. El plasminógeno y otras enzimas producidas por las células
inflamatorias dan origen a la destrucción completa de la caseína en la ubre. El deterioro
de las proteínas en la leche mastítica puede continuar durante el proceso y
almacenamiento del producto.
EQUIPO PORTATIL DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD ELECTRICA DE
LECHE PARA VACAS
VENTAJAS

 Permite la rápida y fácil detección de mastitis subclínica en rebaños grandes
estabulados o en pastoreo.
 Tiene una influencia positiva en la disciplina para el manejo de la finca.
 Mejora la actividad económica de la finca.
INTRODUCCIÓN
No obstante contar con las adecuadas instalaciones y el ganado calificado bajo un
régimen de alimentación controlado, entre los problemas de importancia en la
producción de leche, es el de la inflamación de la glándula mamaria que conduce a
mastitis sub aguda o sub clínica.
El estado subclínico de la mastitis, es particularmente importante de controlar dado que
las pérdidas en la producción son constantes. En este estado preliminar de lo que será un
caso de mastitis, la leche es aparentemente normal, y la ubre infectada en forma
reciente, parece saludable a simple vista. Se ha determinado que el desarrollo de
mastitis subclínica esta acompañada en incremento en el nivel de Sodio en la leche, la
cual está relacionada con baja en su resistencia eléctrica. Desde que este fenómeno se
descubrió, los métodos para detectar la mastitis a través de medir la resistencia eléctrica
ganaron mucho terreno y tienen importancia en la practica.
Detector de Mastitis Subclínica
La interdependencia entre la resistencia eléctrica de la leche y el estado de salud de la
ubre, la Firma Draminski la ha tomado como la base para la construcción de un detector
de mastitis subclínica en las vacas. Este instrumento ha soportado numerosas y
extensivas pruebas bajo la dirección de los profesores: T. Glazer y Janowski del
Departamento de Obstetricia de la Facultad de Medicina Veterinaria de La Universidad
de Agricultura y Tecnología en Olsztyn, Polonia.
La forma funcional del instrumento permite el fácil manejo por una sola persona y
ningún tipo de ayuda se requiere para tomar las medidas.
DATOS TÉCNICOS
Peso total
Poder
Poder de consumo
Pantalla
Unidad mas pequeña
Rango de medidas
Temperatura de trabajo
Humedad máxima
aprox. 0,3 KG.
una pila de 9V, tipo 6F22
aprox. 12mA
LCD, 3,5 dígitos
10 unidades
0 - 1990 unidades
0 - 50 C
85%
CONTENIDO
1. El Detector de Mastitis Subclínica junto con la pila.
2. El estuche.
3. Manual de Instrucciones y garantía.
CONSTRUCCIÓN
DETECTOR DE MASTITIS SUBCLINICA
El detector electrónico consiste de una copita para medir, unidad electrónica y un
mango con el interruptor. Dentro del mango hay una pila de 9V, 6F22. La unidad
electrónica esta equipada en la pantalla LCD en la cual se reflejan los resultados.
Dentro y en el fondo de la copita de medida hay dos electrodos de metal para medir la
resistencia eléctrica en la leche. Todo el instrumento es a prueba de agua, lo cual facilita
su lavado y el fácil mantenimiento de higiene.
El detector de mastitis subclínica ha sido construido usando circuitos electrónicos
provenientes de los países europeos mas avanzados en la tecnología, los cuales son de
una amplia escala de integración y son caracterizados por el alto grado de confiabilidad.
El detector esta hecho de polipropileno, resistente a las condiciones atmosféricas y a la
mayoría de las sustancias químicas, permitiendo así el fácil mantenimiento de higiene.
FUNCIONAMIENTO
Cuando se prueba el aparato sin leche hay un periodo de 1,5-2 segundos para que se
estabilice después de encendido. Después de este tiempo aparecen en la pantalla los
números “1
0”. El numero 1 significa que entre los electrodos hay mucha mas
resistencia que en la pantalla lo que indica que esta desbordada, mientras que el numero
0 indica que no se ha hecho ninguna medida.
