Informe de incidencias Agosto-2011 Descripción de la incidencia Se observa una disminución de la intensidad y de la resolución de los picos. Ver inyecciones (10531, antes y 10542, después) de un standard de nicotianamina. Causas de la incidencia En principio se achaca el problema a un problema de suciedad derivado de inyecciones directas de estándares de riboflavina. Medidas tomadas. 1. En primera instancia Patricia limpia la cámara de desolvatación constatando que la misma está realmente sucia. 2. Como la intensidad sigue siendo muy baja, se limpia concienzudamente el capilar y el skimmer 1. No se observa gran suciedad en el skimmer 1. En Abril que hice otra limpieza si que estaba realmente sucio. No se consiguen reestablecer unos buenos parametros de intensidad/resolución. Atención con la nueva configuración del la bomba de prevacio, hay que acordarse de apagarl manualmente una vez que ponemos el equipo a ventear, ya ahora nose apagará automáticamente. 3. Se hace una conexión webex con Antonio Martín. Se inyecta tunning mix. Parece que no hay transmisión de iones. Antonio sugiere hacer una limpieza del hexapolo con todas sus partes. 4. Se cambia la aguja del electrospray que estaba un poco chamuscada. 4. Se saca el capilar, el skimmer 1 y el hexapolo. Se desmontan todas las piezas del hexapolo siguiendo las instrucciones que en su dia me había enviado Antonio Martín y que están disponibles en el escritorio del microtof. Con paciencia, buena letra y entre dos personas se puede hacer sin mayor problema. Se limpian todas las piezas (spray shield, end cap, capillary, skimmer 1 y todo el hexapolo desmontado, exceptuando las partes plasticas y con cables del mismo siguiendo este orden: limpieza con pincel, sonicación 8 minutos, usando de forma consecutiva: agua, agua/isopropanol, isopropanol, metanol. Despues de la ultima tanda con metanol se seca todo usando la linea de nitrógeno gas. Asisten Pablo y Patricia. Patricia saca y mete el capilar. Se monta de nuevo todo. Hay que esperar toda una noche para que vuelva a recuperar el vacio. 5. Se vuelve a conectar via webex con Antonio Martin, seguimos teniendo el mismo problema. Parece que no hay transmision de iones. Aquí Antonio duda se habrá que limpiar el equipo a nivel de detector o es que hay algo mal en la transmisión de iones. El amperaje del capilar está muy bajo, 4-5 nA, cuando debería estar a unos 20. Investigando si podría haber pasado algo con estos valores del capilar miramos los valores de las inyecciones antes mencionadas. (Se puede acceder a ellas a través de las propiedades del analisis desde DataAnalysis. Se observa que en el pinchazo 10531 el valor de capilar es de 17 nA y en el 10542 es de 2495. Esto puede indicar que quizas se hubiese producido algún cortocircuito en el el sistema, debido o no a la contaminación. Como Antonio esta muy liado de trabajo deciden mandar a un técnico de Alemania, Oskar Ziekler. 6. Como a la semana siguiente (8 de agosto) estaba programada la visita de Sandra y Alicia de Madrid, me comunico con ellas para anular la visita hasta nuevo aviso. 7. El 9 de agosto viene el técnico de Alemania, Oskar Ziekler. Al empezar a trabajar nos da un error electrónico (OTIC response), problema que nosostros no habíamos detectado hasta entonces. Oskar lo soluciona reseteando la placa que lleva toda la electrónica. Hay que abrir el equipo y desmontar una pequeña puerta. Se consigue el mismo efecto usando el reset de la cajita que está enchufada al PC. Se resuelve el problema 8. Se inyecta de nuevo el tunning mix. (Oskar recomienda trabajar siempre con la bomba de la jeringa por encima de la fuente de electrospray para evitar problemas de burbujas que pueden afectar a la señal). Ahora el equipo parece que si tiene valores de amperaje en el capilar más estables. Sin embargo la señal parece que todavía la señal y la forma del pico no son las optimas, especialmente en positivo. Comprueba que hay un buen spray, se limpia la camara de desolvatación y procede tunear el equipo, ya que después de informarle de todas las medidas de limpieza que llevamos a cabo no considera que sea necesario el volver a limpiarlo. Ahora si que se observa transmision de iones. 