MINISTERIO DE SALUD INSTITUTO NACIONAL DE SALUD CENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº38 Q.F. OFELIA VILLALVA ROJAS Q.F. JUAN ORTIZ BERNAOLA.Q.F. MIGUEL GRANDE ORTIZ Q.F. JACQUELINE ISASI ROSAS Q.F. DULA YANTAS VISURRAGA DR. VÍCTOR FIESTAS SOLÓRZANO 2007 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 1. IDENTIFICACION a. Código del Proyecto: 2-01-04-03-072 b. Investigadores Conducción, coordinación, ejecución y supervisión del proyecto - Q.F. Ofelia Villalva Rojas.- Etapa clínica, analítica y estadística. - Q.F. Juan Ortiz Bernaola.- Etapa clínica, analítica y estadística - Q.F. Miguel Grande Ortiz.- Etapa clínica, analítica y estadística - Q.F. Jacqueline Isasi Rosas.- Etapa clínica, analítica y estadística - Q.F. Dula Yantas Visurraga.- Etapa clínica. - Dr. Víctor Fiestas Solórzano.- Etapa clínica c. Personal de apoyo: - Lic. Maria Elena Tello Chirinos (etapa clínica), Centro Nacional de Control de Calidad (CNCC) - Instituto Nacional de Salud (INS) - Bach. Javier Rodríguez (etapa estadística), CNCC - INS - Personal de la Clínica Virgen del Rosario: 02 Médicos 02 Lic. en enfermería 04 Técnicos de enfermería 01 Tecnólogo médico d. Instituciones que participaron en la ejecución del estudio: - Centro Nacional de Control de Calidad - Instituto Nacional de Salud: Ejecución de la etapa analítica y estadística. - Clínica “Virgen del Rosario” (Jr. Castilla 976, Magdalena del MarLima): Ejecución de la etapa clínica e. Duración del estudio: 07 meses 2. RESUMEN Objetivo: Determinar la biodisponibilidad de dos presentaciones de Ibuprofeno 400 mg tabletas para establecer si el Ibuprofeno 400 mg tabletas genérico es bioequivalente al medicamento de referencia (Motrin 400 mg tabletas). Material y métodos. Estudio abierto, randomizado, cruzado, realizado en dos periodos con un tiempo de lavado de siete días, en 14 voluntarios sanos 2 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas con edades entre 21 y 48 años, los cuales fueron identificados y separados en dos grupos administrándoseles los medicamentos según diseño propuesto. La toma de muestra se realizó a las 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 5.0, 6.0, 8.0 y 12.0 hrs posteriores a la ingesta del medicamento. La extracción del principio activo fue en fase líquida/líquida y la cuantificación del mismo fue determinada mediante Cromatografía Líquida de Alta resolución acoplada a un detector de Masas (LC-MS/MS), empleando diclofenaco sódico, como estándar interno. Los parámetros farmacocinéticos que se compararon para determinar Bioequivalencia fueron: área bajo la curva (AUC) y concentración máxima (Cmax ) a un p<0.1. Resultados. Los valores en promedio encontrados son: AUCGénerio (0-t) = 86,85 (ug/mL x h) AUCReferencia(0-t) = 81,20 (ug/mL x h) AUCGénerio (0-) = 88,67 (ug/mL x h) AUCReferencia(0-) = 82,83 (ug/mL x h) CmáxGénerio = 16,90 (ug/mL) CmáxReferencia = 18,09 (ug/mL) Aplicando el análisis estadístico para determinar bioequivalencia, se encontró para AUC intervalos de 0.96 - 1.20 y para Cmáx intervalos de 0.85 - 1.14. Conclusión. Los intervalos encontrados para AUC y para Cmáx se encuentran dentro de los límites establecidos para Bioequivalencia: 0.80 – 1.25, por lo tanto el medicamento genérico es bioequivalente al producto de referencia. 3. INTRODUCCIÓN Para realizar la sustitución de medicamentos innovadores por medicamentos multifuentes (genéricos) o similares con nombres comerciales se debe contar con la evidencia científica basada en estudios tales como de equivalencia terapéutica in vivo (estudios de bioequivalencia) o in vitro (perfiles de disolución). Con los estudios de bioequivalencia se podría demostrar que el principio activo del medicamento multifuente tiene el mismo comportamiento 3 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas farmacocinético que el innovador, por lo tanto se considerarían intercambiables. En el consumo de fármacos en el mercado nacional, (Septiembre-2002), los anti-inflamatorios no esteroideos (AINEs) se encuentran en el 3er lugar de requerimiento, dentro de los cuales el Ibuprofeno es uno de los más consumidos, por lo cual se hace necesaria la verificación de su calidad y establecer su bioequivalencia con respecto al medicamento de referencia. Farmacocinética de Ibuprofeno.- El Ibuprofeno se absorbe en el tubo digestivo y la concentración plasmática máxima se alcanza aproximadamente entre 1 y 2 horas tras la ingestión. También se absorbe por vía rectal. Existe cierta absorción a través de la piel tras la aplicación tópica. El ibuprofeno se une en un 90 a un 99% a las proteínas plasmáticas y tiene una semivida plasmática de unas 2 horas. Se excreta rápidamente por la orina sobre todo en forma de metabolitos y sus conjugados por la orina se excreta alrededor de un 1 % de ibuprofeno inalterado y cerca de un 14% conjugado. La distribución a la leche materna si existe, parece ser escasa. 4. MATERIAL Y METODOS 4.1 MATERIALES a. Muestras - Medicamento de multifuente: Ibuprofeno 400 mg, tabletas, Lote 004176 y F.V. Abril 2009, adquirido en la farmacia de DIGEMID (Genérico nacional) - Medicamento de referencia: Motrin tabletas 400 mg, Lote U9553, de laboratorio Pharmacia Upjohn, F.V. 06 2007, (Química Suiza) b. Muestras Biológicas - Plasma normal - Plasma hiperlipémico. - Plasma hemolizado - Plasma obtenido de los voluntarios conteniendo ibuprofeno c. Estándares - Ibuprofeno USP, Lote: J1E043 4 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas - Diclofenaco sódico USP (estándar interno), lote H0B150 d. Solventes, reactivos y materiales - Acido fosfórico 85% - Hidróxido de amonio 25% - Acetonitrilo, grado HPLC - Hexano grado HPLC - Éter dietílico, p.a. - Metanol grado HPLC - Agua tridestilada, purificada - Tips descartables de 20 – 200 uL y de 200 – 1000 uL - Tubos descartables de vidrio de 13 x 100 mm - Tubos de centrífuga de polipropileno con tapa de 15 y 50 mL - Microviales de vidrio de 0.3 mL - Probetas de vidrio - Micropipetas automáticos de 50, 100, 200 y 1000 uL - Columna cromatográfica RP-18 (100 x 4,6 mm i.d.), 3u, VARIAN, MonoChrom. - Dispensador automático de 1mL – 5mL x 50 mL, Handy Step, Brand. e. Equipos - Equipo de cromatografía líquida Surveyor Thermo Finnigan (Thermo Electron Corporation) con detector espectrofotómetro de Masas TSQ Quantum Discovery Max (Termo Electrón Corporation), procesamiento de datos mediante software del equipo (Xcalibur); - Espectrofotómetro UV-Vis, HP 8453 - Disolutor automatizado, VK7025 VARIAN - Balanza analítica, Sartorius 215P Genius - Agitador vórtex, IKA MS1 - Baño ultrasonido, 9323-1, ELMA - Purificador de agua Toraypure LV-408, - Congelador -70ºC (Isotemp low temperature Fisher Scientific), - Microcentrífuga de velocidad variable (Sartorius modelo 1-15). - Equipo de filtración al vacío EMERSON. SA55NXGTE-4870 - Baño María, WB-22. Memmert - pH Meter Metrohm, 5 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 4.2 - Vaporizador rápido a nitrógeno RAPID VAP N2/48 LABCONCO - Congelador freezer -10 a -40°C, Solfarma METODOS 4.2.1 EVALUACION “in vitro” Las tabletas de ibuprofeno de los medicamentos multifuente y de referencia fueron analizados según la farmacopea de Los Estados Unidos (USP 29), para los ensayos de identificación del principio activo, contenido, disolución y uniformidad de contenido por variación de pesos (ver anexo 01); para el ensayo de peso promedio se usó la farmacopea británica (BP 2005), (ver anexo 01) y los perfiles de disolución se realizaron según las especificaciones de la Organización Mundial de la Salud (OMS) Reporte Técnico 937 - Informe 40, (2006). Se trabajó con 12 unidades de cada medicamento a pH: 1,2; 4,5 y 6,8. Se compararon mediante el factor de similitud f2, (ver anexos 02, 03 y 04). 