INEM SANTIAGO PEREZ Ser cultos para ser libres EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS FORMATO PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO Fecha Agosto 2016 Código: GRL-006 Versión: 4.0 INFORMACIÓN BÁSICA NOMBRE DE LA PRÁCTICA: PRÁCTICA No.: 1 ¿Cómo extraer e identificar los tipos de carbohidratos en algunos alimentos? ASIGNATURA: PROFUNDIZACIÓN QUÍMICA II- BIOQUÍMICA GRADO UNDÉCIMO TEMA DE LA PRÁCTICA: Identificación de carbohidratos. LABORATORIO A UTILIZAR: Laboratorio de química CONTENIDO DE LA GUÍA OBJETIVO GENERAL: • Comprobar mediante técnicas sencillas de laboratorio, que tipo de glúcidos están presentes en determinados alimentos de consumo humano tomando como base los conocimientos teóricos adquiridos en la asignatura de bioquímica. OBJETIVOS ESPECÍFICOS Diferenciar mediante reacciones cualitativas los monosacáridos de los disacáridos y polisacáridos. Reconocer y analizar las reacciones que se llevan en cada una de las pruebas con: Lugol, Fehling, Benedict. Identificar azucares reductores y no reductores Comprobar la existencia de amilasa en la saliva. INTRODUCCIÓN Los carbohidratos, sacáridos o hidratos de carbono son compuestos que tienen la formula estequiometrica (CH2O)n o son derivados de estos compuestos; se forman en la fotosíntesis y junto con la oxidación de ellos en el metabolismo constituyen el principal ciclo energético de la vida. Por crucial que resulte la generación de energía, no es la única función de los carbohidratos, muchos materiales estructurales biológicos son polímeros de carbohidratos como la celulosa de las plantas, las paredes celulares de las bacterias y los exoesqueletos de los insectos y artrópodos. Los carbohidratos son moléculas biológicas muy versátiles en sus tamaños, hay monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos, así como en su estructura química y sus propiedades. INFORMACION GENERAL HIDRATOS DE CARBONO Reciben este nombre por su fórmula general Cn(H2O)m. Es un nombre incorrecto desde el punto de vista químico, ya que esta fórmula sólo describe a una ínfima parte de estas moléculas. Desde el punto de vista químico son aldehídos o cetonas polihidroxilados, o productos derivados de ellos por oxidación, reducción, sustitución o polimerización. También se les puede conocer por los siguientes nombres: • Glícidos o glúcidos (de la palabra griega que significa dulce), pero son muy pocos los que tienen sabor dulce. • Sacáridos (de la palabra latina que significa azúcar), aunque el azúcar común es uno sólo de los centenares de compuestos distintos que pueden clasificarse en este grupo. Un aspecto importante de los Hidratos de Carbono es que pueden estar unidos covalentemente a otro tipo de moléculas, formando glicolípidos, glicoproteínas (cuando el componente proteico es mayoritario), proteoglicanos (cuando el componente glicídico es mayoritario) y peptidoglicanos (en la pared bacteriana) CONSULTA PREVIA (hace parte del PREINFORME) Revisar los siguientes conceptos ¿Cómo se clasifican los carbohidratos de acuerdo a la complejidad de su estructura los glúcidos? De ejemplos ¿Cómo se clasifican los carbohidratos de acuerdo al grupo funcional? De ejemplos Página 1 de 4 INEM SANTIAGO PEREZ Ser cultos para ser libres EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS FORMATO PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO Fecha Agosto 2016 Código: GRL-006 Versión: 4.0 ¿Cómo se clasifican los carbohidratos monosacáridos de acuerdo al número de carbono? De ejemplos ¿Cómo actúa la enzima Ptialina de la saliva en los carbohidratos? ¿Qué son azucares