Después de llenar la copita de medida con leche, se aprieta el botón de encendido del
detector. Después de 1,5-2 segundos, que son necesarios para la estabilización arriba
mencionada, el resultado se puede leer.
Una función adicional que puede leerse en la pantalla es la indicación de falla en la pila.
Cuando la carga en la batería baja a cierto nivel, las palabras LO BAT empiezan a titilar
en la pantalla, indicando que se esta acercando la necesidad de cambiar la pila. Una
nueva pila se necesita cuando la señal es constante.
Desde los parámetros técnicos que se dieron anteriormente, se puede ver que la unidad
mas baja es la 10, mientras que el rango de medida va desde 0 a 1990 unidades.
Cuando esta escala se excede los números “1 0”aparecen en la pantalla, señalando
desbordamiento (como en el caso cuando el instrumento se prueba en contacto con la
atmósfera).
Este rango de medida para el detector de mastitis subclínica es muchas veces mayor que
el de la leche a probar, en la práctica esta escala nunca se desbordará.
MEDICIONES
Antes de empezar mediciones es necesario:
1. Verificar el funcionamiento electrónico del detector de mastitis subclínica en
contacto con la atmósfera, asegurándose que no es necesario cambiar la pila.
2. Asegurarse que los electrodos dentro de la copita de medida están limpios y libres de
grasa ya que esto podría resultar en lecturas erróneas.
3. Si es necesario, limpiar los electrodos con algodón remojado en alcohol.
4. Preparar el balde, o aun mejor dos baldes con agua, poniendo un poco de detergente
suave dentro del primero (o un agente de desgrase).
5. En lugar del balde o baldes mencionados en el paso No 4, se puede usar una estopa o
trapo de algodón o lana y un recipiente lleno con agua caliente en el cual se puede
agregar una pequeña cantidad de solvente de grasa por ejemplo alcohol.
El MODO DE HACER MEDICIONES:
1. Sostener el detector de mastitis subclínica debajo de la teta y exprimir el primer
chorro de leche dentro de la copita de medida.
2. Retirar el instrumento de la ubre para poder leer de una manera clara el resultado.
3. Apretar el botón de encendido del detector.
4. Después de la estabilización inicial que dura aproximadamente de 1,5 a 2 seg., la
resistencia eléctrica de la leche se registra en la pantalla.
5. Desapretar el botón de encendido y botar la leche. No olvidar anotar el resultado.
6. Sosteniendo el detector de mastitis subclínica por el mango, sumergir la copita de
medida en el balde, baldes o recipiente con agua caliente para quitar los residuos de
leche.
7. La copita de medida (en particular los electrodos), se pueden limpiar con tapones de
algodón en vez de remojarlos en agua caliente.
8. Repetir este procedimiento para cada una de las tetas.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
UN RESULTADO POR DEBAJO DE 250 UNIDADES
Indica la enfermedad mastitis subclínica y/o alto riesgo de infección en el cuarto
probado.
UN RESULTADO POR ENCIMA DE 300 UNIDADES
! Felicitaciones ! El cuarto probado esta en excelentes condiciones de salud.
UN RESULTADO ENTRE 250 Y 300 UNIDADES:
Una fase intermedia entre mastitis subclínica y un buen estado de salud en el cuarto
probado.
Debido a diferencias fisiológicas es algo difícil definir precisamente el punto exacto,
indicando la enfermedad.
En algunas vacas lectura entre 250 y 300 unidades es fisiológica, especialmente si
nosotros nunca obtenemos resultados altos de este animal en particular. En tales
instancias tal resultado se considera normal y el cuarto saludable. Sin embargo, si
nosotros obtenemos tales resultados en una vaca cuyos resultados están casi siempre
sobre las 300 unidades, entonces esto indica una amenaza de mastitis.
CAMBIO DE PILA
1. Destornillar los tornillos los cuales fijan la tapa que se encuentra al final del mango.
2. Quitar la pila que se encuentra dentro del mango.
3. Cambiar la pila vieja por la nueva y colocarla dentro del mango
4. Apretar ambos tornillos para fijar la tapa de nuevo.
NOTAS IMPORTANTES
 Para obtener mejores y óptimos resultados en la cría de vacas saludables, se
recomienda emplear un aparato de detección de mastitis subclínica por cada 80
vacas.