4.2.2 EVALUACION “in vivo” 4.2.2.1 Etapa clínica a. Criterios de inclusión: Hombres y mujeres con edad entre 18 hasta 50 años. El voluntario debe tener un peso que no exceda el 10% de su índice de masa corporal. Sea sometido a una historia clínica y examen físico, ECG, y exámenes de laboratorio complementarios, siendo considerado saludable (cuando los resultados obtenidos de los exámenes se encuentran dentro de los rangos considerados normales). Aceptó y firmó libremente el consentimiento informado, después de que todos los elementos esenciales del protocolo hayan sido aclarados antes de la administración del medicamento. Los exámenes de ECG, despistaje de hepatitis B, hepatitis C y de VIH, sólo se realizaron en el pre-estudio, los demás exámenes se realizaron antes y después del estudio. b. Criterios de exclusión: 6 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 1. Si los resultados de los siguientes exámenes complementarios del laboratorio están fuera de los valores considerados normales (10%), a menos que sean considerados clínicamente irrelevantes: Examen físico, ECG. Análisis hematológico: hemoglobina, hematocrito, recuento diferencial de leucocitos, recuento de plaqueta. Análisis bioquímico: úrea, creatinina, bilirrubina total, albúmina, glucosa en ayunas, fosfatasa alcalina, GOT, GPT, colesterol total, triglicéridos, ácido úrico. Análisis serológico: hepatitis B, C, HIV Orina completa. Examen de heces (coproparasitario). 2. Los voluntarios han participado de cualquier estudio experimental o han ingerido cualquier droga experimental dentro de los 3 meses que anteceden al inicio de este estudio. 3. Tiene una medicación regular dentro de las 2 semanas que anteceden al inicio de este estudio, o inicia cualquier medicación una semana antes de iniciar el estudio, incluyendo medicamentos herbales. 4. Fue internado por cualquier motivo hasta 8 semanas antes del inicio de este estudio. 5. Tiene historia de abuso de alcohol o drogas ilícitas, o ingiere bebidas alcohólicas dentro de las 24 horas que anteceden al periodo de internamiento para iniciar el estudio. 6. Tiene historia de enfermedad hepática, renal, pulmonar, gastrointestinal, epiléptica, hematológica o psiquiátrica; tiene hipo o hipertensión de cualquier etiología que necesite tratamiento farmacológico; tiene historia de leve infarto del miocardio, angina y/o insuficiencia cardiaca. 7. El voluntario dona o pierde 450 mL o más de sangre dentro de los tres meses que anteceden al estudio, o que dona más de 1500 mL dentro de los 12 meses precedentes al estudio. 8. El voluntario ingiere más de 5 tazas de café o té por día. 9. El voluntario es fumador. 7 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 10. El voluntario sabe que tiene hipersensibilidad al Ibuprofeno; historia de reacciones adversas serias o hipersensibilidad a cualquier droga o presencia de alergia que necesite de tratamiento específico. 11. El voluntario tiene cualquier condición que lo impida de participar del estudio según criterio del investigador. 12. Resultado positivo de embarazo para una voluntaria mujer. c. Reclutamiento. La captación de los voluntarios se realizó por medio de invitación a estudiantes de universidades, personal que labora en el INS y sus familiares o amigos, a través de comunicados. Los interesados en participar en el estudio fueron registrados, evaluados y seleccionados. d. Diseño del estudio Se llevó a cabo un estudio de tipo abierto, randomizado, dos tratamientos, dos secuencias cruzadas en dos periodos. Con un tiempo de lavado de siete días entre periodos, donde cada voluntario recibió una tableta de ibuprofeno 400 mg de uno de los medicamentos por vía oral en dosis única en cada periodo, con 200 mL de agua, según el esquema de randomización. e. Aspectos éticos El protocolo del ensayo fue aprobado por el comité de ética en investigación del INS y fue conducido bajo los principios de la Declaración de Helsinki y sus revisiones de Tokio, Venecia, Hong Kong y Edimburgo. El Consentimiento Informado fue firmado por cada voluntario durante la selección, donde se les informó del diseño, objetivos, riesgos y beneficios del estudio. f. Confidencialidad. Toda la información obtenida durante el estudio referente al estado de salud del voluntario fue archivada en forma individual y está disponible solo para el personal médico y los investigadores del proyecto. Terminado el estudio cada voluntario recibió una copia de los exámenes de laboratorio realizados en el pre y post estudio, incluyendo a quienes se les practicaron los exámenes clínicos pero no cumplieron con los criterios de inclusión. 8 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas g. Internamiento de voluntarios. El internamiento de la Fase I se realizó el día 13 de octubre del 2006 y la Fase II el 20 de octubre del 2006, en la clínica “Virgen del Rosario”, donde los voluntarios pernoctaron desde la noche anterior del estudio, debiendo permanecer en ayunas a partir de las diez de la noche hasta 4 hrs. después de la ingesta del medicamento. Transcurrido este tiempo se les sirvió un desayuno leve y un almuerzo estandarizado. Después de 10 horas de la administración del medicamento, se le sirvió una cena estandarizada y fueron dados de alta después de la última toma de muestra, previa evaluación médica. Los voluntarios no ingirieron bebidas alcohólicas, café u otros alimentos conteniendo xantinas 48 horas antes y durante el estudio. h. Colecta de muestras de sangre: Antes de cada toma de muestra de sangre se evaluó la presión sanguínea, frecuencia cardiaca y la temperatura corporal. Después de 10 horas de ayuno (8.00 a.m.), se inició el estudio con una colecta de 25 mL de sangre, para control individual, curvas patrones, controles de calidad y validación pre-estudio. Las posteriores tomas de muestra fueron de 4 mL a los siguientes intervalos: 0,5 h; 1,0 h; 1,5 h; 2,0 h; 2,5 h; 3,0 h; 3,5 h; 4,0 h; 5,0 h, 6,0 h; 8,0 h; 12 h. después de la administración del medicamento, utilizando Edetato de potasio como anticoagulante. Las muestras de sangre se centrifugaron a 3500 rpm por 10 minutos, a temperatura ambiente. Se separó el plasma de cada muestra (aprox. 2,0 mL) y se almacenaron en un criovial a -20 °C. 4.2.2.2 Etapa Analítica a. Muestras de retención - Inventario Culminado el estudio se contó el total remanente de los medicamentos genérico y de referencia, los que han sido almacenados en el CNCC, a una temperatura entre 15°C – 25°C, con humedad controlada no mayor de 65% hasta la fecha de vencimiento indicada en su rotulado. 9 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Las muestras de plasma se encuentran almacenadas a –20ºC y permanecerán, hasta un año después de culminado el estudio. b. Procesamiento del plasma (extracción de Ibuprofeno) 1. Se toma 200 uL de plasma en cada tubo. 2. Se adiciona 0,05 mL de estándar interno (diclofenaco sódico 0.1 ug/mL) y se mezcla en el vórtex 10 s 3. Se añade 100 uL de solución ácida (ácido fosfórico 1.4 M), se mezcla en el vórtex por 10 s 4. Se añade 4 mL de la mezcla éter dietílico: hexano (80:20 v/v) y se mezcla en el vórtex por 40 s 5. Se congela a -70 °C por 10 minutos para separar las dos fases. 6. Se transvasa la fase orgánica a un tubo limpio. 7. Se evapora el solvente orgánico de los tubos usando corriente de nitrógeno a 37°C 8. Se reconstituye el residuo con 200 uL de fase móvil y se mezcló en el vórtex por 15 s c. Cuantificación del principio activo La cuantificación del principio activo en plasma extraído fue realizada en el cromatógrafo líquido acoplado a un detector de masas (LC-MS/MS) marca Thermo Finnigan, modelo TSQ Quantum Discovery Max (USA), empleando diclofenaco sódico, como estándar interno. d. Condiciones Cromatográficas: Columna cromatográfica RP-18 (100 mm x 4,6 mm i.d.), 3u, VARIAN, MonoChrom Flujo: 0,30 mL/min., Temperatura de la columna: 40°C, Temperatura del automuestreador: 4.0ºC, Volumen de inyección: 5 uL. Como fase móvil se empleó una solución de amoniaco, agua y acetonitrilo (0,35 mL:200 mL: 800 mL). 10 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Las muestras se analizaron por duplicado y se procesaron mediante el software Xcalibur Core Data System – versión 1,4 del equipo LCMS/MS. e. Desarrollo del método o Tiempo aproximado de la corrida: 4.0 min. o Tiempos de retención aproximados: Tiempo de Retención (min) Estándar Ibuprofeno (SRM de 204.91>161.02) 1.5 Diclofenaco (SRM de 294.91>249.91) 1.6 f. Validación pre estudio Se desarrolló utilizando plasma blanco contaminado con el principio activo (ibuprofeno) y el estándar interno (diclofenaco sódico). Se empleó tres controles de calidad (QCA: 0,1537; QCB: 1,7930; QCC: 17,9300 ug/mL). Para algunos parámetros se utilizó estándar blanco (plasma sin principio activo y sin estándar interno), estándar cero (plasma sin principio activo, con estándar interno). Evaluándose los siguientes parámetros: 1. Especificidad. Se determinó la habilidad del método analítico para diferenciar ibuprofeno y diclofenaco en presencia de otros constituyentes en la muestra extrayéndose por duplicado plasma hiperlipémico, normal y hemolizado, siguiendo el procedimiento de extracción. 