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FECHA
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04/03/99

01/03/00

Agosto
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21/03/01
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Junio 01
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ANTEPROYECTO DE RESOLUCION OENO/SCMA/00/160/Et.5
CUANTIFICACION DEL NITROGENO TOTAL
LA ASAMBLEA GENERAL,
Visto el Artículo 5, apartado 4 de la Convención internacional de unificación de los
métodos de análisis y de apreciación de los vinos del 13 de octubre de 1954,
A propuesta de la Subcomisión de métodos de análisis y de apreciación de los
vinos,
DECIDE completar el Anexo A del Compendio de los métodos internacionales de
análisis de los vinos y de los mostos, con el método siguiente:
CUANTIFICACION DEL NITROGENO TOTAL SEGUN EL METODO DE DUMAS
(Mostos y Vinos)
1. CAMPO DE APLICACION
El presente método se aplica al análisis del nitrógeno total de los mostos y de los
vinos en la gama de 0 a 1000 mg/l.
2. DESCRIPCION DE LA TECNICA
2.1 Principio del método de Dumas
El análisis del nitrógeno total que se encuentra en una matriz orgánica
puede ser realizado por el método de Dumas (1831). El métodoconsiste en
una combustión total de la matriz en presencia de oxígeno. Los gases
producidos se reducen por medio de cobre y luego desecados; el CO 2 queda
retenido. El nitrógeno se cuantificapor medio de un detector universal.
2.2 Principio del análisis (figura n° 1)
- Inyección de la muestra y del oxígeno en el tubo de combustión a 940°C
(1) ;
- Combustión « flash » (2) ;
- La combustión de la cápsulacapsula(3) lleva temporalmentela temperatura a
1800°C ;
- Oxidación complementaria y retención de los halógenos sobre óxido de
cobalto cobáltico plateado y sesquióxido de cromo granular (4) ;
- Reducción de los óxidos de nitrógeno a N2 y retención de los componentes
azufrados y del exceso de oxígeno por medio del cobre a 700°C (5) ;
- Los gases presentes en el helio son los siguientes: N 2, CO2 et H2O (6) ;