reductores? Reacción del Lugol, Reacción de Benedict, Reacción de Tollens, Reacción de Mollish, Reacción de Fehling METODOLOGÍA En los grupos organizados (máximo 4 estudiantes) en el laboratorio recoger el material, revisar que se encuentre en perfecto estado, desarrollar el procedimiento y entregar el material previamente lavado al docente del grupo. LIMPIAR SU SITO DE TRABAJO ANTES Y DESPUÉS DE LA PRÁCTICA MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR Materiales y Equipos Tubo de ensayo Pinza de Madera Gradilla Baño maría Vasos de precipitados Pipetas graduadas Propipetas Trípode Mechero Reactivos Agua Destilada Lugol Reactivo Fehling A y B Reactivo de Tollens (tentativo) Reactivo de Mollish (α naftol en alcohol 10%)H2SO4 concentrado. Solución de Fructuosa Solución de Glucosa Solución de Sacarosa Materiales Estudiante Papa Remolacha Azúcar blanca Maicena Cinta de enmascarar Guantes de látex o nitrilo Guantes Servilletas o toallas de cocina Bata blanca Rallador PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. CONSULTA DE EQUIPO ESPECIALIZADO. El uso de bata blanca, gafas de seguridad y guantes de nitrilo en el laboratorio es de carácter OBLIGATORIO La bata debe ser manga larga y debe usarse con los botones abrochados. En el caso de la preparación de algunos tipos de soluciones debe usarse la cámara protectora Revisar las fichas de seguridad de los reactivos a usar Informar inmediatamente ante cualquier accidente o irregularidad PROCEDIMIENTOS A. Preparación de las muestras. 1. Se coge la papa se pela y se ralla, se recoge se adiciona 2 mL de agua y se toma 2 ml de esta mezcla y se coloca en un tubo de ensayo(N.1) 2. Se realiza el mismo procedimiento con la remolacha (Tubo N.2) 3. Disolver 0,5 g. de azúcar en 10 mL de agua, guardar para realizar las pruebas. (Tubo N.3) 4. Disolver 1 g. de maicena en 20 mL de agua, tomar 2 mL en un tubo de ensayo. .(Tubo N.4) PRUEBA DE MOLISH 1. Tomamos los tubos N.1, N.2 y N.3 de las soluciones preparadas con papa y remolacha y la azúcar, se coloca 5 gotas de la solución de alfa naftol 2. Enfriar el tubo con agua 3. Agregar cuidadosamente 2 mL de ácido sulfúrico por las paredes del tubo 4. Se observa lo que sucede y se anotan los resultados en la Tabla N.1 5. Se adiciona 5 mL de agua fría 6. Se extraen 2 mL y se enfría, se adiciona 3 mL de hidróxido de amonio. 7. Se observa lo que sucede y se anotan los resultados en la Tabla N.1, para después realizar los análisis correspondientes PRUEBA 1. Recoger en un tubo de ensayo limpio un poco de saliva. 2. Agregar unos 5 ml de la disolución de maicena en el tubo que contiene la saliva. 3. Mezclarlo bien y rotularlo como Tubo A. 4. Agregar otros 5 ml de la disolución de maicena en otro tubo. Rotularlo como Tubo B 5. Adicionar unas gotas de Lugol a cada uno de los tubos anteriores. 6. Pon los dos tubos de ensayo al baño maría y mantenlos unos 10 minutos a una temperatura entre 37 y 40º C. 7. Observar lo que ocurre y anotar en la Tabla N.2, para después realizar los análisis correspondientes. Página 2 de 4 INEM SANTIAGO PEREZ Ser cultos para ser libres EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS FORMATO PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO Código: GRL-006 Fecha Agosto 2016 Versión: 4.0 PRUEBA DE FEHLING 1. Tomamos los tubos N.4, N.5, N.6, N.7 y N.8 colocar 1mL de Fehling A y 1 mL de Fehling B en cada uno 2. Adicionar en cada uno de los tubos respectivamente 1 mL de solución de azúcar (4), glucosa (5), sacarosa (6), lactosa (7) y fructuosa (8) 3. Observar los resultados y anotarlos 4. Colocar en baño maría entre 370 y 