2. Exactitud. Se comparó los valores obtenidos de los controles de calidad (QCA, QCB, QCC), con respecto a los valores reales de los mismos. 3. Precisión. La determinación de precisión intradía e interdía se realizó en los QCA, QCB y QCC por quintuplicado. 4. Recuperación. Se determinó al comparar las áreas de los picos en los QCA, QCB y QCC con las áreas obtenidas de las mismas en fase móvil. 5. Prueba del límite de detección (LOD). Se determinó la concentración más baja de Ibuprofeno que sea detectable, inyectándose en el equipo un estándar de Ibuprofeno en fase móvil, observándose que el pico del mismo sea tres veces la señal ruido. 11 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 6. Prueba del límite de cuantificación (LOQ). Se determinó la concentración más baja de Ibuprofeno que sea cuantificable, la cual debe ser cinco veces el LOD. 7. Linealidad. Fue realizada contaminando plasma blanco con ibuprofeno en nueve concentraciones: 0,05; 0,1; 0,2; 0,5; 1; 2; 5; 10 y 20 ug/mL. Se corrieron las muestras por duplicado 8. Prueba de contaminación del autoinyector (carry over): Se procesó el punto más alto de la curva (20ug/mL) y un estándar blanco (plasma sin analito), inyectándose cada uno por triplicado, en forma alternada, empezando por la muestra con el analito, seguido por el blanco. 9. Pruebas de estabilidad: Se determinó la estabilidad del Ibuprofeno en plasma en las condiciones de almacenamiento y manipulación de la muestra. Las muestras sometidas a estos ensayos fueron controles de calidad QCA, QCB y QCC. - Prueba de congelamiento y descongelamiento. Se realizó tres ciclos de congelamiento y descongelamiento del plasma con Ibuprofeno, a un intervalo de 24 horas, al término del cual se analizaron estas muestras (QCA, QCB y QCC) y se compararon los resultados con muestras frescas a las mismas concentraciones. - Estabilidad a corto plazo a temperatura ambiente. Se sometió a descongelamiento por seis horas a temperatura ambiente de las muestras (QCA, QCB y QCC) y se comparó los resultados obtenidos con muestras frescas a las mismas concentraciones. - Estabilidad a largo plazo.- Se comparó los resultados obtenidos de las muestras almacenadas (QCA, QCB y QCC) durante sesenta días con muestras frescas a las mismas concentraciones. - Estabilidad de las soluciones stock de ibuprofeno y de estándar interno. Se comparó los resultados obtenidos de las soluciones almacenadas durante siete días con soluciones recién preparadas. - Estabilidad en el automuestreador: Se comparó los resultados de muestras almacenadas (QCA, QCB y QCC) en el automuestreador por 24 horas. g. Análisis de las muestras de voluntarios 12 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Una vez que los resultados obtenidos en la validación pre estudio cumplieron con las especificaciones para cada parámetro, se procesaron las muestras de los voluntarios, las cuales se analizaron por duplicado, junto con una curva de calibración y controles de calidad (QCA, QCB y QCC), de acuerdo a la lista de inyección diaria. Todas las muestras correspondientes a un voluntario (primer y segundo periodo) se incluyeron en la misma lista de inyección. h. Etapa estadística Con los resultados obtenidos del análisis de las muestras se determinaron los parámetros farmacocinéticos, los cuales fueron sometidos a un análisis estadístico. i. Estimación de los parámetros farmacocinéticos. Los parámetros farmacocinéticos de las dos formulaciones de ibuprofeno se determinaron por el método compartimental de Wagner y Nelson en forma individual para cada período. j. Cálculo del área bajo la curva (AUC) El área bajo la curva fue calculada por el método de los trapecios (curva concentración – tiempo). k. Consideraciones estadísticas. Primero se aplicó el análisis de varianza (ANOVA), para cuantificar la variabilidad con la que contribuyen los factores de secuencia, período y tratamiento al diseño del estudio. Así mismo para cada uno de los factores se probó la hipótesis nula (H o) a fin de ver si la variabilidad en cada factor, influía en el diseño del estudio de manera significativa. Se evaluaron Cmáx y AUC para el medicamento de referencia y el multifuente aplicando el programa Microsoft Excel 2003, con un intervalo de confianza de 90%. Estos resultados fueron verificados con el programa STATA 7.0 y el programa de Bioeqyuivalence program for two – period cross – over studies, versión 3.7. 5. RESULTADOS 5.1 Etapa clínica 13 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Los voluntarios fueron examinados 2 semanas antes del primer periodo de administración de medicamentos y evaluados para determinar su elegibilidad. En aquellos que fueron incluidos en el estudio no se encontraron alteraciones clínicas ni anormalidades relevantes en el ECG. Los resultados de hematología, bioquímica y urianálisis en la mayoría de los voluntarios indicaron valores dentro de los rangos normales; así mismo, los resultados para Hepatitis B y C, VIH 1 y 2 fueron negativos. De esta manera, catorce voluntarios sanos de ambos sexos fueron incluidos en el estudio, presentando una edad promedio de 31 años (21 - 48), peso promedio de 64 kg (52 – 79), altura promedio de 1.61 m (1.47 – 1.73). Indice de masa corporal (IMC), (Ver anexo 06) La evaluación post-estudio incluyó además de una evaluación clínica, estudios de hematología, bioquímica y urianálisis Los resultados de los exámenes pre y post-estudio fueron incluidos en los CRFs, luego de la evaluación del investigador clínico 5.2 Etapa analítica 5.2.1 Validación pre estudio 1. Especificidad. En los cromatogramas de las muestras de plasma normal, hiperlipémico y hemolizado no se observó picos cromatográficos en los tiempos de retención correspondiente al ibuprofeno y diclofenaco. Cromatogramas de plasma normal Relative Abundance C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS219 RT: 0.00 - 3.00 0.22 100 0.29 0.45 0.64 11/25/2006 12:14:23 AM 0.91 TBN1 NL: 4.37E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] M S 0011106CC1QCS219 1.06 1.13 1.31 90 1.54 1.85 1.98 2.17 80 2.45 2.59 2.87 NL: 9.57E4 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 249.90-249.91] M S 0011106CC1QCS219 1.63 100 90 0.16 80 1.55 0.37 0.44 0.67 0.83 1.04 1.25 1.44 2.42 1.92 70 0.0 0.5 1.0 1.5 Time (min) 2.0 2.20 2.51 2.60 2.5 2.97 3.0 0011106CC1QCS219 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6 T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] 100 14 dance 80 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Cromatogramas de plasma hiperlipémico Relative Abundance C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS213 RT: 0.00 - 3.00 0.06 0.29 0.38 100 11/24/2006 11:52:22 PM 0.64 0.75 90 0.92 1.17 1.24 80 1.43 1.59 TBL1 NL: 6.94E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] M S 0011106CC1QCS213 1.78 1.92 70 2.03 2.17 2.33 2.52 60 100 2.89 NL: 8.83E4 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 249.90-249.91] M S 0011106CC1QCS213 0.16 90 0.72 0.86 0.98 0.35 0.47 1.25 1.48 1.65 80 1.83 2.06 2.21 70 2.42 2.49 2.78 2.97 60 0.0 0.5 1.0 1.5 Time (min) 2.0 2.5 3.0 0011106CC1QCS213 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6 T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] Cromatogramas de plasma hemolizado Relative Relative Abundance Abundance 100 C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS226 11/25/2006 12:40:06 AM TBH1 80 RT: 0.00 - 3.00 0.13 0.20 100 60 0.45 0.54 0.73 90 40 0.92 1.12 1.36 1.56 80 NL: 3.67E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] M S 0011106CC1QCS226 1.66 1.78 2.05 2.26 2.42 20 100 161.02 0 0.14 0.26 90 161.016 161.017 0.47 161.02 2.61 2.71 NL: 8.72E4 1.55 161.02 161.02 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 0.70 161.0180.90 1.11 161.019 1.23 80 161.0201.62 161.021 1.69 1.97 m/z 1.44 249.90-249.91] M S 161.022 161.023 161.024 0011106CC1QCS226 2.20 2.42 2.53 2.86 70 0.0 0.5 1.0 0011106CC1QCS226 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6 1.5 Time (min) 2.0 2.5 3.0 15 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Analito Ibuprofeno (n=5) CV (%) QCA (0,1537 ug/ml) 0,1612 0,1579 0,1606 0,1732 0,1634 3,61 QCB (1,793 ug/ml) QCC (17,9301 ug/ml) 1,5562 1,6123 1,5819 1,5905 1,7963 13,3280 17,1063 14,2918 13,0066 12,3124 5,93 13,36 2. P r e c isión: El coeficiente de variación (CV%) de las cinco alícuotas de QCA, Analito Ibuprofeno (n=5) CV (%) QCA (0,1537 ug/ml) QCB (1,7930 ug/ml) QCC (17,9301 ug/ml) Q 0.1586 1.7774 18.7749 B 0.1632 1.7846 20.5783 0.1446 1.9050 15.6866 0.1286 1.6994 20.4022 0.1490 1.6949 19.5278 9,09 4,81 10,45 C y Q C C, no debe ser mayor al 15%. Tabla 1 Precisión Intra-día 16 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Tabla 2 3. Precisión Inter-día Exactitud.