MS Lab 23.08.11 - Plant Stress Physiology

Informe de incidencias
Agosto-2011
Descripción de la incidencia
Se observa una disminución de la intensidad y de la resolución de los picos. Ver inyecciones
(10531, antes y 10542, después) de un standard de nicotianamina.
Causas de la incidencia
En principio se achaca el problema a un problema de suciedad derivado de inyecciones directas
de estándares de riboflavina.
Medidas tomadas.
1. En primera instancia Patricia limpia la cámara de desolvatación constatando que la misma
está realmente sucia.
2. Como la intensidad sigue siendo muy baja, se limpia concienzudamente el capilar y el
skimmer 1. No se observa gran suciedad en el skimmer 1. En Abril que hice otra limpieza si que
estaba realmente sucio. No se consiguen reestablecer unos buenos parametros de
intensidad/resolución. Atención con la nueva configuración del la bomba de prevacio, hay que
acordarse de apagarl manualmente una vez que ponemos el equipo a ventear, ya ahora nose
apagará automáticamente.
3. Se hace una conexión webex con Antonio Martín. Se inyecta tunning mix. Parece que no hay
transmisión de iones. Antonio sugiere hacer una limpieza del hexapolo con todas sus partes.
4. Se cambia la aguja del electrospray que estaba un poco chamuscada.
4. Se saca el capilar, el skimmer 1 y el hexapolo. Se desmontan todas las piezas del hexapolo
siguiendo las instrucciones que en su dia me había enviado Antonio Martín y que están
disponibles en el escritorio del microtof. Con paciencia, buena letra y entre dos personas se
puede hacer sin mayor problema. Se limpian todas las piezas (spray shield, end cap, capillary,
skimmer 1 y todo el hexapolo desmontado, exceptuando las partes plasticas y con cables del
mismo siguiendo este orden: limpieza con pincel, sonicación 8 minutos, usando de forma
consecutiva: agua, agua/isopropanol, isopropanol, metanol. Despues de la ultima tanda con
metanol se seca todo usando la linea de nitrógeno gas. Asisten Pablo y Patricia. Patricia saca y
mete el capilar. Se monta de nuevo todo. Hay que esperar toda una noche para que vuelva a
recuperar el vacio.
5. Se vuelve a conectar via webex con Antonio Martin, seguimos teniendo el mismo problema.
Parece que no hay transmision de iones. Aquí Antonio duda se habrá que limpiar el equipo a
nivel de detector o es que hay algo mal en la transmisión de iones. El amperaje del capilar está
muy bajo, 4-5 nA, cuando debería estar a unos 20. Investigando si podría haber pasado algo con
estos valores del capilar miramos los valores de las inyecciones antes mencionadas. (Se puede
acceder a ellas a través de las propiedades del analisis desde DataAnalysis. Se observa que en el
pinchazo 10531 el valor de capilar es de 17 nA y en el 10542 es de 2495. Esto puede indicar que
quizas se hubiese producido algún cortocircuito en el el sistema, debido o no a la contaminación.
Como Antonio esta muy liado de trabajo deciden mandar a un técnico de Alemania, Oskar
Ziekler.
6. Como a la semana siguiente (8 de agosto) estaba programada la visita de Sandra y Alicia de
Madrid, me comunico con ellas para anular la visita hasta nuevo aviso.
7. El 9 de agosto viene el técnico de Alemania, Oskar Ziekler. Al empezar a trabajar nos da un
error electrónico (OTIC response), problema que nosostros no habíamos detectado hasta
entonces. Oskar lo soluciona reseteando la placa que lleva toda la electrónica. Hay que abrir el
equipo y desmontar una pequeña puerta. Se consigue el mismo efecto usando el reset de la
cajita que está enchufada al PC. Se resuelve el problema
8. Se inyecta de nuevo el tunning mix. (Oskar recomienda trabajar siempre con la bomba de la
jeringa por encima de la fuente de electrospray para evitar problemas de burbujas que pueden
afectar a la señal). Ahora el equipo parece que si tiene valores de amperaje en el capilar más
estables. Sin embargo la señal parece que todavía la señal y la forma del pico no son las
optimas, especialmente en positivo. Comprueba que hay un buen spray, se limpia la camara de
desolvatación y procede tunear el equipo, ya que después de informarle de todas las medidas
de limpieza que llevamos a cabo no considera que sea necesario el volver a limpiarlo. Ahora si
que se observa transmision de iones.
