MADRID /SEPTIEMBRE 09. LOGSE / BIOLOGIA / SISTEMA INMUNOLOGICO /OPCIÓN B / ACTIVIDAD 5 OPCIÓN B 5.- Referente a la Ingeniería Genética: a) Explique qué es un ADN recombinante y cuál es la función de las enzimas de restricción (0,5 puntos). b) Indique las etapas necesarias para producir clonación génica (1 punto). c) ¿Qué es una planta transgénica? Cite una de sus aplicaciones (0,5 puntos). a) un ADN recombinante, que es un fragmento de ADN construido artificialmente con segmentos no homólogos, incluso de diferentes organismos. El proceso consiste en cortar fragmentos determinados de ADN, unirlos con otros (también seleccionados) y proceder a introducir el ADN obtenido en una célula en la que se copie numerosas veces. En el proceso son necesarios: - Un “Vector” de clonación: Es un fragmento de ADN que posea un punto de iniciación de replicación reconocible por una célula que replique el conjunto. Los vectores más empleados son los plásmidos y los virus. - Enzimas de restricción: cortan el ADN por lugares específicos y conocidos de entre 4y 8 pares de bases palindrómicas de forma escalonada por lo que dejan colas de una sola hebra, denominados extremos cohesivos, puesto que se pueden unir facilmente a otros segmentos o a vectores de clonación que también posean extremos cohesivos, por ser sus secuencias complementarias. - ADN ligasas: Unen los fragmentos producidos por las enzimas de restricción b) Los pasos para construir una molécula de ADN recombinante son: - Se somete tanto el ADN vector, como el ADN que contiene el gen que se quiere añadir, a la acción de una enzima de restricción, (p.e. EcoR1) que dará lugar a fragmentos de extremos cohesivos. Los fragmentos pueden separarse por electroforesis. - Al mezclar los fragmentos del vector( p.e. un plásmido), con los del ADN que se quiere clonar y con la enzima ligasa, se forma ADN recombinante, en nuestro (ejemplo un plásmido quimera). - La molécula de ADN reconbinante producida in vitro se introducen en un organismo huesped, en nuestro caso en la bacteria. El resultado es que el gen que contine el plásmido se expresa en la bacteria. c) Se denominan transgénicos, los organismos que ncorporan en su genomas de forma estable ADN clonado. Es decir organismos que se desarrollan a partir de una célula en la que se ha introducido ADN de otro ser vivo de otra especie. Los pluricelulares derivan de esa primera célula y por tanto contienen el gen introducido en todas las células. Plantas Transgénicas - Se utiliza la tecnología del ADN recombinante por medio de un plásmido de la bacteria Agrobacterium tumefaciens . - Se cultiva in vitro tejidos vegetales y se seleccionan clones de células genéticamente modificadas - Se induce con tratamientos adecuados a los tejidos seleccionados a que produzcan plantas completas que puedan propagarse vegetativamente o por semillas. Algunas sustancias de interés obtenidas de plantas transgénicas son: - Plantas de tabaco y tomate que producen interferón, anticuerpos animales - Producción de transgénicos útiles para la producción de vacunas. MADRID / JUNIO 07. LOGSE / BIOLOGÍA / BIOTECNOLOGÍA / OPCIÓN B / CUESTIÓN 5 5.- En relación con la Biotecnología: a) Defina Ingeniería genética (0,5 puntos). b) Defina organismo transgénico (0,5 puntos). c) Explique brevemente el proceso de introducción de un fragmento de ADN en un vector durante la formación de moléculas recombinantes (1 punto). Solución a) Se entiende por ingeniería genética todo cambio intencionado y dirigido de la información genética contenida en las células de un individuo. Los procedimientos de ingeniería genética comienzan con la “clonación génica”. Esta consiste en aislar y replicar genes de interés, con el fin de producir grandes cantidades de estos genes. b) Son transgénicos los animales y plantas que llevan en su genoma genes introducidos artificialmente y que no proceden de sus antecesores. Se obtienen animales transgénicos introduciendo genes clonados en huevos fecundados. c) Los pasos para construir una molécula de ADN recombinante son: - Se somete tanto el ADN vector, como el ADN que contiene el gen que se quiere añadir, a la acción de una enzima de restricción, (p.e. EcoR1) que dará lugar a fragmentos de extremos cohesivos. Los fragmentos pueden separarse por electroforesis. - Al mezclar los fragmentos del vector( p.e. un plásmido), con los del ADN que se quiere clonar y con la enzima ligasa, se forma ADN recombinante, en nuestro (ejemplo un plásmido quimera). - La molécula de ADN reconbinante producida in vitro se introducen en un organismo huesped, en nuestro caso en la bacteria. El resultado es que el gen que contine el plásmido se expresa en la bacteria. MADRID / SEPTIEMBRE 04. LOGSE / BIOLOGÍA / MICROBIOLOGÍA / OPCIÓN A / CUESTIÓN 5 OPCIÓN A 5. En relación con los microorganismos y sus aplicaciones: a) ¿Qué son los antibióticos?. (0,5 puntos). b) Indique dos grupos de microorganismos