Esterilización del medio de cultivo

MANEJO INTEGRADO DE MOSCA BLANCA
CULTIVO DE LA HABICHUELA
Y
PRODUCCION ARTESANAL DE BIOPREPARADOS
Lecanicillium lecanii o Beauveria bassiana
Por:
MYRIAM ANGARITA GARCÍA
Ingeniera de Producción Biotecnológica
UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
INTRODUCCIÓN
El departamento de Santander no es ajeno a la problemática que ocasiona la mosca blanca
Trialeurodes vaporariorum en otras regiones de Colombia. En particular la Provincia de
Soto, Santander presenta poblaciones altas de este insecto, las cuales han provocado
perdidas considerables en términos de producción y calidad en cultivos como papa,
habichuela, fríjol, tomate y tabaco. Las prácticas culturales inapropiadas como: la no o
pobre destrucción de socas y las siembras escalonadas, así como la utilización excesiva de
productos químicos convencionales para su control, han generado resistencia en el insecto,
reducción de enemigos naturales, daño a la salud humana, desequilibrio ecológico en la
región y contaminación del agroecosistema.
El desarrollo de niveles altos de resistencia a insecticidas químicos y el impacto negativo de
los pesticidas sobre los enemigos naturales (parasitoides, depredadores y hongos
entomopatógenos) de las moscas blancas, promueve el estudio de microorganismos nativos
y el uso de extractos, entre otras; dentro de un manejo integrado que es la forma más
racional de luchar contra los insectos plaga.
El MIP consiste en la combinación e integración de todas las técnicas disponibles para
aplicarlas en forma armoniosa y mantener estos insectos en niveles que no produzcan daño
de importancia económica a los cultivos. Entre las técnicas disponibles en el manejo
integrado se encuentran el control cultural, la resistencia varietal, el control biológico,
control botánico y control químico.
MANEJO INTEGRADO DE MOSCA BLANCA
EL MIP permite racionalizar el uso indiscriminado de agroquímicos y consecuentemente
reducir los riesgos para agricultores y consumidores, el uso de mano de obra, y por ende
mejorar la producción y hacerla sostenible.
El MIP para habichuela es una tecnología generada por el ICA, la CDMB, el cual integra
los siguientes componentes:
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Destrucción de soca y residuos de cosecha
Aplicación de insecticida sistémico granulado al momento de la siembra
Uso de trampas amarillas pegajosas
Recolección y destrucción de hojas de poda
Utilización del umbral de acción nivel 3 de población y daño de mosca blanca
Uso de hongos entomopatógenos y extractos de ajo
Manejo racional de las enfermedades
DESTRUCCIÓN
DE
SOCAS
RESIDUOS DE COSECHA
Y
La soca es un criadero de plagas y
enfermedades. Una hectárea de soca de
habichuela nace más de 60 millones de
mosca blanca que van a atacar sus propios
cultivos jóvenes o invadir cultivos vecinos,
iniciando así un daño muy temprano. La
soca también es un foco de enfermedades
donde se multiplica la antracnosis, la roya,
cenicilla y esclerotinia.
Por lo tanto; inmediatamente después del ultimo
pase de cosecha:
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
Corte las plantas a ras de suelo y déjelas
secar por tres días.
Recoja la soca y amontónela en
diferentes sitios del lote
Saque los montones y quémelos.
APLICACIÓN DE INSECTICIDA SISTEMICO GRANULADO A LA SEMILLA O
AL MOMENTO DE LA SIEMBRA
APLICACIÓN DE UN INSECTICIDA SISTEMICO A LA SEMILLA.
Un día antes a la siembra, trate la semilla con el insecticida sistémico Gaucho
(imidacloprid) así:
Ponga la semilla en una bolsa plástica y agregue 2 cucharaditas dulceras de
l insecticida sistémico (Furadan).
Agite la bolsa hasta que todas las semillas queden impregnadas
con el insecticida.