 Si el aparato esta siempre limpio antes de usar no causa ningún efecto dañino en el
mantenimiento de la higiene.
 En caso de que en la pantalla aparezca un resultado no usual, limpie los electrodos
con algodón remojado en solvente de grasa o alcohol.
 Manténgase el aparato en un lugar fresco y seco.
 No use agua muy caliente o hirviendo en el momento del lavado del aparato.
 Es muy importante mantener la copita de medida y electrodos muy limpios. Suciedad
o presencia de restos orgánicos pueden causar cambios importantes en los
resultados.
 Después de 1 año de garantía Firma Draminski se compromete mantener servicio
técnico, inspecciones y reparaciones por cuenta del usuario.
NUEVA ALTERNATIVA EN EL CONTROL DE MASTITIS SUBCLINICA
ESPECTRO HJ
FICHA TECNICA
Solución intramamaria sin período de retiro para el control de la mastitis por gérmenes
Gram positivos y negativos durante el período de lactancia.
Registro SAGARPA Q7149012
Caja con 24 jeringas con 12 ml c/u
Espectro HJ es una formulación que combina la presencia de aminoácidos y
antioxidantes. Al contacto con las bacterias de cualquier familia induce cambios
degenerativos en la pared celular destruyendo la misma por lo que su rango de acción es
de amplio espectro. El contenido de antioxidantes, permite la captura de los radicales
libres presentes por el proceso inflamatorio local, limitando el daño de radicales libres a
células acinares productoras de leche, permitiendo que el proceso de reparación se lleve
al cabo. Su efecto anti inflamatorio, facilita al organismo la reducción de células
inflamatorias. Por su formulación no antibiótica no esteroide puede aplicarse durante la
lactancia sin período de retiro. La dosis recomendada es de una jeringa de 12 ml vía
conducto galactóforo cada 24 horas durante tres días. Es recomendación el empleo de
un detector de conductividad de la leche como el equipo Draminski a fin de conocer si
durante las primeras 24-48 h. se encontró mejoría clínica y de conductividad. El clínico
con estos elementos puede decidir si continuar con el tratamiento de Espectro HJ o
cambiar a otro.
COMPOSICION PORCENTUAL:
Cada jeringa contiene:
Ácidos pirimídicos (aminoácidos)
Vehículo c.b.p.
2%
100%
MECANISMOS DE ACCION; EFECTO BACTERICIDA
La fórmula de Espectro HJ tiene efecto bactericida de amplio espectro. Es capaz de
inhibir el crecimiento de las bacterias Gram positivas así como a las Gram negativas.
Bacterias como micoplasmas también son destruidas. El coeficiente de acides es de 3.5
y en contacto con las membranas bacterianas induce perforaciones y descompensación
de la integridad de la célula bacteriana.
PRUEBAS DE INHIBICIÓN BACTERIANA
Procedimiento para determinar la potencia bactericida.
Prueba para determinar la difusión en Agar y el halo de inhibición del producto en
prueba hacia el crecimiento bacteriano sobre el Agar.
Materiales;
Placa de Petri con Agar enriquecido (Soya Tripticaseina o Müller Hinton).
Caldo de cultivo bacteriano de la suspensión bacteriana entre 103 a 104 UFC.
Hisopos de algodón estériles.
Cilindros de acero inoxidable estériles.
Cilindros de plástico estériles (parte superior de puntas azules para micro pipeta de 100
microlitros).
Procedimientos
El inóculo (Gram positivos y/o negativos) se homogeniza en la placa mediante la
aplicación con un hisopo estéril.
Por la parte superior del cilindro se depositan 100 µl del producto a probar. Para los
productos de alta densidad se emplea los cilindros de plástico para permitir su difusión.
Se permite la interacción durante 12 horas incubando a 37 ° C. Se procede a la lectura
del halo de inhibición del crecimiento bacteriano con una regla, midiendo el diámetro
del mismo.
Resultados;
Espectro HJ produce halo de inhibición de 2.3 cm. para gérmenes Gram negativos como
E.coli y de 2.5 cm. para gérmenes Gram positivos como Staphylococcus aureus, en la
prueba de potencia en Agar soya tripticaseina y cilindros.