capaces de fabricar antibióticos. (0,5 puntos). c) Señale otras dos sustancias producidas por la industria farmacéutica, obtenidas mediante procesos biotecnológicos y su utilidad médica (0,5 puntos). Solución: a y b) Los antibióticos son sustancias químicas sintetizadas por organismos que, en soluciones diluidas, destruyen las bacterias y otros microorganismos (procariontes y eucariontes) e inhiben su desarrollo. En la actualidad algunas de estas sustancias se obtienen también sintéticamente a partir de hongos filamentosos y determinadas bacterias. c) La Biotecnología tiene, actualmente, su máxima expresión en la industria farmacéutica. Las técnicas de ingeniería genética reciben también el nombre de técnicas de ADN recombinante. Son un conjunto de técnicas desarrolladas para la manipulación de genes, cuyo objetivo fundamental es transferir estos genes de unos organismos a otros para obtener productos de interés u organismos con ciertas características deseadas. En el caso de los enfermos diabéticos el uso de la técnica de clonación de ADN recombinante para la fabricación de insulina por microorganismos es de máxima importancia. Esta técnica permite insertar en el genoma bacteriano el gen humano que codifica para la insulina, de modo que la bacteria sintetiza la hormona. MADRID / SEPTIEMBRE 03. LOGSE / BIOLOGÍA / GÉNETICA / OPCIÓN A / Nº 5 OPCIÓN A 5. Con referencia a la moderna biotecnología: a) Defina los siguientes conceptos: ingeniería genética, célula hospedadora, clonación y vector de clonación. (1 punto) b) Mencione cuatro aplicaciones prácticas de la ingeniería genética y ponga un ejemplo de cada una de ellas. (1 punto) Solución: a) En sentido amplio, la biotecnología es la disciplina basada en la utilización de los seres vivos o sus componentes, para realizar determinados procesos químicos con finalidad industrial o sanitaria. No obstante, en sentido actual, el término biotecnología deriva el de los importantes descubrimientos en el campo de la genética molecular, que han hecho posible el desarrollo de complejos procedimientos, denominados en conjunto ingeniería genética, y que permiten el aislamiento, modificación y expresión del material genético. Las técnicas de ingeniería genética reciben también el nombre de técnicas de ADN recombinante. Son un conjunto de técnicas desarrolladas para la manipulación de genes, cuyo objetivo fundamental es transferir estos genes de unos organismos a otros para obtener productos de interés u organismos con ciertas características deseadas. Las técnicas de ingeniería genética suelen comenzar con la denominada clonación, mediante la cual se lleva a cabo el aislamiento y replicación de determinados genes. La clonación del ADN facilita la secuencia del gen en cuestión y, mediante el código genético se puede determinar también la secuencia de aminoácidos de la proteína codificada por él. Además, la clonación implica la formación de un ADN recombinante, que es una combinación de segmentos de ADN que no se encuentran juntos de manera natural. Con frecuencia se emplean bacterias como células hospedadoras para el mantenimiento y amplificación (replicación) de moléculas de ADN recombinante procedente de otras bacterias o de organismos superiores. Los vectores de clonación son pequeños elementos genéticos (moléculas de ADN) utilizados para recombinar y replicar genes que faciliten el transporte de segmentos de ADN a otras células. Se utilizan diversas moléculas como vectores de clonación, por ejemplo, plásmidos, fagos y cósmidos. b) Las aplicaciones de la ingeniería genética aumentan cada día espectacularmente. Entre ellas destaca la síntesis de productos farmacéuticos, la terapia génica, la producción de vacunas recombinantes y la utilización biosanitaria de animales transgénicos. En la terapia génica se amplifica un gen no funcional o se reemplaza éste por uno funcional. También se usa para establecer protocolos en el tratamiento del cáncer. Actualmente, además, está permitiendo el desarrollo de plantas y animales completos, modificados genéticamente, introduciendo ADN clonado en óvulos fecundados de animales o bien directamente en células vegetales que se encuentran creciendo en cultivos. La aplicación de este tipo de técnicas en la agricultura tiene como objetivos: - Conseguir plantas resistentes a herbicidas. - Conseguir plantas resistentes a los insectos. - Protección de las plantas frente a infecciones víricas y microbianas. - Mejora del producto. La clonación puede permitir la creación de cultivos vegetales con características interesantes para el agricultor y el consumidor, pera la pérdida de biodiversidad puede traer grandes problemas. Hoy en día, la producción de insulina por bacterias es posible gracias a la ingeniería genética. La técnica de ADN-recombinante permite insertar en el genoma bacteriano el gen humano que codifica para la insulina, de modo que la bacteria sintetiza la hormona.