Ponga a secar la semilla sobre un costal de cabuya a la sombra.
Con este tratamiento se controla bien la mosca blanca los primeros
25 días.
APLICACIÓN DE UN INSECTICIDA SISTEMICO AL MOMENTO DE LA
SIEMBRA
Prepare el sitio de siembra; ahoye con azadón o raye el surco. Coloque un gramo de
Furadan por sitio de siembra y deje caer tierra en el hueco de tal manera que el insecticida
quede tapado.
Lo anterior permite aplazar las primeras aplicaciones foliares al producto. También ayuda
a disminuir los daños de otras plagas como el minador y los tierreros.
USO DE TRAMPAS AMARILLAS PEGAJOSAS
Son una forma de control mecánico. Esto ayuda a que no aparezcan nuevos adultos y a
reducir la aplicación de costosos insecticidas.
La mosca blanca y los minadores son atraídos por el color amarillo, los insectos caen en
ellas y se mueren.
Elaboración de las trampas.
 Use plástico sencillo de metro de largo por ochenta centímetros de ancho
 Asegure los extremos del plástico a dos estacas de tal manera que el borde inferior
del plástico quede a unos 50cm del suelo. El, plástico debe quedar bien templado.
 Unte el plástico con valvulina 140 por ambos lados.
 Distribuya tantas trampas como pueda
 Cada quince días limpiar las trampas y aplicar de nuevo valvulina
 A medida que crece el cultivo suba la altura del plástico para que caigan más
adultos.
RECOLECCIÓN Y DESTRUCCIÓN DE HOJAS DE PODA EN EL CULTIVO


Recoja las hojas de poda en un costal a medida que vaya realizando esta práctica.
Escoja un sitio fuera del cultivo, amontone las hojas y quémelas.
Con esta práctica esta destruyendo ninfas de IV instar próximas a eclosionar y por lo tanto
regulando la población de mosca blanca.
UTILIZACIÓN DEL UMBRAL DE ACCIÓN – NIVEL 3 – DE POBLACIÓN Y
DAÑO DE MOSCA BLANCA
El momento indicado es el nivel 3 (la tercera parte de la
hoja cubierta de ninfas). Se observan pequeños puntos
blancos en la cara inferior de la hoja.
Cuando se presente esta situación se realizan las
aplicaciones de alguno de los hongos entomopatógenos
(B. bassiana ó L. lecanii) teniendo en cuenta las
recomendaciones dadas en él la primera parte de este
boletín y para la segunda aplicación use el extracto de
ajo.
COMO MANEJAR LAS ENFERMEDADES.
Ocho días antes de aplicar los entomopatógenos aplique de manera preventiva fungicidas
específicos como Benlate, Plantvax, Manzathe entre otros. De acuerdo a la época: si es muy
lluviosa hacer aplicaciones cada semana, si es tiempo seco cada 15 días. Según la
enfermedad que sé este desarrollando aplicar fungicida especifico en dosis recomendada.
Además de lo anterior realice BUENAS PRACTICAS DEL CULTIVO:
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
Utilización de semilla sana y certificada, Buena preparación del suelo
Adecuada fertilización, Practicas oportunas de control de arvenses, tutorado,
riego y podas, Cosechas oportunas, Destrucción inmediata de la soca
PRODUCCIÓN DE BIOPREPARADOS
L. lecanii ó B. bassiana
CONDICIONES DE HIGIENE PARA EVITAR CONTAMINACIÓN EN LOS
PASOS DE LA PRODUCCIÓN DE HONGOS EN LA FINCA.
Para evitar la contaminación de los cultivos de hongos entomopatógenos producidos en
fincas, se debe tener en cuenta las siguientes recomendaciones:
Preparación del medio de cultivo.
Emplee agua potable y hiérvala durante 30 minutos para prepar los medios de cultivo.
Utilice botellas muy bien lavadas con detergente e hipoclorito de sodio diluido en
proporción de 1 tapa del frasco por un balde de agua.