LA IMPORTANTE ZONA DE IHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
TANTO PARA GÉRMENES GRAM POSITIVOS COMO NEGATIVOS HACE DE
ESPECTRO HJ, UN PRODUCTO DE AMPLIO ESPECTRO PARA EL
TRATAMIENTO DE GÉRMENES QUE INDUCEN MASTITIS.
Procedimiento para determinar reto bacteriano contra tiempo.
1. Preparar suspensión de bacterias (E.coli y Staph.aureus), a una densidad de 0.5
según nefelómetro de Macfarland.
2. Colocar en tubo de vidrio estéril 1 ml de producto de prueba.
3. Marcar una caja de Petri con Agar en secciones de manera que se tenga espacio
suficiente para sembrar los desafíos en sus diferentes tiempos.
4. Comenzar el reto (Producto-Bacteria), agregando 100 µl de la suspensión bacteriana
al mililitro de producto prueba moviendo el producto con pipeteo continuo durante
15 segundos.
5. Tome una muestra de 100 µl y deposite en la placa en el espacio pre-determinado
para los 15 segundos de contacto, y en forma sucesiva para los tiempos 30, 45 y 60
segundos.
6. La placa sembrada se incuba por 18 – 24 horas a 37 C°.
7. Se leen los resultados;
a. Presencia de colonias significa no inhibición a ese tiempo.
b. Ausencia de colonias significa inhibición completa.
Resultados;
ESPECTRO H J, INDUCE LA MUERTE BACTERIANA DESDE LOS 15
SEGUNDOS DE CONTACTO. ESTA ESPECIAL CARACTERÍSTICA
PROPORCIONA A LA VACA EN TRATAMIENTO, LA ELIMINACIÓN
INMEDIATA DE LAS BACTERIAS CON LAS QUE ESPECTRO H J, HAYA
TENIDO CONTACTO. LA REDUCCIÓN DE LA POBLACIÓN DE BACTERIAS
PATÓGENAS EN EL FOCO INFECCIOSO DISMINUYE EN FORMA
PROGRESIVA LOS ESTÍMULOS INFLAMATORIOS VASCULARES Y
CELULARES.
PRUEBA DE PRESENCIA DE INHIBIDORES
Para conocer el efecto de presencia de inhibidores en la leche se empleó el sistema de
ELISA Delvotest cuyo principio es la acidificación de la leche por parte del
Sterarophillus calidolactie.
El micro cultivo está en el pequeño vial que contiene una sustancia que vira el color
según el pH a que sea sometido.
Si el sustrato (muestra de leche) contiene substancias inhibitorias el cultivo muere y no
acidifica la leche. En este caso no hay cambio de color en la prueba (permaneciendo de
color PURPURA). Se interpreta como POSITIVO A PRESCENCIA DE INHIBIDOR
(ANTIBIOTICO) EN LECHE
Si el sustrato no contiene inhibidores (antibiótico) la bacteria Sterarophillus calidolactie
continua su metabolismo acidificando la lactosa presente en la muestra.
Este ácido producido vira el indicador del cultivo a AMARILLO.
En este caso indica NEGATIVO A LA PRESENCIA DE INHIBIDOR
(ANTIBIOTICO).
El desafío se realizó con concentraciones crecientes de Espectro HJ en solución con
leche entera pasteurizada. Se colocaron en una gradilla, nueve tubos de ensayo y se
incorporó 10 ml de leche a cada tubo. Los tubos se separaron en tres grupos de tres. El
primer tubo de cada hilera recibió 100, 200 y 500 l de Espectro HJ y se mezclaron con
la leche con el pipeteo, hasta obtener suspensión del producto. Esta parte la facilita el
color café oscuro de Espectro. Los tubos subsiguientes recibieron 100 l del primer y
segundo tubos y de forma semejante se mezclaron con la leche.
Una vez preparadas las diluciones, se tomaron 100 l de cada tubo y se colocaron en
pozos de la microplaca Delvotest. Se incubó a 60 Co por cuatro horas y pasado este
tiempo se observó la coloración de cada pozo.
