ENCUESTA PEEC No. 23. Control instrumental Espectrofotometría Julio de 2002 CONTROL DE EXACTITUD DE LONGITUD DE ONDA Punto isosbéstico del Azul de Bromotimol Sugerencias de metodología para instrumentos METROLAB Autoanalizador 2100/2300 No es aplicable por tratarse de instrumentos con filtros fijos en 9 longitudes de onda. Fotómetro Metrolab 1600 DR No es aplicable por tratarse de instrumento con filtros de longitud de onda fija. Espectrofotómetro Metrolab 1600 y 1600 Plus Si bien estos modelos pueden hacer automáticamente un barrido espectral continuo con descuento del blanco, a fin de acercarse lo más posible a las recomendaciones del Peec, aconsejamos aplicar el siguiente procedimiento: 1. Realizar un loop setup completo. 2. Verificar la calibración de longitud de onda automática del instrumento (Ver manual) 3. En el menú principal seleccionar la opción 6. SPECTRUM 4. Cuando lea SPECTRUM (Y/N) seleccionar YES. 5. Elija la opción 1. Setup WL Vector. 6. Cuando vea la entrada WL1:, ingrese el valor 480 7. Sucesivamente ingrese los valores WL2, WL3, hata WL15 con los datos 485, 490, hasta 520, incluidos en la Planilla de resultados. 8. Al finalizar, cuando vea el mensaje EEPROM?, responda YES. 9. Al mensaje PRINT VECTOR responda YES. Verifique los valores ingresados y que los WL16 a WL20 son cero. 10. En el menú de SPECTRUM, seleccione 3. READ BLANK 11. Con la flecha arriba cargue agua destilada en la celda. MANTENIENDO EL TUBO CON AGUA EN EL CAPILAR DE ASPIRACIÓN, seleccione 1. BLANK VECTOR MODE. Una vez que el blanco ha sido aspirado, retire el tubo de agua. El instrumento leerá automáticamente el blanco para las 15 longitudes de onda seleccionadas. Al finalizar, retornará al menú de SPECTRUM. 12. Seleccione 4. READ SAMPLE. Vacíe la celda dos veces oprimiendo FLECHA ARRIBA. Cargue 1 vez la solución A. NO RETIRE EL TUBO DE MUESTRA. 13. Oprima 1. READ SAMPLE VECTOR. Una vez cargada la muestra puede retirar el tubo de muestra. 14. Al finalizar, cuando se indica PRINT VECTOR?, oprima YES. 15. Copie los valores obtenidos. En la columna ABS (neta) A de la Planilla. LAS ABSORBANCIAS SON RELATIVAS: el agua ya está restada. 16. Repita los pasos 12, 13 y 14 para la solución B y copie los datos en la columna ABS (neta) B. 17. Calcule el punto isosbéstico de acuerdo a las instrucciones. Espectrofotómetros modelos 330, 325, 325BD Siga estrictamente las instrucciones indicadas en “Método con 3 cubetas” ó “Método con una cubeta”.