Luego de sacarlas de la suspensión de hipoclorito tiene que dejarlas escurrir y secar al aire.
Antes de manipular cualquier material, lávese bien las manos con agua y jabón.
Para evitar la contaminación del arroz con bacterias, debe adicionar el agua que agrega al
arroz en las botellas, ácido láctico en razón de 1 centímetro cúbico por cada litro de agua, o
adicionar 1 cápsula de cloranfenicol por cada 10 litros de agua.
Esterilización del medio de cultivo
Esterilice los medios de cultivo con la olla tapada; esto permite conseguir una mayor
temperatura y por tanto una mejor esterilización.
Después de que el agua hierva, deje los medios de cultivo esterilizando por 60 minutos
adicionales.
Para mayor eficiencia, en la olla (caldero de 50cm de diámetro por 50cm de alto) puede
colocar una base de botellas paradas y sobre ellas otras acostadas, pero ligeramente
inclinadas para evitar mojar los tapones.
De esta forma se pueden esterilizar 100 botellas de media de aguardiente (planas).
Siembra del medio de cultivo.
Póngase ropa limpia y antes de comenzar la siembra quítese las joyas y lávese las manos.
Después, desinféctese las manos con hipoclorito bien diluido o alcohol.
Para la siembra del hongo emplee un cuarto limpio, que no se use como bodega, ni sea
frecuentado por animales domésticos, ni en el cual circulen las personas.
La noche anterior a la siembra, limpie el polvo con un trapo húmedo con hipoclorito diluido
en agua e igualmente trapee el piso.
No barra antes de la siembra porque levanta polvo que queda suspendido en el aire, creando
un alto riesgo de contaminar los cultivos. Límpielo la noche anterior.
Una sola persona debe hacer la siembra. Si se colabora un ayudante haga la siembra sin
hablar.
Utilice un tapabocas.
Maduración de los cultivos del hongo.
El cuarto de maduración debe permanecer en lo posible cerrado para garantizar que la
temperatura se mantenga constante y así favorecer el crecimiento rápido del hongo.
Si la temperatura se mantiene por encima de 20ºC, los cultivos pueden estar completamente
desarrollados entre 10 y 15 días.
El hongo crece bien a luz constante, con luz alterna o en la oscuridad.
Durante el proceso, se debe limpiar las manos varias veces y desinfectar la superficie de
trabajo con alcohol o hipoclorito diluido.
COMO PRODUCIR Y MANEJAR LOS CULTIVOS MADRES O CEPA DEL
HONGO EN LA FINCA.
Materiales.
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Cepa del hongo
Botellas (vidrio transparentes y boca angosta, planas)
Arroz excelso
Algodón
Detergente y límpido
Mecheros
Alcohol 70%
Jeringas 5ml
Pinzas
Olla – balde – agua potable hervida
Adquiera cepa madre de un producto comercial biológico cuyo principio activo sea el
hongo B. bassiana ó L. lecanii (V. Lecanii). También lo puede adquirir directamente de las
oficinas principales del ICA ó Federación de Cafeteros.
Tome 10gr del producto y dilúyalo en 90ml de agua potable. Suspensión madre.
Preparación y esterilización del medio de cultivo (arroz)
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Lave muy bien la botella con abundante agua, límpido (hipoclorito de sodio) y
detergente.
Agregue a cada botella 50 gramos de arroz (4 cucharadas soperas rasas) y 60cm 3 de
agua hervida.
Tape las botellas con algodón sin llegar a sobrepasar el cuello
Esterilice las botellas utilizando uno de estos dos métodos: A baño maria dejando
60 minutos una vez comience a hervir. Si es en olla presión deje 15 minutos después
de que empiece a hervir.
Prepare entre 2 a 4 mecheros con alcohol, con el fin de esterilizar el medio donde va
a realizar la siembra y evite microorganismos que puedan producir contaminación.