Se obtuvieron muestras de leche de diez vacas al tercer día bajo tratamiento con
Espectro HJ. 500 l de leche de cada vaca se incubó en el sistema Delvotest en forma
semejante a lo descrito en forma anterior.
Resultados:
Todos los pozos mantuvieron color amarillo lo que es indicativo de la sobrevida del
Sterarophillus calidolactie y la acidificación de la lactosa. La interpretación de los
resultados indicó la ausencia de inhibidores en Especto JH aún a las concentraciones
mayores del producto como el tubo que recibió 500 l.
La leche de las 10 vacas, incubada en los pozos Delvotest desarrolló coloración amarilla
por lo que la interpretación de los resultados fue la ausencia de inhibidores en la leche.
LA FÓRMULA DE ESPECTRO HJ EN SU FRACCION BACTERICIDA HACE DEL
PRODUCTO UNA VALIOSA HERRAMIENTA DADA LA AUSCENCIA DE
INHIBIDORES, POR LO QUE ES POSIBLE PROPORCIONAR EL TRATAMIENTO
CORRECTIVO SIN NECESIDAD DEL RETIRO DE LA LECHE. EL BENEFICIO
ECONÓMICO AL PRODUCTOR ES POSITIVO PARA SU ECONOMÍA.
PRUEBAS DE ESTABILIDAD DE LA GLÁNDULA MAMARIA
Se utilizó el modelo de inyección intraductal en el conducto galactóforo en ratona
lactante. Se emplearon diez ratonas de la cepa NIH con 15 días de haber parido. Bajo
sedación con Droperidol y anestesia con Ketalar, se rasuró la piel del abdomen y se
colocaron en decúbito supino, fijadas las extremidades con cinta adhesiva sobre una
plataforma circular de poli estireno. Bajo microscopio de disección se visualizaron los
pezones y con pinza fina de relojero se tomó la punta de la piel cercana a la salida del
conducto galactóforo e introdujo una cánula de 0.35 mm de diámetro acoplada a una
jeringa de 1 ml. A las glándulas del lado derecho se les introdujo 0.5 ml de Espectro HJ
en cada conducto galactóforo. Las del lado izquierdo recibieron 0.5 ml de solución
salina estéril y sirvieron como testigo. Se permitió la recuperación de la anestesia y 5
ratonas se observaron por espacio de 24 y 48 h en forma respectiva. Una vez cumplidos
los tiempos de observación, se procedió al sacrificio por dislocación cráneo cervical y a
la recuperación de cada glándula mediante disección. Las glándulas fueron fijadas en
formol amortiguado al 10% durante 24 h. seccionadas en fina rebanadas para su
inclusión en cápsulas y se continuó con el procedimiento convencional de
deshidratación aclaración e inclusión en parafina para secciones en microtomía. Los
cortes depositados en portaobjetos fueron contrastados con hematoxilina y eosina y
observados en microscopio de luz fotónica.
Resultados;
Las glándulas mamarias de los grupos testigo con solución salina mostraron un patrón
normal en la arquitectura histológica (Fig. 1 y 2). Los acinos glandulares mostraron
epitelio de revestimiento cúbico simple. El citoplasma de color acidófilo muestra
vesículas de diferente tamaño. En la luz acinar se identifica material amorfo y finamente
granular compatible con la caseína. Escasas células mononucleares se identifican. En el
intersticio los vasos son de aspecto normal y el tejido conectivo no muestra cambios.
(Fig. 3 y 4)
Las glándulas mamarias que recibieron Espectro HJ son semejantes desde el punto de
vista histológico que las glándulas testigo. En pequeñas zonas se advierte congestión y
dilatación vascular rodeadas por exudado inflamatorio agudo (Fig. 3,4).
CONCLUSIONES:
LA INTRODUCCIÓN DE ESPECTRO HJ EN LA GLÁNDULA MAMARIA DE
RATONA EN LACTACIÓN NO INDUCE CAMBIOS SIGNIFICATIVOS EN LA
ESTRUCTURA HISTOLÓGICA DE LAS CÉLULAS EPITELIALES DE LOS
ACINOS GLANDULARES.