400 C los tubos durante 3 minutos 5. Observar los resultados y anotarlos en la Tabla N. 3, para después realizar los análisis correspondientes. PRUEBA DE TOLLENS (Tentativa) 1. Tomamos los tubos N.9 N.10 y colocar 2 mL de reactivo Tollens 2. Adicionar en cada uno de los tubos respectivamente 0,5 mL de solución de azúcar (9), glucosa (10) 3. Pon los dos tubos de ensayo al baño maría y mantenlos unos 10 minutos a una temperatura entre 37 y 40º C. 4. Observar los resultados y anotarlos BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA. 1. CHANG, R., "Chemistry the central science", 8a Ed, McGraw-Hill Book Co., 2003. • CONN Y STUMPF, Bioquímica Fundamental, México, Ed. Limusa 1978 2. LEHNINGER, Principios de Bioquímica, 4| Ed. Ed. Sarvier 3. Morrison, J., Boyd, R. (1976). Química orgánica: Bioquímica. Estados Unidos 4. Morales. (2005)Reconocimiento de los monosacáridos, disacáridos y de los polisacáridos, Universidad Nacional del Callao, Lima-Perú 5. J. Ernesto Luquet. (2010). Bioquímica: Carbohidratos, San Juan de Pasto 6. http://quimidiversion.blogspot.com/ ELABORÓ Firma Nombre : Aura E. Reyes G Fecha: Febrero 2016 REVISÓ Firma Nombre : Fecha: Febrero 2016 APROBÓ Firma Nombre : Fecha: TABLAS DE DATOS TABLA N.1 PRUEBA DE MOLISH RESULTADO SIN RESULTADO AL CARBOHIDRATO CALENTAR CALENTAR DIBUJO-FOTO Solución de papa (N.1) Solución de remolacha (N.2) Solución de azúcar (N.3) TABLA N.2 PRUEBA DE LUGOL CARBOHIDRATO RESULTADO DIBUJO-FOTO Solución de maicena con saliva (A) Solución de maicena sin saliva (B) Solución de azúcar TABLA N.3 PRUEBA DE FEHLIING CARBOHIDRATO RESULTADO SIN CALENTAR Solución de azúcar (4), Solución de glucosa (5) Solución de sacarosa (6) Solución de lactosa (7) fructuosa (8) Página 3 de 4 RESULTADO AL CALENTAR DIBUJO-FOTO INEM SANTIAGO PEREZ Ser cultos para ser libres EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS FORMATO PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO Código: GRL-006 Fecha Agosto 2016 Versión: 4.0 Solución de fructuosa (8) TABLA N.4 PRUEBA DE TOLLENS CARBOHIDRATO RESULTADO SIN CALENTAR RESULTADO AL CALENTAR DIBUJO-FOTO Solución de azúcar (N.9) Solución de glucosa (10) PREINFORME DE LABORATORIO GRUPO: ESTUDIANTES: NOTA: GRADO: OBJETIVOS MAPA CONCEPTUAL CONSULTA PREVIA RESULTADOS ESPERADOS BIBLIOGRAFÍA INFORME DE LABORATORIO GRUPO: ESTUDIANTES: NOTA: GRADO: OBJETIVOS RESULTADOS CUESTIONARIO 1.- ¿Qué diferencia existe entre azucares reductores y no reductores? 2.- ¿cómo puede justificar el hecho de que la glucosa, al igual que la fructosa de prueba positiva para azucares reductores? 3.- Consulte las estructuras en forma abierta o cerrada de los siguientes azucares y consulte de donde se extraen o en donde abundan y para que se emplean cada una de ellas: manosa; galactosa; Lactosa, fructuosa, sacarosa, maltosa, ribosa, ANÁLISIS DE RESULTADOS: Teniendo en cuenta los resultados encontrados en cada una de las prueba, analicé el por qué dieron positiva o negativa cada una de las pruebas realizadas, teniendo en cuenta lo expuesto en el marco teórico consultado. CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS. Si al realizar el análisis de resultados algunos de ellos no dieron como se esperaba, se deben plantear las posibles causas de error. CONCLUSIONES: Se establecen de acuerdo a lo que se logró aprender según los objetivos planteados en la práctica. APLICACIÓN PROFESIONAL DE LA PRÁCTICA REALIZADA Se establece qué importancia tiene la realización de este tipo de prácticas desde el punto de vista de las diferentes profesiones relacionadas con las ciencias. BIBLIOGRAFÍA Página 4 de 4