- El valor medio para las cinco alícuotas de QCA, QCB y QCC, no debe ser mayor al 15% del valor nominal. Tabla 3 Exactitud 4. Recuperación. La recuperación del analito y del estándar interno no debe ser menor al 50%, siempre que cumpla con la precisión y exactitud. Analito Ibuprofeno QCA QCB QCC 0,1586 0,1632 0,1446 0,1286 0,1490 0,1488 1,7774 1,7846 1,9050 1,6994 1,6949 18,7749 20,5783 15,6866 20,4022 19,5278 Concentración 1,7723 obtenida Concentración Promedios de muestras Concentración 0,1537 1,7930 Analito QC Nominal En fase Extraídas nominal (ug/mL) de plasma 98,84 móvil Exactitud (%) 96,82 QCA Variación (%) I buprofeno QCB QCC Tabla 4 0,1537 -3,18 1,7930 17,9301 0,1433 0,1234 -1,16 1,7847 1,7412 16,1018 13,8123 R = Valor obtenid o/valor esperad o (100) 18,9940 Recuperación 17,9301 (%) 105,93 86,096 5,93 102,499 115,939 Recuperación 5. Límite de detección (LOD): Los blancos no presentan interferencias en los tiempos de retención de los picos correspondientes a los analitos. 17 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS236 11/25/2006 1:16:34 AM LODIBUFM Relative Abundance RT: 0.00 - 3.00 NL: 4.29E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] M S ICIS 0011106CC1QCS236 RT: 1.57 AA: 748005 100 80 0.11 0.22 0.57 0.71 0.85 60 1.10 1.31 1.70 1.94 2.19 2.28 2.36 2.66 2.75 NL: 4.27E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 249.90-249.91] M S ICIS 0011106CC1QCS236 RT: 1.56 AA: 1539895 100 50 0.09 0.28 0.46 0.0 0.70 0.88 1.09 1.19 0.5 1.74 1.34 1.0 1.95 2.16 2.27 1.5 Time (min) 0011106CC1QCS236 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6 1 Cromatograma T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] 2.44 2.60 2.0 2.86 2.5 3.0 de ibuprofeno en fase móvil 100 Relative Abundance 80 6. Límite de cuantificación (LOQ). El analito debe ser identificable y reproducible, con una precisión de 20% y exactitud de 80% - 120% 60 40 C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS240 11/25/2006 1:31:11 AM LOQIBUFM 20 Relative Abundance 0 161.016 RT: 0.00 - 3.00 161.02 161.02 161.017 161.018 161.019 161.02 161.020 161.021 RT: 1.55 m/zMA: 1281178 100 161.022 161.023 161.024 80 60 0.08 0.38 0.45 0.55 0.87 0.96 1.24 1.33 1.76 40 2.27 2.06 2.54 2.70 2.78 NL: 7.57E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 249.90-249.91] M S 0011106CC1QCS240 RT: 1.55 MA: 2465167 100 NL: 5.37E5 TIC F: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] M S 0011106CC1QCS240 50 0.23 0.0 0.40 0.65 0.86 0.95 0.5 1.14 1.84 1.95 1.33 1.0 1.5 Time (min) 2.19 2.34 2.0 2.56 2.79 2.5 3.0 Figura 2 Cromatograma de ibuprofeno en fase móvil 0011106CC1QCS240 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6 T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02] 100 Relative Abundance 80 Tipo de muestra Ibuprofeno LOQ, valor nominal (ug/mL) 0,0512 0,0570 60 40 Concentración obtenida (ug/mL) 20 Promedio (n=3) 0,0485 0,0590 0,0548 161.02 Exactitud (%) 0 161.016 161.017 Precisión (%) 161.018 161.019 106,99 161.020 161.021 m/z 10,13 161.022 161.023 161.024 18 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 7. Linealidad. Los resultados de la curva cumplen los siguientes criterios: a. Los puntos de la curva en el nivel LOQ tienen una desviación relativa menor a 20% de la concentración nominal declarada. b. Los otros estándares no cero tienen una desviación menor a 15% de la concentración nominal declarada. c. Todos los estándares no cero cumplieron con los criterios anteriormente señalados. d. El coeficiente de correlación de la curva es mayor que 0,95. Tipo de muestra (ug/mL) Concentración Exactitud Hallada (ug/mL) (%) Estándar Blanco - Estándar cero - CV % 0,0512 0,0470 91,83 6,02 0,1025 0,0942 91,93 5,95 0,2049 0,1724 84,14 12,18 0,5123 0,5156 100,64 0,49 1,0246 1,0313 100,66 0,46 2,0491 1,9136 93,39 4,84 5,1229 4,7595 92,91 5,20 10,2457 10,8073 105,48 3,77 20,4915 20,3150 99,14 0,61 Coeficiente de correlación 0,9987 Tabla 6 Linealidad 19 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 350,00 y = 14,0068x 300,00 R2 = 0,9987 Ratio 250,00 200,00 150,00 100,00 50,00 0,00 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 Concentración ug/mL Gráfico 1: Linealidad del Ibuprofeno 8. Prueba de contaminación del autoinyector (carry over): En los cromatogramas de las muestras blanco no se observó picos cromatográficos en el tiempo de retención correspondiente a ibuprofeno (estándar 20 ug/mL). 9. Pruebas de estabilidad : a. Prueba de congelamiento y descongelamiento. La variación de las muestras sometidas a congelamiento y descongelamiento no es mayor que 20% de las muestras frescas. b. T° del ensayo –20 ºC Analito Ibuprofeno Diclofenaco Promedio de Áreas ( n = 3) QCA Muestras frescas en plasma 20302767,2 3 Ciclos de congelamiento descongelamiento (72 hras) 19675688,2 QCB 165087848 183288474 11,03 QCC 1767278118 1763000661 -0,24 - 9434354 10696009 13,37 Tipo de muestra Variación (%) -3,09 Tabla 7 Prueba de congelamiento descongelamineto b. Estabilidad a corto plazo a temperatura ambiente (06 horas). La variación de las muestras sometidas a descongelamiento a 20 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas temperatura ambiente por seis horas no es mayor que 20% de las muestras frescas. T° del ensayo 20 ºC Analito Promedio de Áreas (n = 3) Tipo de muestra Muestras frescas en plasma QCA Ibuprofeno Diclofenaco Variación (%) 17654429 Muestras después de 06 hras 15132856 QCB 216750861 207094337 -4,46 QCC 2168296266 1949368944 -10,10 - 12519883 11338477 -9,44 -14,28 Tabla 8 Estabilidad a corto plazo a temperatura ambiente c. Estabilidad a largo plazo.- La variación de las muestras almacenadas durante sesenta días no debe ser mayor a 20% con respecto a las muestras frescas. T° del ensayo –20 ºC Analito Ibuprofeno Promedio de Areas ( n = 3) Tipo de muestra QCA Muestras frescas 2208733,5 Muestras después de 60 días 1846960,5 Variación (%) -16,38 QCB 21745674,67 24423660,67 12,32 QCC 222527962,2 230477405,7 3,58 - 712119,333 657643 -7,65 Diclofenaco Tabla 9 Estabilidad a largo plazo d. Estabilidad de las soluciones stock de ibuprofeno y estándar interno. No se observó variación mayor al 20% de las muestras almacenadas con respecto a las muestras frescas. Promedio de Areas , (n = 5) T° del ensayo 4.0 ºC Concentración referencial (ug/mL) Muestras frescas Muestras después de 07 días en refrigeración Promedio de variación (%) Ibuprofeno 10,00 138130933 120826832,8 -12,53 Diclofenaco 10,00 431640961 427569159 -0,94 Analito Tabla 10 Estabilidad de las soluciones stock de ibuprofeno y estándar interno 21 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas e. Estabilidad en el automuestreador: La descomposición no debe ser mayor al 20% de la concentración inicial. T° del ensayo –20 ºC Analito Tipo de muestra Ibuprofeno Diclofenaco Promedio de Areas ( n = 3) Muestras frescas Muestras de automuestreador Variación (%) QCA 2,1373 2,2115 3,4717 QCB 20,2122 21,0233 4,0129 QCC 165,7947 173,0057 1,0435 - Tabla 11 Estabilidad en el automuestreador 5.2.2 5.2.2.1 Análisis de datos Resultados farmacocinéticos La evaluación se realizó en doce de los catorce voluntarios, debido a que dos de ellos no cumplieron con lo establecido según el modelo de Wagner y Nelson. Para determinar los parámetros farmacocinéticos se empleó la concentración plasmática y el tiempo. Concentraciones plasmáticas promedio de Ibuprofeno 400 mg tabletas (n=12) Tiempo de muestreo (hras) 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 5,0 6,0 8,0 12,0 Medicamento (ug/mL) Multifuente Referencia 4,18 6,66 7,22 12,43 11,48 15,36 15,39 18,70 16,26 17,93 18,51 17,43 18,50 15,02 14,91 12,17 10,81 6,78 6,28 4,40 2,73 2,11 0,66 0,52 Tabla 12 Concentraciones plasmáticas de Ibuprofeno 22 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Resultados de los parámetros farmacocinéticos Parámetros Farmacocinéticos Medicamento Referencia Multifuente AUC(0-t) (ug/mLxh) 81,20 86,85 AUC(t-) (ug/mLxh) 82,83 88,67 18,09 16,90 Cmax (ug/mL) Tabla 13 Parámetros farmacocinèticos Concentraciones plasmáticas máxima promedio (ug/mL) de Ibuprofeno Voluntario Medicamento 1 Referencia 12,1042 Multifuente 10,9400 2 13,9021 25,5733 3 24,9400 15,3490 5 19,6637 16,8092 7 19,1109 18,4556 8 22,3771 15,0199 9 14,6491 17,7580 10 24,1004 16,8622 11 13,8778 24,2645 12 14,9886 15,1050 13 22,1859 17,3379 14 15,2052 18,9841 Promedio 17,705 18,0925 Valor máximo 25,57 24,94 Valor mínimo 10,94 12,1 Tabla 14 Concentraciones plasmáticas máxima promedio 23 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Concentración plasmática (ug/mL) Concentraciones plasmáticas promedio de Ibuprofeno 400 mg 25 GENÉRICO REFERENCIA 20 15 10 5 0 0 2 4 6 8 10 12 14 tiempo (h) Gráfico 3. Comparación de las concentraciones plasmáticas versus tiempo del medicamento multifuente y del de referencia. 