EFECTO DE CAPTURA DE RADICALES LIBRES ANTIOXIDANTES Y
DAÑO OXIDATIVO. EFECTO DESINFLAMATORIO.
Los cambios en la fisiología natural de las células, los insultos del medio ambiente, la
respuesta inflamatoria, son inductores de la producción de compuestos conocidos como
productos reactivos oxigenados o radicales libres.
En la glándula mamaria desafiada ante la presencia de bacterias en su interior, la
primera línea de defensa ante la colonización de bacterias son los macrófagos seguidos
de los polimorfonucleares neutrófilos, todos ellos con alta capacidad de fagocitosis.
Durante el proceso de fagocitosis las células vierten compuestos oxigenados en las
vacuolas digestivas intracitoplásmicas, para inducir la muerte celular de las bacterias,
sin embargo durante este tipo de reacciones, los radicales libres pueden alcanzar el
espacio extracelular e inducir cambios degradativos en células de defensa del sistema
inmune así como en células del contexto glandular. Los radicales libres son moléculas o
fragmentos de moléculas que contienen uno o más electrones libres. La mayoría de los
radicales libres en el sistema biológico son; peróxido de hidrógeno, de ubicación en el
citosol celular, superóxidos, radicales oxidrilo y radicales de ácidos grasos, de ubicación
en el citosol y membrana citoplásmica. Una vez circulando en el organismo se adhieren
a las células induciendo serios cambios en la estructura y permeabilidad celular que
conlleva a la destrucción del tejido. La muerte celular condiciona la presencia de
infecciones bacterianas dependientes de la ubicación del proceso degenerativo o bien
puede inducir mutaciones y cambios degenerativos de anaplasia, metaplasia y neoplasia.
Entre los mecanismos de protección antioxidación desarrollados por las células se
encuentra a la enzima superóxido dismutasa. Es una enzima ligada al Zinc y al cobre
que convierte a los radicales superóxido en peróxido de hidrógeno. A su vez el peróxido
de hidrógeno es convertido en agua por la enzima glutatión GSPpx de sus siglas en
inglés. Estas dos enzimas son de alta eficiencia para el control de radicales superóxido
en el citosol.
ESPECTRO HJ CONTIENE EN SU FORMULACIÓN COMPUESTOS
ANTIOXIDANTES BIPOLARES. EL CONTACTO CON RADICALES LIBRES DE
CARGA NEGATIVA O POSITIVA, LIBERADOS DURANTE LA DESTRUCCIÓN
DE BACTERIAS EN EL PROCESO DE FAGOCITOSIS SON CAPTURADOS Y
ELIMINADOS.
ESPECTRO HJ TIENE PROPIEDADES DE REGULAR LOS NIVELES DE
MICROELEMENTOS (ZINC, COBRE) QUE PARTICIPAN EN LA ACTIVACIÓN
DE LA SUPERÓXIDO DISMUTASA. LOS RADICALES OXIDO SON
DISMUTADOS Y ELIMINADOS CONTRIBUYENDO A DISMINUIR EL ORIGEN
DEL INSULTO INFLAMATORIO LOCAL.
PRUEBA DE CAMPO ESTABLO “LA VICTORIA” LA LAGUNA.
Se realizó la selección de vacas con mastitis por datos físicos y clínicos bajo la
supervisión del M.V.Z Jesús Torres. Se aplicó en cada caso la lectura de la
conductividad de la leche con el equipo Draminski. El punto de corte para identificar
leche con mastitis en el equipo Draminski es de 300. Por debajo de esa lectura la leche
es considerada anormal. Por arriba de 300 es considerada normal.
A la fecha se ha proporcionado tratamiento a 70 bovinos en la línea de ordeño con
mastitis leve, moderada y severa. Sesenta y ocho de los casos respondieron en forma
favorable permitiendo su alta al tercer día. Ninguna de estas vacas tuvo re incidencia de
su proceso infeccioso.
PRUEBA DE ESPECTRO HJ ESTABLO VICTORIA
Diagnóstico
Conductividad Inicio
Vaca Cuarto
de tratamiento
24 h.