9. Aprovechando que iba a venir el técnico, Antonio había enviado una power dstribution box, ya que consideraba que era la responsable de que la bomba de prevacio estuviese fallando. Oskar la cambia, para lo cual hay que apagar el equipo. El proceso no es facil ya que hay que desenganchar varios cables. Se conecta de nuevo la alimentación de la bomba al micortof. Parece que va todo bien, pero cuando ya nos retirabamos por la tarde, se apaga la bomba de prevacio. Se conecta de nuevo a la alimentación general y se vuelve a encender la máquina. 10. Al dia siguiente Oskar vuelve a cambiar de nuevo la power distribution box y pone la vieja. 11. Finalmente tunea el equipo y ya me advierte que el detector está un poco viejo y que va subir un poco el voltaje del mismo. Todo esto con el tunning mix. Finalmente se va a media mañana. 12. Vuelvo a pinchar el standard de nicotianamina que me había servido de referencia anteriormente y se obtiene una intensidad similar a la obtenida al principio. Sin embargo la señal/ruido a disminuido un montón. Se observa mucho grass, que impide ver bien los isótopos más pequeños y que nos deja en valores de s/n inaceptables. 13. Decido contactar con Alberto Prata para hacer una conexión webex. (En la medida de los posible usar esta forma de asistencia ya que de momento no se nos está cargando nada por la misma, y además tanto Alberto como Antonio pero especialmente Alberto son muy ayudadores y te explican las cosas muy bien) 14. Alberto hace una optimización del TOF y Digitazer para corregir el ruido de fondo. Para esto se inyecta el tunning mix y en modo service se va Instrument Tune, pestaña Automatic. Es similar a la herramienta de optimize que usamos nosotros habitualmente. En la m/z se escoge la mas a 622 del tunning mix. Y se procede a optimizar tanto el digitzer como el TOF. Si vemos que los valores que nos da son muy diferentes de los que había, es que necesitaba un repaso. Si embargo hayq ue darle varias pasada y yo recomiendo que para tocarlo se vuelva a contactar con Alberto, porque se ve que es proceso que requiere bastante experiencia previa. Estos parametros afectan a todo el equipo, no solamente a nuestro método y para asegurarnos que así sea nos vamos al menu Service/ Save as instrument parameters default. Estos parametros son independientes de si estamos en modo positivo o negativo. Lo fundamental aquí es que Alberto tuvo que subir el valor del detector que estaba en 2039 V. 15. Como la resolución no era muy buena, alrededor de 7500 para masas de 622, le digo a Alberto si lo puede optimizar. Aquí ya se da cuenta que para optimizarlo necesita bajar el voltaje del detector. Pero si baja el voltaje del detector la intensidad también baja. Me comenta que el detector se nota que ha perdido “chispa” y que para responda bien hay que irse a valores de voltaje de 2139 (que es el que se dejó). Cuando se instaló el equipo estaba cerca de 2000 y el máximo es de 2300. Alberto me dice que de momento podemos ir tirando y que tendremos que pensar que nos interesa, intensidad o resolución. Para identificar, nos interesa resolución, una vez que ya tengamos el compuesto idetificado y analisis de rutina podemos subir un poco el voltaje del detector para tener más señal. 16. El precio del detector con mano de obra anda por los 10K €. Estoy a la espera de que me mande Prata una factura proforma. Una idea a considerar, vista la situación económica, sería comprarlo ahora que hay dinero y tenerlo en la recamara para cuando falle el que tenemos. En Granada, el grupo de Antonio Segura, con un equipo con la misma antigüedad que el nuestro ya van por el segundo detector. La diferencia al poner el nuevo detector es notable por lo que dice Alberto. 17. Yo inyectando Fe-Cit todavía tengo bastante grass (en negativo). Patricia ya ha inyectado sus compuestos en positivo y si que obtiene valores similares a los que obtenía anteriormente. 23/08/2011 Rubén Rellán Álvarez