5.2.2.2 Análisis estadístico: La bioequivalencia se estableció por la aplicación del cálculo estadístico, con un intervalo de confianza de 90% para la diferencia entre los valores promedios obtenidos para el producto de prueba Ibuprofeno 400 mg tabletas y el producto de referencia Motriz 400 mg tabletas, en cuanto a las variaciones del AUC de concentración - tiempo y de la Cmáx alcanzadas por cada formulación, después de la transformación logarítmica de los datos. Para el análisis se empleó: Concentraciones plasmáticas y tiempo. Sujeto Período Secuencia Tratamiento AUC0-t, (Area bajo la curva del tiempo 0 al tiempo t) AUC0- , (Area bajo la curva del tiempo 0 al tiempo infinito) Cmax, (Concentración plasmática máxima) Tmax, (tiempo que se alcanza la concentración plasmática máxima) Ke (Constante de eliminación del fármaco) 24 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas t½ (tiempo de vida media del fármaco) Variabilidad intersujeto Variabilidad intrasujeto La evaluación estadística de los datos farmacocinéticos mostró la equivalencia entre las tabletas de Ibuprofeno del producto multifuente con el de referencia para los parámetros de AUC y Cmáx, cuyos rangos de variabilidad se encuentra dentro de los intervalos de 0.80 a 1.25. Previa a la aplicación de los cálculos para bioequivalencia se aplicó el análisis de varianza (ANOVA) a los datos transformados al logaritmo natural, cuantificándose la variabilidad con la que contribuyen los factores de secuencia, período y tratamiento al diseño del estudio, encontrándose que ninguno influye de manera significativa. Los resultados para bioequivalencia con respecto a Cmáx y AUC se detallan en los siguientes Área Bajo la Curva (AUC) Intervalo de Confianza 90% 0,96 1,20 Límites 0,80 1,25 Resultado cuadros. Bioequivalente Tabla 15 Resultados de Área bajo la curva Concentración máxima (Cmáx) Intervalo de Confianza 90% 0,85 1,14 Límites 0,80 1,25 Resultado Bioequivalente Tabla 16 Resultados concentración máxima 5.2.2.3 Archivo de datos: Los datos generados de las etapas clínica y analítica del estudio están almacenados en un archivo central con los siguientes documentos: 25 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Procedimiento normalizado de operaciones Documento de aprobación del Comité de Ética Consentimiento informado de todos los voluntarios. Historias clínicas de los voluntarios, Exámenes clínicos a los voluntarios. Anotaciones clínicas del médico responsable. Documentación referida al control de calidad de los productos. Información técnica de cada uno de los métodos de cuantificación y determinaciones realizada a las muestras de plasma, incluyendo cromatogramas y reportes. 6. Documentación del manejo estadístico de los datos. DISCUSION Se utilizó la prueba t de Student para determinar que tan alejado están los valores encontrados de los límites especificados para bioequivalencia. El intervalo de confianza de la razón de AUC y Cmax del producto test y referencia se encuentran dentro de las especificaciones (80% – 125%) para bioequivalencia con un nivel de confianza del 90% (p>0,10). La comparación de la biodisponibilidad del producto multifuente y del producto de referencia, se realizó basado en los datos de concentración plasmática de Ibuprofeno en relación al tiempo, no habiéndose encontrado diferencias estadísticamente significativas entre los dos medicamentos , para las variables logotransformadas AUC (p>0,10), ni Cmáx (p>0,10). La aplicación de los criterios aceptados en la literatura, demostraron al comparar los medicamentos, un semejante perfil de concentración plasmática - tiempo; de la misma manera, la razón entre el AUC de concentración de Ibuprofeno en el tiempo y la razón entre la Cmáx obtenida con cada producto, estuvieron dentro de los límites de aceptación, tanto para los datos experimentales como para los resultantes de su transformación logarítmica. Finalmente, los resultados analíticos y su análisis estadístico de los mismos fundamentan la conclusión de bioequivalencia entre el medicamento multifuente Ibuprofeno tabletas 400 mg (Genérico Nacional) y el medicamento de referencia Motrin tabletas 400 mg del laboratorio 26 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Pharmacia Upjohn, para la velocidad y la cantidad de Ibuprofeno alcanzadas en el organismo, después de su administración en dosis única a 14 voluntarios sanos, de acuerdo con el diseño experimental. 7. CONCLUSIÓN Los resultados del estudio no mostraron diferencias significativas en los niveles de concentraciones plasmáticas después de la administración de las dos formulaciones de Ibuprofeno 400 mg tabletas. Por tanto, el diseño del estudio y la aplicación de los protocolos escogidos permitieron demostrar la bioequivalencia entre los productos. 8. Referencias Bibliográficas 1. CPMP (Committee for Proprietary Medicinal Products). Note for Guidance on the Investigation of Bioavailability and Bioequivalence. The European Agency for the Evaluation of Medicinal Products (1998). 2. Standard Operating Procedures “The determination of Ibuprofeno in Human Plasma by LC-MS-MS using Diclofenaco Potásico as the Internal Standard”. Cartesius Analitical Unit. Institute of Biomedical Sciences – USP. Sao Paulo – SP – Brasil. 3. British Pharmacopoeia 2002. 4. Harrison PRINCIPIOS DE MEDICINA INTERNA VOL 1 15 a. edición 2001 Publicado por McGraw-Hill Interamericana-División Medicina 5. 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Biodisponibilidad comparativa de cuatro formulaciones de amoxicilina en voluntarios sanos, después de una administración de dosis simple”. 11. Porta Valentina, Estudio de Interacción entre la ranitidina y el diclofenaco en voluntarios sanos después de la administración peroral de voltaren 50. Universidad de San Paulo – Facultad de Ciencias Farmacéuticas (1992). 12. Storpirtis Consiglieri, Biodisponibilidad y Bioequivalencia de medicamentos: aspectos fundamentales par el planeamiento y ejecución de estudios. Universidad de San Paulo – Facultad de Ciencias Farmacéuticas (1995). 13. CDER, Estudios de Biodisponibilidad y Bioequivalencia para productos farmacéuticos administrados oralmente, Consideraciones Generales, Centro de Evaluación e investigación de fármacos (CDER) - Octubre 2000. 14. Martindale, “Guía completa de consulta farmacoterapéutica” primera edición española (2003). Barcelona, España. 15. Ortiz J, Grande M, Isasi J, Validación de métodos analíticos para estudios en matrices biológicas, CNCC-INS, 2005. 16. Laboratorio de Biodisponibilidad y bioequivalencia, Elaboración de listas de inyección para estudios de bioequivalencia, CNCC-INS, 2006 17. Villalva O, Organización y planificación de estuarios de bioequivalencia, CNCC-INS, 2006. 18. Farmacopea de los Estados Unidos de Norteamérica edición 29, 2006. 19. Food and Drug Administration. Center for Drug Evaluation and Research (CDER). U.S. Department of Health and Human Services. Guidance for Industry. Bioanalytical Method Validation. FDA .USA. May 2001 20. WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations. Fortieth Report. WHO Technical Report Series 937. World Health Organization. Geneva 2006. 