Siembra del medio de cultivo.
La siembra del hongo requiere de mucho aseo. Lave muy bien sus manos y desinféctelas
con alcohol. Trabaje muy cerca de los mecheros.
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Encienda los mecheros y pase por la llama la aguja de la jeringa a usar, luego
enfríela en una mota de algodón humedecida con alcohol o límpido. Los cuellos de
las botellas también deber ser flameados al hacer la siembra.
Tome con la jeringa 3ml de la suspensión preparada, primero agítela y luego llévela
a la botella previamente flameada.
Para el caso de que adquiera cepa madre en bolsa o en botella con arroz, entonces
tome una pinza, pásela por el mechero, luego enfríelas en una mota de algodón con
alcohol o hipoclorito, flamee el cuello de la botella. En la botella o bolsa que tiene
arroz con el hongo, introdúzcala pinza y retire un trozo de arroz con hongo.
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Tape inmediatamente la botella con el tapón de algodón, o tape la suspensión
madre.
Siembre los 3ml tomados o el trozo de arroz con hongo en la botella, flaméela de
nuevo y tápela inmediatamente.
Realice el mismo procedimiento para las demás botellas.
Almacenamiento
Una vez haya sembrado el hongo y tenga bien tapadas las botellas, se deben almacenar en:
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

Estantes sin tener luz directa del sol y con mucho aseo (libre de polvo)
Después de los 25 días se puede aplicar en el cultivo
El hongo se puede conservar hasta por tres meses, después de este tiempo el hongo
empieza a perder viabilidad y patogenicidad.
Cepas madres
Revise periódicamente las botellas para chequear el desarrollo y retire las que presenten
contaminación.
De las botellas sembradas un alto número se contaminan; sin embargo, las botellas que
obtenga puras, les garantiza suficiente inoculo o semilla para la producción del hongo.
Las botellas que obtenga puras son cultivos madres o cepa. Cada botella pura que obtenga
le sirve para sembrar 100 o más botellas para aplicar.
Dependiendo de la producción del hongo que tenga en la finca, debe mantener disponibles
cultivos madres o cepa y programar su producción para tenerlas disponibles oportunamente
para realizar las siembras del hongo que va a aplicar en el cultivo.
Los cultivos madres o cepas puras. Obtenidas
después de completar su desarrollo, se pueden
almacenar en la nevera a 4ºC, hasta el momento
de emplearlos para hacer nuevas siembras, pero
no más de 3 meses.
Para la producción del hongo emplee siempre
cultivos puros de cepa o de segunda generación
con lo cual garantiza que el hongo sembrado en
las botellas crece vigorosamente, existen menos
oportunidades de contaminación.
Cómo actúa el hongo?
Los hongos B. bassiana ó L. lecanii es un organismo vivo que actúa sobre la mosca o sus
instares por contacto; por tanto, se requiere un buen sistema de aspersión de estos
insecticidas biológicos para obtener un buen cubrimiento de la hoja y sobre todo aplicar
sobre el envés de la hoja; ya que allí es donde el insecto plaga desarrolla todo su ciclo y
tiene sus hábitos. Las esporas del hongo deben caer sobre el insecto o las ninfas durante la
aspersión, o entrar en contacto con el insecto cuando inicia sus desplazamientos (adulto y el
I instar ninfal).
El ataque del hongo se reconoce por el desarrollo de una mota blanca sobre el cuerpo del
insecto o de las ninfas. Para B. bassiana el hongo es algodonoso suave, no se extiende
mucho; mientras que L. lecanii la mota blanca es algodonosa, expandida por el área foliar.
En algunos casos, la mota no es visible pero el insecto o el instar ya ha muerto, después de
un periodo lluvioso, debido a un incremento en la humedad ambiental aparece. Esta mota
esta conformada por la estructura del hongo llamada micelio, el cual contiene las esporas
que sirven para su diseminación en el cultivo.