- Retención de los elementos no dosificados: H 2O con anhidrona (perclorato de
magnesio
anhidro granular) (7) y del CO2 por medio de la ascarita
(hidróxido de sodiosobre silicio) (8) ;
- Separación cromatográfica del nitrógeno y del metano eventualmente
presente
como consecuencia de la toma de una alicuota demasiado
importante. (9) ;
- Detección sobre catarómetro (10) ;
- Registro de la señal y tratamiento de los datos (11).
11
6
He
1
10
2
7
3
5
8
9
4
Figura 1 : Esquema del principio del análisis
3. REACTIVOS
3.1 Nitrógeno (calidad técnica) ;
3.2 Helio (pureza 99,99994%) ;
3.3 Oxido de cromo (sesquióxdo de cromo en gránulos) ;
3.4 Oxido de cobalto (óxido cobalto-cobáltico plateado granulado)
;
3.5 Lana de cuarzo;
3.6 Cobre (cobre reducido en hilos) ;
3.7 Ascarita (hidróxido de sodio sobre silicio) ;
3.8 Anhidrona (perclorato de magnesio anhidro granular) ;
3.9 Oxígeno (pureza 99,995%) ;
3.10 Atropina ;
3.11 Clorhidrato de ácido glutámico;
3.12 Agua desmineralizada;
3.13 CápsulaCápsulas de estaño.
4. APARATOS
4.1 Centrifuga equipada de recipientes de 25 ml ;
4.2 Analizador de nitrógeno;
4.3 Crisol metálico;
4.4 Tubo de reacción de cuarzo (2) ;
4.5 Balanza de precisión entre 0,5 mg y 30 g a  0,3 mg ;
4.6 Porta-cápsula cápsulas;
4.7 Estufa ;
4.8 Aparato paracerrar las cápsulas;
4.9;Muestreador
4.10 Ordenador e impresora.
5. MUESTREO
Desgasificación por barboteo al nitrógeno (2.1) durante 5 a 10 mn, de los vinos
efervescentes. Los mostos son centrifugados (3.1) durante 10 mn a 10°C, a
4200 g.
6. MODO OPERATORIO
- Abrir el programa del aparato (3.1) ;
- Calentar el aparato (3.2).
6.1 – Principales parámetros analíticos
Analizador de nitrógeno (3.2)en las condiciones siguientes:
- gas vector : helio (3.2) ;
- crisol metálico (4.3) a vaciar cada 80 análisis ;tubo (4.4) de oxidación,
calentado a 940 °C, conteniendo óxido de cromo (3.3) y óxido de cobalto
(3.4)
mantenidos por lana de cuarzo (3.5). El conjunto tubo y reactivos debe ser
cambiado cada 4000 análisis.
- tubo (4.4) de reducción, calentado a 700 °C, conteniendo el cobre (3.6)
mantenido por lana de cuarzo (3.5). El cobre debe cambiarse cada 450
análisis;
- tubo de absorción conteniendo 2/3 de ascarita (3.7) y 1/3 de anhidrona
(3.8). Cada 200 análisis, la ascarita en bloque debe ser eliminada.Los
absorbentes se cambian completamente una vez al año.
-Cuanto mayor es la cantidad de materia orgánica que debe ser quemada,
más cantidad de oxígeno es necesario: el tiempo de apertura del circuito de
oxígeno (3.9) es de 15 segundos para el mosto y de 5 segundos para el
vino.
NOTA : los metales son recuperados para ser enviados a un centro de
destrucción o de reciclaje especializado.
6.2 – Preparación de la gama patrón
Preparar dos muestras de atropina (3.10) entre 4 y 6 mg. Pesarlas (4.5)
directamente en las cápsulas. La curva patrón pasa entonces por tres puntos
(origen=cápsula vacía).
6.3 – Preparación de autocontroles
Los autocontroles se hacen regularmente al principio y en medio de una
serie de análisis.
Los autocontroles son realizados por medio de de ácido glutámico bajo
forma de corohidrato utilizado en forma de solución de 600 mg/l de
nitrógeno en aguadesmineralizada (3.12).
Masa molar del ácido glutámico = 183,59
Masa molar del nitrógeno = 14,007
18359
.  0.6
= 7,864 g/l
14.007

Pesar (4.5) 7,864 g de ácido glutámico (3.11) y diluirlo en el agua
desmineralizada (3.12) c.s.p. 1 litro, para obtener una solución de 600 mg/l
de nitrógeno. Esta solución se diluye a la mitad, para obtener una solución de
300 mg N/l y esta solución se diluye a la mitad para obtener una solución de
150 mg/l.
6.4 Preparación de las muestras:
6.4.1 – En una cápsula (3.13), pesar (con una exactitud de 0,01 mg) 20
µl de mosto o 200 µl de vino con la balanza de precisión (4.5).
Repetir la operación tres veces por muestra;
6.4.2 – Anotar cada peso;
6.4.3 – Colocar a medida que se anota el peso las cápsulas en el porta
cápsulas(4.6) ;
6.4.4 – Poner las cápsulas en la estufa (4.7) regulada a ~ 60° C, hasta la
desecación completa del líquido (lo cual tarda por lo menos una hora)
;
6.4.5 Cerrar y aplastar las cápsulas en un aparato previsto para ello (3.8),
ponerlas en el muestreador(4.9) en el orden de los números.
7. EXPRESION DE LOS RESULTADOS
La impresora conectada al ordenador imprime directamente los resultados ylos
expresa en g/l con 4 cifras significativas después de la coma.
La lista impresa es conservada en la unidad enología el primer año, luego en
archivos.
Los resultados son inscritos a mano en el boletín de análisis.
8. CONTROL DE LOS RESULTADOS
Conexión indirecta por masa, temperatura y volumen.
9. BIBLIOGRAFIA
Dumas A. (1826) : Annales de chimie, 33,342.
Buckee G.K. (1994) : Determination of total nitrogen in Barley, Malt and Beer by
Kjeldahl procedures and the Dumas combustion method. Collaborative trial. J. Inst.
Brew., 100, 57-64.