9. ANEXOS Anexo 01 Resultados de ensayos físico-químicos Anexo 02 Perfil de disolución a pH 1,2 28 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Anexo 03 Perfil de disolución a pH 4,5 Anexo 04 Perfil de disolución a pH 6,8 Anexo 05 Resultados de perfiles de disolución Anexo 06 Resultados de ensayos clínicos de los voluntarios Anexo 07 Signos vitales durante la toma de muestra Anexo 08 Concentración plasmática de voluntarios Anexo 09 Parámetros farmacocinéticas de medicamentos multifuente y de referencia Anexo 10 Esquema de randomización Anexo 11 Valores individuales de concentración (ug/mL) vs tiempo (min) (Gráficos) y parámetros farmacocinéticos (Tabla) Anexo 12 Análisis Estadístico 29 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 01 Resultados de ensayos físico-químicos Medicamento multifuente : Ibuprofeno 400 mg tabletas Lote : 004176 Medicamento de referencia: Motrin 400 mg tabletas Lote : V9553 Resultados Ensayos Especificaciones Identificación Ibuprofeno, método HPLC, USP 29 Positivo al principio activo Contenido de ibuprofeno, método HPLC, USP 29 Comparación de los contenidos de ambos medicamentos Peso promedio Disolución, método Espectrofotómétrico, UV-VIS, USP 29 Uniformidad de contenido por variación de pesos, USP 29 La cantidad hallada no debe ser menor a 90,0% ni mayor a 110,0% de la cantidad declarada La diferencia entre los porcentajes obtenidos no debe ser mayor a 5% Referencia Multifuente Positivo Positivo 428,53 mg/tab (107,13%) 422,25 mg/tab. (105,56%) 1,57% X = 589,35 mg X = 602,24 mg n = 20 unidades n = 20 unidades D1 = 98,19% D1 = 96,31% El porcentaje disuelto del D2 = 96,98% D2 = 99,88% Principio activo no debe ser D3 = 96,74% D3 = 97,56% menor a 80,0% de la D4 = 99,81% D4 = 100,55% cantidad declarada D5 = 96,15% D5 = 96,65% D6 = 101,39% D6 = 97,96% U1 = 108,03 % U1 = 105,42 % U2 = 107,21 % U2 = 106,64 % U3 = 105,76 % U3 = 105,85 % U4 = 107,96 % U4 = 105,20 % U5 = 109,56 % U5 = 104,85 % U6 = 106,39 % U6 = 104,02 % U7 = 106,49 % U7 = 106,96 % U8 = 106,62 % U8 = 104,87 % U9 = 107,69 % U9 = 105,43 % BP 2005 Los porcentajes encontrados no deben ser menores de 85,0% ni mayores a 115,0% y la DSR ≤ 6,0% U10 = 105,54 % U10 = 107,45 % DSR = 1,14 % DSR = 1,01 % 30 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 02 Perfil de disolución a pH 1,2 Medicamento Tiempo (min) Referencia Multifuente Promedio (%) Promedio (%) 5 3,58 1,29 10 6,94 2,19 15 8,78 3,38 30 9,13 6,17 45 8,90 8,33 60 9,84 10,01 75 9,29 11,12 Ibuprofeno 400 mg tabletas pH 1,2 30 Multifuente Referencia % disuelto 25 20 15 10 5 0 0 25 50 75 100 Tiempo (min) 31 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 03 Perfil de disolución a pH 4,5 Medicamento Tiempo Referencia Multifuente Promedio (%) Promedio (%) 5 7,14 2,99 10 14,27 6,13 15 19,10 9,37 30 25,66 16,51 45 27,63 21,14 60 28,42 24,61 75 29,01 27,10 (min) Ibuprofeno 400 mg tabletas pH 4,5 50 Multifuente Referencia % disuelto 40 30 20 10 0 0 25 50 75 100 Tiempo (min) 32 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 04 Perfil de disolución a pH 6,8 Medicamento Tiempo Referencia Multifuente Promedio (%) Promedio (%) 5 78,72 45,67 10 94,96 71,21 15 96,31 86,25 30 96,93 98,58 45 97,00 99,77 60 97,28 99,21 75 97,26 99,12 (min) Ibuprofeno 400 mg tabletas pH 6,8 100 Multifuente Referencia % disuelto 80 60 40 20 0 0 25 50 75 100 Tiempo (min) 33 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 05 Resultados de perfiles de disolución Medicamento multifuente : Ibuprofeno 400 mg tabletas Lote : 004176 Medicamento de referencia: Motrin 400 mg tabletas Ensayos comparativos Perfil de disolución pH 1,2; OMS Perfil de disolución pH 4,5; OMS Perfil de disolución pH 6,8; OMS Lote : V9553 Especificaciones Resultados Comparativos f2 (50% – 100%) f2 = 74,54% f2 (50% – 100%) f2 = 58,30% f2 (50% – 100%) (*) * La disolución a pH 6,8 para el medicamento de referencia y el de prueba se observa un porcentaje de liberación de principio activo superior al 85% a los 15 minutos, por lo cual no se aplica el factor de similitud f2. 34 26,70 26,31 23,53 23,56 25,81 24,06 24,80 21,41 24,39 26,08 23,22 24,56 1 2 3 5 7 8 9 10 11 12 13 14 Valores Normales IMC Vol 3.5 - 5 3,47 3,4 3,38 3,5 3,3 3,58 3,4 3,2 3,3 3,2 3,3 3,81 Albúmina (g/dL) Hasta 0,2 0,13 0,20 0,10 0,10 0,20 0,20 0,12 0,13 0,13 2,20 0,30 Bilirrubina directa (mg/dL) 0,13 Hasta 0,8 0,27 0,6 0,20 0,53 0,20 0,67 0,45 0,29 0,56 0,40 0,80 Bilirrubina indirecta (mg/dL) 0,41 Hasta 40 27 18 15 20 26 36 19 24 15 24 29 28 TGO (U/L) Hasta 41 22 13 13 17 20 57 19 29 12 17 26 38 TGP (U/L) 60 - 110 ♂ Hasta 115 ♀ Hasta105 70 78 73 82 88 77 78 81 74 73 84 Glucosa (mg/dL) 83 69 71 69 53 121 67 60 68 60 76 Fosfatasa Alcalina (U/L) 72 89 Pre-Estudio ♂ 13.0 18.0 ♀ 12.0 16.0 12,3 12,5 12,5 12,6 14,9 14,5 13,3 12,6 15,3 15,3 13,9 13,9 Hb (g/dL) ANEXO 06 RESULTADOS DE ENSAYOS CLINICOS DE VOLUNTARIOS Hasta 200 188 166 165 170 190 166 235 191 199 164 163 220 Colesterol (mg/dL) 150 - 199 70 60 105 201 66 87 121 54 42 114 68 151 Triglicéridos (mg/dL) ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 35 26,70 26,31 23,53 23,56 25,81 24,06 24,80 21,41 24,39 26,08 23,22 24,56 1 2 3 5 7 8 9 10 11 12 13 14 Valores Normales IMC Vol 3.5 - 5 4,42 4,66 4,59 3,96 4,75 5,03 3,57 3,96 3,88 4,46 4,07 4,81 Albúmina (g/dL) Hasta 0,2 0,16 0,25 0,18 0,15 0,19 0,17 0,15 0,12 0,16 0,23 0,3 0,12 Bilirrubina directa (mg/dL) Hasta 0,8 0,44 0,65 0,32 0,26 0,6 0,47 0,46 0,67 0,36 0,83 0,83 0,33 Bilirrubina indirecta (mg/dL) Hasta 40 19 20 28 18 31 34 14 24 18 21 31 27 TGO (U/L) Hasta 41 25 18 30 17 25 38 20 35 17 19 25 40 TGP (U/L) 60 - 110 ♂ Hasta 115 ♀ Hasta105 72 100 84 87 93 93 88 86 83 90 84 Glucosa (mg/dL) 92 68 75 69 59 125 71 63 71 68 74 67 Fosfatasa Alcalina (U/L) 72 Post-Estudio ♂ 13.0 18.0 ♀ 12.0 16.0 13,0 12,3 13,8 12,7 14,7 15,0 12,0 11,7 15,3 14,8 13,7 13,3 Hb (g/dL) ANEXO 06 RESULTADOS DE ENSAYOS CLINICOS DE VOLUNTARIOS Hasta 200 180 168 165 168 176 169 195 181 203 165 162 220 Colesterol (mg/dL) 150 - 199 95 61 110 95 82 156 134 112 79 136 73 160 Triglicéridos (mg/dL) ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 36 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 36,6 100/70 36,6 100/70 Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso 60 90/70 62 36,6 100/60 74 36,5 90/70 62 36,6 100/60 72 36,6 90/60 90/60 P.A. 37,2 36,8 36,8 Tº 62 60 60 37,2 92/60 92/60 Pulso P.A. P.A. 37 36,5 36,5 37 60 60 Tº 90/60 90/60 72 36,4 36,4 110/80 62 62 72 100/70 100/70 110/80 62 36,1 62 36,1 Pulso Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº 100/70 60 60 100/70 100/72 100/72 Pulso P.A. 59 36,5 36,5 Tº 36,5 52 52 60 90/60 90/60 Pulso P.A. 36,6 37 37 Tº P.A. 62 36,5 36,5 110/60 64 64 62 110/68 110/68 110/60 60 36,3 60 90/70 36,3 0.5 90/70 Basal Pulso Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Voluntario/Hora 1 36,6 64 100/60 36,4 56 100/80 37,1 64 98/60 36,7 64 98/60 37 60 100/80 36,6 60 90/60 36,8 68 90/60 36,3 52 100/70 36,5 58 110/60 36,3 62 100/68 36,6 61 90/70 36,9 64 110/60 36,4 60 110/68 36,4 60 90/70 1.5 36,7 74 100/60 36,4 58 100/80 37,2 64 90/70 36,5 64 90/60 37 56 90/70 36,5 59 100/60 36,5 68 90/60 36,5 56 100/70 37 60 100/60 36,7 58 100/68 36,5 64 100/70 36,7 61 100/70 36,0 64 110/70 36,5 62 100/70 36,7 62 100/60 36,6 56 90/70 37,4 59 100/50 36,6 64 90/60 36,9 56 100/70 37,2 61 90/60 36,8 68 100/60 36,5 60 100/60 36,5 62 100/50 36,9 54 90/60 36,7 60 100/70 36,7 60 100/70 36,4 60 110/70 36,4 60 100/70 2 PERIODO I 36,8 64 94/60 36,5 60 90/60 37,5 68 100/50 36,7 60 90/56 36,9 60 100/70 36,8 62 90/60 36,9 64 98/60 36,1 60 100/60 36,5 58 110/70 36,8 52 110/60 36,5 60 100/70 36,9 62 110/70 36,3 64 110/70 36,3 58 100/70 2.5 36,5 64 100/60 36,6 56 90/60 37,4 68 90/60 36,9 64 88/60 36,7 64 100/60 37 58 100/60 36,9 64 100/60 36,5 56 90/70 36,5 60 90/50 36,8 54 100/60 36,6 56 100/70 37 68 110/60 36,6 64 112/68 36,5 60 100,70 3 36,7 64 100/60 36,4 60 90/60 37,2 70 90/60 36,9 64 88/60 37 58 90/60 36,7 66 90/60 36,9 64 100/68 36,3 64 90/60 37 60 100/70 36,8 56 100/60 36,5 56 90/60 36,9 66 100/60 36,6 60 112/68 36,5 60 100/70 3.5 SIGNOS VITALES DURANTE LA TOMA DE MUESTRA 4 37,2 64 90/60 36,5 56 90/60 37,4 64 110/70 37 64 100/60 37 56 90/60 37 65 100/70 36,8 64 100/70 36,3 56 90/60 36,5 60 100/60 36,7 52 98/60 36,7 56 100/60 37 67 100/70 36,7 64 100/62 36,5 60 100/70 5 37 72 100/60 36,6 68 90/60 37,2 82 100/60 36,7 64 90/60 37 60 90/60 36,8 70 100/60 36,7 64 90/60 36,5 62 100/60 36,9 60 90/50 37 56 104/60 36,9 68 115/70 37,2 67 110/60 36,9 60 120/60 36,6 64 100/70 6 37,1 80 110/60 36,6 68 100/60 37,5 62 100/50 37,1 72 98/60 36,7 60 90/60 37 60 90/60 36,8 72 90/60 36,6 60 120/60 36,7 60 100/50 36,6 56 100/60 36,3 80 100/60 37 66 100/60 36,8 64 110/70 36,8 72 100/60 8 36,9 64 110/60 36,8 68 100/60 37,5 54 100/60 37 64 90/50 36,9 80 100/50 36,8 62 90/60 36,9 60 100/60 36,8 72 100/50 37,2 60 90/50 37,1 54 90/60 36,8 79 100/60 37,2 62 100/60 37 60 100/60 36,8 69 110/70 12 36,7 64 94/60 36,8 72 90/60 37,4 54 100/60 37 64 100/60 37,4 64 110/70 36,5 64 100/60 37,1 68 90/60 36,7 72 110/70 37 61 100/60 37 56 90/60 36,8 64 100/60 37,4 58 100/60 37,2 68 110/60 36,9 76 110/80 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 07 37 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso 90/60 64 36,2 100/70 64 36,2 100/70 68 37,3 95/60 64 36,5 110/80 64 36,7 96/60 62 36,2 100/60 58 36,3 100/60 74 37,2 95/60 64 36,5 90/60 67 36,7 100/70 90/60 P.A. 60 36,7 36,7 Tº 36,5 64 64 60 95/60 95/60 Pulso P.A. 36,5 36,3 P.A. 36 36,5 36,4 Tº 64 66 62 110/70 100/70 100/60 36,3 36,4 70 56 100/60 100/60 58 Pulso Tº Pulso P.A. Tº Pulso P.A. Tº Pulso 100/60 100/80 P.A. 66 100/70 37 Tº 36,6 68 36,5 62 Pulso 58 100/60 110/60 P.A. 36,6 68 Tº Pulso 36,6 120/60 120/70 68 78 36,5 68 36,5 0.5 110/70 Basal 120/85 36,7 P.A. Tº Pulso P.A. Voluntario/Hora 1 36,9 64 110/70 36,7 62 90/60 37,2 76 100/60 36,8 60 100/70 36,2 60 90/60 36,7 60 90/70 36,8 64 95/60 36,3 68 96/60 36,4 64 110/80 36,5 54 100/60 36,5 68 100/70 36,7 62 100/63 36,9 64 120/70 36,4 60 110/80 1.5 37 62 100/50 36,5 72 90/60 37,2 76 100/60 36,2 68 100/70 36,4 62 90/70 36 62 90/70 36,8 62 90/60 36,3 64 96/60 36,5 60 110/70 36,6 54 100/60 36,7 64 100/70 36,5 64 100/60 36,7 64 120/60 36,4 64 110/70 37 68 100/60 36,7 72 90/60 37,2 68 90/50 36,6 64 100/70 36,4 60 88/60 36,8 60 100/70 36,6 64 94/60 36,3 64 100/60 36,5 62 110/70 36,7 52 96/60 36,7 64 110/70 36,5 72 90/60 36,7 62 120/70 36,6 70 115/80 2 PERIODO II 36,8 64 100/50 36,8 64 100/60 37,1 72 100/50 36,4 62 105/70 36,4 62 90/60 36,7 62 100/70 36,9 64 95/60 36,5 68 100/60 36,6 64 110/80 36,7 52 100/70 36,5 60 100/70 36,8 68 90/60 36,7 68 120/60 36,4 62 115/80 2.5 36,9 68 90/50 36,6 72 90/60 37,2 72 90/50 37 60 105/70 36,6 60 90/60 36,4 64 95/65 37 72 100/60 36,9 68 110/70 36,7 64 110/80 36,5 52 110/70 36,7 64 110/70 36,5 64 97/60 36,4 64 120/70 36,6 68 120/80 3 37 72 100/60 36,8 64 100/60 37,3 80 100/60 36,8 68 110/70 36,5 60 90/60 36,7 66 100/70 37 64 90/62 36,5 68 100/60 36,7 60 110/80 36,6 50 100/60 36,6 60 100/70 36,5 68 100/60 36,7 60 120/60 36,6 64 115/80 3.5 SIGNOS VITALES DURANTE LA TOMA DE MUESTRA 4 37 68 100/60 36,7 68 90/60 37,2 76 100/60 36,9 60 100/70 36,5 62 100/70 36,6 64 100/70 37 64 90/60 36,6 70 100/60 36,9 70 110/80 36,6 54 110/60 36,5 62 105/80 36,5 68 92/60 36,8 60 120/70 36,4 64 115/80 5 36,9 80 110/60 37 72 90/60 37,2 76 100/50 37 80 105/70 36,4 60 90/60 36,5 64 105/80 36,8 72 90/60 36,4 68 110/70 37 68 110/80 36,5 52 106/70 36,7 64 105/70 37,0 68 100/60 36,7 64 126/70 36,6 80 120/80 6 37 72 110/70 37 68 100/70 37,4 76 100/60 37 60 110/80 36,5 64 100/60 36,3 68 100/75 36,5 80 100/60 36,6 64 90/60 36,8 70 120/80 36,6 52 90/60 36,6 62 110/70 36,8 64 90/60 36,7 68 100/60 36,8 66 110/80 8 36,1 72 100/60 37,2 72 100/60 37,5 78 110/60 37 70 100/80 36,7 68 90/60 36,4 64 100/70 37,3 78 100/60 37 70 96/60 37 60 120/80 36,6 52 100/60 36,7 58 110/80 37,4 72 100/60 36,7 64 110/62 36,7 68 120/80 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 38 12 37,5 76 110/70 37 72 90/60 37,5 76 110/70 36,8 78 110/80 36,7 68 90/60 36,2 76 110/70 37 68 110/70 36,7 72 100/60 36,2 72 120/80 37,3 64 110/70 36,5 68 110/80 37 72 100/60 37 70 100/60 37 68 120/80 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 08 Concentración plasmática de voluntarios Voluntario Tiempo (hras) 0 1 2 3 5 Referencia Prueba Referencia Prueba Referencia Prueba Referencia Prueba 0 0 0 0 0 0 0 0 0,5 2,7424 0,741 0,0675 16,6181 13,3618 1,0614 9,3763 0,3639 1,0 9,5702 0,888 0,1874 nd 14,4437 4,1760 15,1689 nd 1,5 10,8044 3,165 0,4068 24,6771 18,7347 10,9729 nd 5,0750 2,0 12,3117 8,310 8,5126 26,6598 22,7908 14,2568 18,3300 16,8529 2,5 16,1117 9,672 17,9689 16,5809 19,1499 16,1347 14,7230 20,1853 3,0 11,8241 13,176 21,1797 16,3618 15,7220 17,7549 17,4845 18,4827 3,5 10,1330 nd 22,5691 11,5705 11,0958 16,1665 17,9645 25,5913 4,0 10,9768 nd 15,4605 8,4895 5.00 13,6732 13,3837 19,5038 5,0 5,9112 16,108 10,7101 7,9970 7,3570 9,1960 10,2855 17,6289 6,0 3,7586 8,518 5,6193 3,0917 3,4910 6,5360 5,8804 15,1874 8,0 1,1858 2,761 2,6055 2,4020 1,5456 3,3760 3,3213 6,5272 12,0 0,4532 0,712 0,9349 0,5519 0,3546 0,7351 1,4714 2,3558 Voluntario Tiempo (hras) 0 7 8 9 Referencia Prueba Referencia Prueba 10 Referencia Prueba Referencia Prueba 0,5 7,7802 6,7712 14,6730 1,9257 0,9564 0,2456 2,1896 2,0832 1,0 19,4735 15,7553 22,8501 3,8044 8,2092 8,8061 13,0820 5,6775 1,5 18,2625 16,0316 23,5706 10,6890 14,8344 14,1473 18,7956 6,2094 2,0 19,8885 18,0027 18,4175 11,7737 13,6014 18,8421 25,9173 14,4543 2,5 16,8889 16,4713 17,2948 11,6671 10,8959 21,4048 28,7390 20,3884 3,0 19,3036 10,7120 12,5173 18,2449 nd 19,2288 28,4327 23,2184 3,5 9,8242 14,6187 10,8620 26,5274 nd 18,7122 22,3807 16,7743 4,0 12,1855 12,3715 9,6079 13,3142 11,3834 14,0083 15,5609 17,6895 5,0 7,1827 6,1517 5,1766 10,8640 6,9151 6,9646 nd 13,2638 6,0 4,3889 4,7628 2,8101 3,5174 4,8615 4,0198 5,9667 4,6014 8,0 3,0005 1,6178 1,2461 1,2567 1,5933 2,0303 2,5068 2,0261 12,0 0,6641 0,5800 0,1905 0,1641 0,4864 0,3320 0,3724 0,3170 39 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Voluntario 11 Tiempo (hras) 0 12 13 14 Referencia Prueba Referencia Prueba Referencia Prueba Referencia Prueba 0 0 0 0 0 0 0 0 0,5 1,4950 0,2849 7,3871 10,2173 18,6744 1,5638 1,1727 8,3383 1,0 6,4787 1,2373 9,1150 13,9888 20,1393 6,3913 10,3961 11,4909 1,5 11,2561 1,0352 nd 15,1616 23,2386 10,5752 13,7318 19,9688 2,0 nd 0,7852 15,4826 17,8877 29,3196 19,7697 21,1784 17,0708 2,5 13,1157 13,0890 17,9798 15,3711 22,6046 18,2398 19,6894 15,8743 3,0 13,6089 38,4973 17,3367 14,8585 15,9026 16,7381 18,3788 14,7915 3,5 16,6056 32,8569 12,4388 15,7820 16,1096 14,7477 15,2236 10,1477 4,0 14,5535 32,6723 8,6950 12,4460 13,9529 11,8651 9,9533 7,9639 5,0 4,8677 20,7172 7,5049 7,6487 7,3222 8,9622 1,3070 4,1717 6,0 3,4340 11,2872 3,3352 4,1845 5,9479 5,7368 3,2881 3,8672 8,0 1,1034 4,6677 1,5121 1,3540 3,7975 3,0727 1,9039 1,6663 12,0 0,2068 1,0464 0,3674 0,4412 0,5493 0,4991 0,1665 0,2103 nd.- No disponible. Estos datos no fueron considerados por tener interferencias durante la corrida cromatográfica debido a una contaminación del plasma a esos tiempos. 40 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 09 PARAMETROS FARMACOCINETICOS DE MEDICAMENTOS MULTIFUENTE Y DE REFERENCIA Medicamento multifuente Voluntario ABC(0 - 12 hrs) ABC(0 - inf.) Cmáx Tmáx ka ke t 1/2 1 74,503 76,2711 10,94 2,56 0,38 0,40 1,72 2 93,8694 95,4558 25,57 0,75 3,37 0,35 1,99 3 81,1148 83,1486 15,35 1,86 0,76 0,36 1,92 5 123,9662 131,7495 16,81 2,85 0,40 0,30 2,29 7 77,7693 79,4496 18,46 1,15 1,77 0,35 2,01 8 72,5401 72,8614 15,02 1,78 0,62 0,51 1,36 9 80,949 81,7375 17,76 1,57 0,92 0,42 1,65 10 84,5481 85,2549 16,86 1,83 0,66 0,45 1,55 11 122,1408 124,6476 24,26 1,83 0,70 0,42 1,66 12 79,8378 80,9405 15,11 1,91 0,67 0,40 1,73 13 80,6952 81,9013 17,34 1,62 0,88 0,41 1,67 14 70,2061 70,6786 18,98 1,13 1,54 0,45 1,56 Promedio 86,8450 88,6747 17,7049 1,7367 1,0558 0,4017 1,7592 CV % 20,68 22,05 22,47 33,44 79,48 13,96 14,33 Medicamento de Referencia Voluntario ABC(0 - 12 hrs) ABC(0 - inf.) Cmáx Tmáx ka ke t 1/2 1 60,99 62,2319 12,10 1,73 0,86 0,37 1,89 2 75,87 79,0591 13,90 1,74 1,00 0,29 2,37 3 83,32 84,1699 24,94 0,82 2,70 0,42 1,66 5 96,95 103,4302 19,66 0,78 3,85 0,23 3,05 7 88,95 90,9602 19,11 1,37 1,37 0,33 2,10 8 80,81 81,2314 22,38 1,09 1,62 0,45 1,53 9 63,87 65,1961 14,65 1,35 1,29 0,37 1,87 10 109,4182 110,2200 24,10 1,62 0,80 0,46 1,49 11 62,0306 62,4790 13,88 1,58 0,84 0,46 1,50 12 70,3194 71,3242 14,99 1,51 1,08 0,37 1,90 13 112,194 113,6549 22,19 1,74 0,83 0,38 1,84 14 69,6342 69,9586 15,21 1,67 0,69 0,51 1,35 Promedio 81,1964 82,8263 18,0921 1,4167 1,4108 0,3867 1,8792 CV % 21,74 22,01 24,87 24,48 66,93 20,49 24,90 41 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 10 Esquema de Randomización SUJETO Nº 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 PERIODO I Fecha: 14-10-2006 T T T T R T R R T R T T T R PERIODO II Fecha:21-10-2006 R R R R T R T T R T R R R T T= Medicamento multifuente: Ibuprofeno 400 mg, tabletas, Lote 004176 y F.V. Abril 2009, adquirido en la farmacia de DIGEMID (Genérico nacional) R= Medicamento de Referencia: Motrin 400 mg tabletas, Lote U9553, de laboratorio Pharmacia Upjohn, F.V. 06 2007, (Química Suiza) 42 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas ANEXO 11 Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V01 Vol 1 Concentración (ug/mL) 25 Multifuente Referencia 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 74.5030 76.2711 10.94 2.56 0.40 1.72 60.9942 62.2319 12.10 1.73 0.37 1.89 43 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V02 Vol 2 Concentración (ug/mL) 35 Multifuente Referencia 30 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 93.8694 