Las esporas son como “semillitas” que se distribuyen con la ayuda del viento, movimientos
en el cultivo o con la lluvia, y cuando entran en contacto con otros adultos ó ninfas las van
a afectar causándoles la muerte.
Los insecticidas eliminan puntualmente una determinada población de adultos de mosca
blanca desapareciendo su efecto a los pocos días, los hongos actúan a más largo plazo y
afecta al insecto por mucho tiempo, constituyéndose así un aliado silencioso muy
importante en el cultivo, que pasa desapercibido para muchos pero está allí haciendo su
trabajo.
Dosis de los hongos
Los resultados de la investigación utilizando los
hongos como un componente de control en un
programa de manejo integrado de mosca blanca ha
mostrado que se puede lograr su establecimiento
usando dosis entre 5x108 y 1x109 esporas/ planta.
El establecimiento de los hongos en el cultivo puede
llegar a causar mortalidades permanentes que pueden
fluctuar entre un 30 a 50%, dependiendo de las
condiciones del cultivo y del clima.
Para hongos producidos en botellas, la cantidad de ella a utilizar puede variar de acuerdo a
la calidad y contenido de esporas del hongo. Una botella en rendimiento presenta en
promedio 3x109 esporas/gramo de sustrato, lo que equivale a una producción de 1.5x1011
esporas/botella, ya que una botella contiene 50gr de sustrato.
Lo anterior nos lleva a estimar que si vamos a asperjar con hongo producido en botellas una
hectárea de cultivo de habichuela, sembrada a una densidad de 8.000 plantas/ha, en la dosis
de 1x109 esporas/planta, se requieren 8x1012 esporas/ha, lo que significa que 27 botellas
producidas en forma artesanal, son suficientes para cubrir una hectárea.
Cuándo aplicar los hongos?
Los hongos deben aplicarse cuando el cultivo esta entre los 20 y 25 días después de
emergencia; donde en él ultimo estrato ya encontramos ninfas de II instar en desarrollo y
continuar su aplicación de acuerdo al umbral de acción del insecto plaga.
Con cuales equipos se puede aplicar el hongo?
El hongo se puede aplicar con cualquier equipo de aspersión convencional, como
aspersores de espalda, de motor y semiestacionarias.
Para aplicar el hongo se debe adicionar aceite agrícola emulsionable para que el hongo se
distribuya y se suspenda en el agua.
Cómo se prepara el hongo que es producido y comercializado en sustrato arroz?
 A la botella (biopreparado) agregue con una jeringa 10cc de aceite agrícola (carrier)
y un poco de agua. Agite bien la botella.
 El contenido de la botella debe ser filtrado con un colador fino o media velada.
Para evitar taponamiento de las boquillas de los equipos de aspersión. Se debe
agregar agua para retirar poco a poco el hongo del arroz.
 Lleve la premezcla a la bomba fumigadora y complete con agua
 Aplíquelo en presencia de alta humedad (primeras horas de la mañana o ultimas
horas de la tarde)
 Utilice boquillas de baja descarga y presiones adecuadas
 Evite mezclar el hongo con plaguicidas
 El afrecho que resulta de la cosecha del hongo se aplica al voleo en el cultivo.
Se puede mezclar el hongo con fungicidas e insecticidas?
Los hongos entomopatógenos no se deben mezclar con fungicidas cuyo principio activo sea
el oxicloruro de cobre, ya que este mata todas las esporas. En cuanto a los insecticidas
algunos inhiben toda su germinación o retrasan el desarrollo del hongo y otros lo inhiben
parcialmente. Los insecticidas Thiodan, Lorsban causan un 100% de inhibición en su
desarrollo. La reducción llega entre el 40 y 50% con los siguientes insecticidas Basudin EM
y Miral. Por lo tanto no se recomienda hacer dichas mezclas porque reducen la viabilidad y
el desarrollo de los hongos entomopatógenos.