9. Aprovechando que iba a venir el técnico, Antonio había enviado una power dstribution box, ya
que consideraba que era la responsable de que la bomba de prevacio estuviese fallando. Oskar
la cambia, para lo cual hay que apagar el equipo. El proceso no es facil ya que hay que
desenganchar varios cables. Se conecta de nuevo la alimentación de la bomba al micortof.
Parece que va todo bien, pero cuando ya nos retirabamos por la tarde, se apaga la bomba de
prevacio. Se conecta de nuevo a la alimentación general y se vuelve a encender la máquina.
10. Al dia siguiente Oskar vuelve a cambiar de nuevo la power distribution box y pone la vieja.
11. Finalmente tunea el equipo y ya me advierte que el detector está un poco viejo y que va
subir un poco el voltaje del mismo. Todo esto con el tunning mix. Finalmente se va a media
mañana.
12. Vuelvo a pinchar el standard de nicotianamina que me había servido de referencia
anteriormente y se obtiene una intensidad similar a la obtenida al principio. Sin embargo la
señal/ruido a disminuido un montón. Se observa mucho grass, que impide ver bien los isótopos
más pequeños y que nos deja en valores de s/n inaceptables.
13. Decido contactar con Alberto Prata para hacer una conexión webex. (En la medida de los
posible usar esta forma de asistencia ya que de momento no se nos está cargando nada por la
misma, y además tanto Alberto como Antonio pero especialmente Alberto son muy ayudadores y
te explican las cosas muy bien)
14. Alberto hace una optimización del TOF y Digitazer para corregir el ruido de fondo. Para esto
se inyecta el tunning mix y en modo service se va Instrument Tune, pestaña Automatic. Es
similar a la herramienta de optimize que usamos nosotros habitualmente. En la m/z se escoge la
mas a 622 del tunning mix. Y se procede a optimizar tanto el digitzer como el TOF. Si vemos que
los valores que nos da son muy diferentes de los que había, es que necesitaba un repaso. Si
embargo hayq ue darle varias pasada y yo recomiendo que para tocarlo se vuelva a contactar
con Alberto, porque se ve que es proceso que requiere bastante experiencia previa. Estos
parametros afectan a todo el equipo, no solamente a nuestro método y para asegurarnos que así
sea nos vamos al menu Service/ Save as instrument parameters default. Estos parametros son
independientes de si estamos en modo positivo o negativo. Lo fundamental aquí es que Alberto
tuvo que subir el valor del detector que estaba en 2039 V.
15. Como la resolución no era muy buena, alrededor de 7500 para masas de 622, le digo a
Alberto si lo puede optimizar. Aquí ya se da cuenta que para optimizarlo necesita bajar el voltaje
del detector. Pero si baja el voltaje del detector la intensidad también baja. Me comenta que el
detector se nota que ha perdido “chispa” y que para responda bien hay que irse a valores de
voltaje de 2139 (que es el que se dejó). Cuando se instaló el equipo estaba cerca de 2000 y el
máximo es de 2300. Alberto me dice que de momento podemos ir tirando y que tendremos que
pensar que nos interesa, intensidad o resolución. Para identificar, nos interesa resolución, una
vez que ya tengamos el compuesto idetificado y analisis de rutina podemos subir un poco el
voltaje del detector para tener más señal.
16. El precio del detector con mano de obra anda por los 10K €. Estoy a la espera de que me
mande Prata una factura proforma. Una idea a considerar, vista la situación económica, sería
comprarlo ahora que hay dinero y tenerlo en la recamara para cuando falle el que tenemos. En
Granada, el grupo de Antonio Segura, con un equipo con la misma antigüedad que el nuestro ya
van por el segundo detector. La diferencia al poner el nuevo detector es notable por lo que dice
Alberto.
17. Yo inyectando Fe-Cit todavía tengo bastante grass (en negativo). Patricia ya ha inyectado
sus compuestos en positivo y si que obtiene valores similares a los que obtenía anteriormente.
23/08/2011
Rubén Rellán Álvarez