COPEG

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PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN
DE FILTROS MILLIPORE PARA FILTRACIÓN
DE MEDIOS-USO DE FILTRO DE MEMBRANA
1.0
OBJETIVO:
Describir los procedimientos necesarios para el Uso de Filtro de Membrana.
2.0
ALCANCE:
El alcance de este procedimiento incluye dar a conocer los requerimientos
necesarios para el uso de Filtro de Membrana que debe tomar en cuenta el
Personal del Laboratorio.
3.0
PROCEDIMIENTO:
Paso
Descripción
Responsable
3.1
Encender el gabinete de bioseguridad por lo menos 30
minutos antes de iniciar el filtrado y desinféctelo por
dentro y por fuera con solución de alcohol yodado.
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
3.2
Lavarse las manos y brazos con abundante agua y jabón,
secarlas y desinfectarlas con alcohol al 70%.
3.3
Desinfectar con alcohol yodado los frascos, tapas y todo el
material que se van a utilizar en el filtrado y envasado de
la solución. Ubíquelos dentro de la cámara.
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
3.4
Ese material debe ser esterilizado antes de introducirlo en
la cámara 15 minutos, a 121° C y a 15 lbs. de presión.
3.5
Ajuste con la llave o herramientas los tornillos del filtro,
asegurándose que queden bien apretados para evitar que
una vez se inicie el proceso de filtración, la solución se
derrame por las hendiduras del filtro. Coloque el extremo
de la manguera que esta forrada en la olla de filtrado y
ajústela con hilo.
3.6
Ubique el soporte en el centro de la cámara.
Retire
papel del soporte de metal y coloque la campana en
manguera de la parte inferior del filtro, ajustándola con
pinza, sin tocar por ningún motivo los bordes de
campana.
el
la
la
la
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
3.7
Coloque el extremo de la manguera de la parte superior
del filtro, que está forrado, en la salida del envase que
contiene los 5 litros de medio por filtrar y ajústela con hilo
pabilo.
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
Código:
PO-LAD -13
Revisión: 01
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo
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PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN
DE FILTROS MILLIPORE PARA FILTRACIÓN
DE MEDIOS-USO DE FILTRO DE MEMBRANA
Paso
Descripción
Responsable
3.8
Conectar la manguera de la bomba de vacío a la entrada
de la olla de filtrado. Esta bomba inyecta aire creando
así una presión positiva que impulsa el medio a través de
la manguera superior, atraviesa la membrana del filtro y
sale por la manguera inferior que en su extremo tiene
conectada la campana de vidrio.
Personal de la
Sección de
Cultivo Celular
3.9
El filtro no debe caerse durante el procedimiento de uso.
Si esto sucede se deberá preparar nuevamente.
3.10
Añadir en la olla la solución a filtrar la cual debe haber
sido filtrada previamente de 3 a 4 veces en filtro whatman
No.1.
3.11
Cerrar la tapa de la olla y encender la bomba de vacío.
3.12
A medida que va saliendo el medio filtrado, ya estéril, se
va depositando en frascos de 500 ó 1000 ml
3.13
La filtración debe tratarse con suma esterilidad y asepsia
por lo que se debe trabajar con sumo cuidado evitando
tocar bordes y sacar las manos de la cámara.
3.14
Después del último filtrado, tomar unas gotas del medio
que esta en la campana para realizar la prueba de
esterilidad del medio de cultivo producido. Colocar de 2 a
3 gotas de medio en caldo sabouraud y tioglicolato. ( 2
viales de cada uno)
Apagar todos los aparatos, recoger todo el equipo y
material utilizado y desinfectar el gabinete de seguridad.
3.15
3.16
3.17
Código:
Desarmar el filtro Millipore, revisar su membrana la cual
debe estar intacta como prueba que los 5 litros de medio
fueron bien filtrados. Si la membrana está rota, quiere
decir que la filtración no se efectuó adecuadamente y por
lo tanto, el Filtro Millipore debe preparase, esterilizarse e
iniciar el proceso nuevamente.
Una vez se haya terminado el proceso de filtrado, tanto el
filtro millipore como el envase de 5 litros, deben ser
lavados sólo con agua destilada y puestos a secar antes
de volver a ser utilizados.
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4.0 DOCUMENTOS DE REFERENCIA
5.0 HISTORIAL DE MODIFICACIONES
FECHA
MODIFICACIONES
11/06/07
Se cambió de alcohol yodado a solución de alcohol yodado en el
paso 3.1 y 3.3. En el paso 3.2 debe cambió de alcohol yodado a
alcohol al 70%. Se especificó el paso 3.3
En el paso 3.4, se cambió el tiempo de esterilización a 15 minutos.
En el paso 3.5 se cambió la palabra pinza por llave y se mejoró la
redacción. Se modificaron los pasos 3.6 al 3.9 y se incluyeron los
pasos del 3.9 al 3.17.
Código:
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