181 TI
200
220
1121 DI
210
230
453 TD
240
240
223
958
1188
1340
40
620
1142
1139
TI
DD
TD
TI
DD
TD
TD
TD
210
250
270
260
220
250
290
280
200
250
280
260
230
310
300
270
1775
561
1748
474
DD
TI
TI
TD
250
190
240
190
190
220
250
200
1741
909
1872
1486
641
1949
299
1757
1861
575
506
798
391
TD
DI
TI
TD
DI
TD
TD
TD
DD
TD
TD
DI
TI
230
240
280
210
280
250
250
260
260
260
230
270
240
170
270
270
260
260
330
280
270
280
300
390
310
260
48 h.
72 h.
280 Alta
280 Alta
340 Alta
Cambio
240 tratamiento
280 Alta
300 Alta
290 Alta
280 Alta
Alta
Alta
Alta
Cambio
tratamiento
290 Alta
290 Alta
290 Alta
Cambio
tratamiento
300 Alta
300 Alta
290 Alta
290 Alta
Alta
300 Alta
300 Alta
300 Alta
Alta
Alta
Alta
310 Alta
770 DD
1332 DI
2152 TI, TD
2167 TI
230
260
240,230
220
220
250
230,230
300 Alta
290 Alta
300,290 Alta
Cambio
190 tratamiento
Prueba realizada y validada por el MVZ Jesús Torres
PRUEBA DE CAMPO ESTABLO “MONTE ALEGRE” LA LAGUNA.
Este establo presenta infección aguda por Staphylococcus aureus, confirmado por
aislamientos en microbiología. Se trataron mastitis agudas con grado 3 según la prueba
de California y con lecturas de conductividad eléctrica debajo de 300 según el monitor
Draminski. Los resultados indican que la recuperación de las vacas fue del 95% después
de tres días de tratamiento con Espectro HJ sin retorno como infecciosas.
VACAS MONTE ALEGRE
13 DE JUNIO
VACA
LECTURA DIA 1
42
180
7022
280 290
1138
290 290
1268
250
1355
160
3355
260
5092
280
1035
170,170,
7120
320
1373
170,170,260
3220
270,280,280,250
3348
240,290,260,250
5938
300,190,290,190
7052
300
1360
320,320
7089
210,210,
5292
290,280,310
3436
290,230,
161
270
4006
240 230
7046
170,190,
19
210 240
JUNIO 2007
15 DE JUNIO 2007
LECTURA DIA 2
290
310,320
300 300
300
300
320
320
210,210,
380
FALTO
FALTO
270,300,290,300
320,270,310,280
300
340,340,
FALTO
280,300,350
270,240.
300
370 380
280,290,
330 320
16 DE JUNIO
LECTURA DIA 3
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Alta
Prueba realizada y validada por el MVZ Gerardo Raigoza
TOXICOLOGIA AGUDA DL50 ESPECTRO HJ
ANIMALES
70 ratones del sexo femenino de la cepa NIH de 20 gm de peso corporal aproximado,
alojados en grupos de diez animales cada uno en cajas de policarbonato, con libre
acceso a alimento peleteado Purina para roedores.
PRODUCTO A PROBAR
Aminoácidos (ácidos pirimídicos) en suspensión líquida al 70%.
VIA DE ADMINSTRACION
Oral en el agua de bebida y por sonda oral
DOSIS EMPLEADAS
10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, mg por Kg. de peso
TIEMPO DE SUMINISTRO
30 días consecutivos
EXAMENES REALIZADOS
Peso corporal ante y después del tratamiento, conducta.
Análisis macroscópico de órganos por sistemas
Respiratorio, digestivo, genitourinario, sistema nervioso central
Análisis microscópico (histología) de hígado, páncreas, bazo, riñón, adrenales,
estómago, duodeno, yeyuno, íleon, colon. Corazón, pulmón, timo, ganglio linfático
submaxilar, cerebro, cerebelo.
Examen macroscópico por sistemas
Grupo 70 mg
Raton 1
Raton 2
Raton 3
Raton 4
Raton 5
Raton 6
Raton 7
Raton 8
Raton 9
Raton 10
Respiratorio digestivo
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
genito urinario
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
SNC
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
linfoide
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
S/C
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