95.4558 25.57 0.75 0.35 1.99 75.8668 79.0591 13.90 1.74 0.29 2.37 44 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V03 Vol 3 Concentración (ug/mL) 25 Multifuente Referencia 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 81.1148 83.1486 15.35 1.86 0.36 1.92 83.3187 84.1699 24.94 0.82 0.42 1.66 45 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V05 Vol 5 Concentración (ug/mL) 30 Multifuente Referencia 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 123.9662 131.7495 16.81 2.85 0.30 2.29 96.9489 103.4302 19.66 0.78 0.23 3.05 46 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V07 Vol 7 Concentración (ug/mL) 25 Multifuente Referencia 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 Tiempo (h) 12.5 15.0 Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 77.7693 79.4496 18.46 1.15 0.35 2.01 88.9455 90.9602 19.00 1.37 0.33 2.10 47 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V08 Vol 8 Concentración (ug/mL) 30 Multifuente Referencia 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 72.5401 72.8614 15.02 1.78 0.51 1.36 80.8096 81.2314 22.38 1.09 0.45 1.53 48 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V09 Vol 9 Concentración (ug/mL) 30 Multifuente Referencia 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Prueba Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 80.9490 81.7375 17.76 1.57 0.42 1.65 63.8860 65.1961 14.65 1.35 0.37 1.87 49 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V10 Vol 10 Concentración (ug/mL) 30 Multifuente Referencia 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 84.5481 85.2549 16.86 1.83 0.45 1.55 109.4182 110.2200 24.10 1.62 0.46 1.49 50 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V11 Vol 11 45 Multifuente Referencia Concentración (ug/mL) 40 35 30 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 122.1408 124.6476 24.26 1.83 0.42 1.66 62.0306 62.4790 13.88 1.58 0.46 1.50 51 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V12 Vol 12 Concentración (ug/mL) 25 Multifuente Referencia 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 79.8378 80.9405 15.11 1.91 0.40 1.73 70.3194 71.3242 14.99 1.51 0.37 1.90 52 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V13 Vol 13 35 Multifuente Referencia Concentración (ug/mL) 30 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 80.6952 81.9013 17.34 1.62 0.41 1.67 112.1940 113.6549 22.19 1.74 0.38 1.84 53 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h) V14 Vol 13 35 Multifuente Referencia Concentración (ug/mL) 30 25 20 15 10 5 0 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 Tiempo (h) Parámetros Farmacocinéticos Parámetros ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL) ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL) Cmáx Tmáx Ke T1/2 Ibuprofeno Multifuente Referencia (Método de los trapecios) Log - Lineal (Método de los trapecios) Log - Lineal 70.2061 70.6786 18.98 1.13 0.45 1.56 69.6342 69.9586 15.21 1.67 0.51 1.35 54 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Anexo 12 Análisis Estadístico Ibuprofeno vs. Motrin Análisis paramétrico de los datos transformados a ln para evaluar Cmáx Prueba de ANOVA para diferencias entre tratamientos en datos transformados a ln. P = 0.05 Razón geométrica de las medias = 98.43 % Intervalos de confianza al 90% . Efecto tratamiento (razón de medias): 84.85 % - 114.18% Dos pruebas T de una sola cola para valores transformados a logaritmo: - P( 0.80 < r < 1.25 ) = 1.0 - P( r <= 0.80 ) = 0.0 - P( r >= 1.25 ) = 0.0 Ibuprofeno vs. Motrin Análisis paramétrico de los datos transformados a ln para evaluar ABC Prueba de ANOVA para diferencias entre tratamientos en datos transformados a ln. P = 0.05 Razón geométrica de las medias = 107.31% Intervalos de confianza al 90% . Efecto tratamiento (razón de medias): 120.00 % 96.00% - Dos pruebas T de una sola cola para valores transformados a logaritmo: - P( 0.80 < r < 1.25 ) = 1.0 - P( r <= 0.80 ) = 0.0 - P( r >= 1.25 ) = 0.0 55 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Bioequivalencia Ibuprofeno vs. Motrin ANÁLISIS DE VARIANZA Ln AUC Suma de cuadrados Grados de Libertad Cuadrados mínimos F p 0.632582 11 0.05751 2.690604 0.065075 0.166537 1 0.16654 3.573403 0.088012 Sujeto(secuencia) SSC 0.466045 10 0.04660 2.180488 0.117445 SSI=SSS+SSC 0.000000 0 0.00000 0 0 Intra-sujetos Formulation SSF 0.000000 0 0.00000 0 0 0.029868 1 0.02987 1.397425 0.264502 Periodo SSP 0.085728 1 0.08573 4.010945 0.073054 Residuales SSR 0.213734 10 0.02137 0.000000 0.000000 SE 0.0597 Total SST 0.961911 23 0.04182 0.000000 0.000000 n 12 Suma de cuadrados Grados de Libertad Cuadrados mínimos F p 0.719511 11 0.065410 1.625232 0.226309 0.128293 1 0.128293 2.169984 0.171493 Sujeto(secuencia) SSC 0.591218 10 0.059122 1.468987 0.277156 SSI=SSS+SSC 0.000000 0 0.000000 0.000000 0.000000 Intra-sujetos Formulation SSF 0.000000 0 0.000000 0.000000 0.000000 0.001507 1 0.001507 0.037456 0.850415 Periodo SSP 0.106553 1 0.106553 2.647496 0.134772 Residuales SSR 0.402466 10 0.040247 0.000000 0.000000 SE 0.08 Total SST 1.230038 23 0.053480 0.000000 0.000000 n 12.00 Fuente de Variación Entre Sujetos SSI Secuencia SSS LnCmax Fuente de Variación Entre Sujetos SSI Secuencia SSS 56 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Bioequivalencia : Ibuprofeno vs. Motrin ANÁLISIS DE BIOEQUIVALENCIA Voluntario Lncmaxtest Lncmaxref LnT-LnR 13 5 1 2 7 3 9 11 8 12 10 14 2.392426 3.241420 2.853016 2.821974 2.731115 2.915606 2.709383 2.824944 2.876949 2.943386 3.188829 2.715357 3.099642 2.978586 2.493205 2.631889 2.950212 3.216473 2.684440 2.630449 3.108168 2.707383 3.182212 2.721953 -0.707216 0.262834 0.359811 0.190085 -0.219096 -0.300867 0.024942 0.194495 -0.231219 0.236002 0.006617 -0.006596 Voluntario LnAUCtest LnAUCref LnT-LnR 13 5 1 2 7 3 9 11 8 12 10 14 4.405515 4.880902 4.375123 4.288559 4.445646 4.258143 4.334294 4.558663 4.420629 4.403513 4.825491 4.393714 4.130868 4.370196 4.432837 4.177400 4.134831 4.267236 4.733167 4.638897 4.510422 4.397302 4.702478 4.247904 0.274647 0.510707 -0.057715 0.111159 0.310815 -0.009093 -0.398873 -0.080234 -0.089793 0.006211 0.123012 0.145811 LnT(1) - LnR(2) Razón Test/Ref SE two tailed t(0.05,10) IC90% antiLn Limits squared IC limits Resultado LnT(1) - LnR(2) Razón Test/Ref SE two tailed t(0.05,10) IC90% antiLn Limits squared IC limits Resultado -0.164293 1.1418 1.2500 0.8485 0.8000 0.01758056 0.02699221 Bioequivalente 0.070555 1.073103 0.059684 1.812462 0.178730 -0.037621 1.20 1.25 0.96 0.8 0.031945 0.001415 Bioequivalente (2) LnMedioCmaxRef (1) LnMedioCmaxTest SE, Error estándar ( LnCmax ) : SE, Error estándar ( LnAUC ): -0.015851 0.984274 0.081901 1.812462 0.132592 0.0819 0.0597 57 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 10. Efecto o impacto de los resultados obtenidos El haber realizado este estudio, nos permite conocer que el medicamento multifuente a demostrado que alcanza la misma velocidad y concentración del principio activo que el medicamento de referencia; por lo tanto se está asegurando la misma respuesta terapéutica en el paciente que la que se obtendría con el innovador, logrando de esta manera poner al alcance de la población este medicamento genérico de mucho menor costo que el innovador y a la vez que satisfaga las exigencias de calidad y eficacia. Se comprende entonces que este medicamento multifuente puede ser intercambiable, tal es así que es bioequivalente al producto de referencia o de marca y que puede ser empleado en vez de este en la práctica clínica. 11. Estrategias de divulgación El presente informe será presentado al Director General del Centro Nacional de Control de Calidad y a las Direcciones de la OGITT, OGAT del Instituto Nacional de Salud (INS), para su evaluación respectiva. El mecanismo de su publicación estará sujeto a los medios de publicación y divulgación con los que cuenta el INS. 58 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas Firmas de los investigadores: ------------------------------------Q.F. Ofelia del Rosario Villalva Rojas --------------------------------------Q.F. Miguel Angel Grande Ortiz -----------------------------------------Q.F. Juan Jesús Ortiz Bernaola -----------------------------------------Q.F. Jacqueline Inés Isasi Rosas ---------------------------------------- ------------------------------------------ Q.F. Dula Dina Yantas Visurraga Dr. Víctor Fiestas Solórzano Chorrillos, 02 de abril del 2007 59 ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas 60