Clase 22 c. Desarrollo de Innovaciones Tecnológicas AGBT 2015 nanoanticuerpos camelidos.pdf

Tecnologia VHH
Anticuerpos Monoclonales Recombiantes
Que pasó despues de Milstein?
Dra VivianaParreño
Bioquimica Morón
Investitigadora adjunta CONICET
Labortatorios de Virus Entericos Instituto de Virologia
INTA
Hamers-Casterman
IgG de los camélidos
IgG de cadena pesada
Fracciones IgG2 (bisagra larga)
e IgG3 Bisagra corta)
(25-45% de IgG totales en suero)
IgG convencional
Fracción IgG1
(55-75% de IgG totales
en suero)
IgG1
IgG2 – IgG3
VHH monoclonal recombinante
-15 kDa: pequeño tamaño
-1 sola cadena polipeptidica
- Hidrosolubles
Guanacos
Vicuñas
Llamas
Alpacas
C. Hamers-Casterman y col,1993, Nature
poseen anticuerpos
de cadena pesada
Poseen 4 isotipos de Inmunoglobulinas: IgM,
IgA, IgD e IgG convencionales (IgG1) y de
cadena pesada (IgG2 e IgG3)
Camello
Bactriano
Figure 2. Simplified vertebrate phylogenetic tree emphasizing those taxa possessing singledomain Igs or TCRs.
Flajnik MF, Deschacht N, Muyldermans S (2011) A Case Of Convergence: Why Did a Simple Alternative to Canonical Antibodies
Arise in Sharks and Camels?. PLoS Biol 9(8): e1001120. doi:10.1371/journal.pbio.1001120
http://www.plosbiology.org/article/info:doi/10.1371/journal.pbio.1001120
VHH propiedades
CDR1
 Pequenó tamaño (15kDa)
 1 sola cadena polipetídica polypeptide chain
 alta resistencia fisico-quimica
CDR2
CDR3
• Temperatura
• Refolding
 Elevada afinidad y especificidad (nanomolar)
VHH
h
CH2
CH3
s-s
s-s
M
s-s
Camel extra S-S
llama extra S-S
L
Figure 3
FR 1
CDR 1
FR 2
CDR2
s-s Canonical disulfide bond
FR 3
CDR3
FR 4
Propiedades de los VHH
Las moléculas VHH combinan propiedades de un anticuerpo monoclonal convencional con
propiedades de drogas de pequeño tamaño
Al igual que los Ac Monoclonales...
Al igual que las drogas de pequeño tamaño...
=
=
-Acceden a hendiduras en receptores
-Acceden a sitios activos de enzimas
Afinidad
Especificidad
Toxicidad
-Acceden a epitopes ocultos para
Anticuerpos convencionales
-Penetran con facilidad los tejidos
-Atraviesan la barrera hematoencefálica
Además...
-Fáciles de producir y purificar
-Pueden expresarse en varias plataformas
-Administración por vía intravenosa, oral, tópica etc
-Se pueden modificar
*Por ingeniería genética (multimeros y fusión a otras proteínas)
*Químicamente
Direccionamiento de
Terapia génica
Purificación de proteínas
Estudios intracelulares
Kits diagnósticos
Terapia de infecciones
Diagnóstico por imágenes
Aplicaciones potenciales
de los Anticuerpos
recombinantes
monoclonales VHH
Terapia anti-cancer y
Enfermedades autoinmunes
Leches inmunes
Nanosensores
Anti-caries
Anti- caspa
Nanoanticuerpos VHH anti Rotavirus
con propiedades polineutralizantes in
vitro y actividad protectiva in vivo
contra la diarrea por Rotavirus Humano
Lorena Garaicoechea
ROTAVIRUS ES LA PRINCIPAL CAUSA DE DIARREA EN NIÑOS MENORES A
CINCO AÑOS DE EDAD A NIVEL MUNDIAL
(Tate, Burton et al. 2012)
Este patógeno entérico causa anualmente
2500 millones de casos de diarrea en niños <5 años
25 millones de consultas médicas ,
2 millones de hospitalizaciones,
y aproximadamente 400.000 muertes
anuales en lactantes y niños pequeños
En Argentina:
42% de las hospitalizaciones en niños
menores a 3 años de edad se deben a
Rotavirus
Genotipo prevalente en niños a nivel mundial G1P[8]
P-tipos: P[4], P[6], P[7], P[8], P[9], P[14]
G-tipos: G1, G2, G3, G4, G5, G6, G8, G9, G10, G12
UN Millenium
Development Goal 4:
disminución de la tasa de
mortalidad infantil en
2/3, 1990 - 2015
Prevención


Inmunidad pasiva  Anticuerpos por via materna
Inmunidad activa  Vacunación: buena efectividad y
cobertura. Alcance?, situación en los países en desarrollo?,
presión selectiva?
Características
Productor
N° Serotipos
Serotipos incluidos
Formulación
N° de dosis
Edad de administración

Rotarix®
Rotateq®
GSK Biologicals
Merck Sharp & Dohme
Monovalente
Pentavalente
P1A[8]G1
P7[5]G1, P7[5]G2, P7[5]G3,
P7[5]G4, P1A[8]G6
Monodosis, liofilizada, reconstituir
con buffer
Monodosis, líquida
Dos
Tres
2 y 4 meses
2, 4 y 6 meses
No existen tratamientos específicos contra RVH.
VP7
Outer Capsid
Glycoprotein
Induces neutralizing Ab
(27 G-types)
VP2
Inner capsid
VP6
Intermediate Capsid
 Relativamente conservada
 Altamente inmunogenica
 Anticuerpos Conventionales contrao
VP6 no poseen acrividad
neutralizantes
VP4
Outer Capsid
Induces neutralizing
Ab(35 P-types)
Hemaglutinin
 IgA mAb neutralizacion intracelular
por transcitosis
Subcore (VP1, VP3
ARNpol complex
Estructura de la proteína VP6
VP6
Monomero
Monómero
VP7 (G tipos)
En contacto
con VP2
Trímero
Interacciones
-3 Cl-3 Zn++
-12 Ca++
-Con VP7
-Con VP4
-Con VP2
Potrero para llamas que se acondicionó en el año 2005 - INTA Castelar
Técnico Agropecuario Diego Franco
Dra Gisela Marcoppido
Manejo de la llama
Producción de Anticuerpos VHH: Vacunación de la llama
Si el volúmen de la dosis es elevado, la misma se puede dividir en dos aplicar en distintos puntos
Sangrado de la llama
Evaluación de la respuesta inmune a la vacunación
ELISA
ELISPOT
dil 1/2
anti IgG
bovina-HRP
ABTS
anti RV
Anti-llama HRP
dil 1/2
RV
Suero de la llama
VHH
Antígeno de interés
anti His
Mide Anticuerpos
dil 1/2
Permite medir células
Secretoras de Anticuerpos
Figure 4
Separacion de células mononucleares
Buffy coat en Lymphopred
Extraccion de sangre entera
Tecnología de fago display para enriquecer y seleccionar VHH específicos
M13KO7
Helper phage
E coli
VHH variants
displayed on phage
Re amplification
of phages
(E coli infection)
Permite la expresión del VHH
Fusionado a la proteína de
Superficie del fago PIII
Elution of VHH
specific phages
display cycle
Binding to
antigen
Wash of unbound
phages
ELISA de FAGOS: permite evaluar cada clon de VHH
ABTS
Anti-fago M13 HRP
Fago expresando VHH
Antígeno de interés
Subclonado del VHH en el vector de expresión de la plataforma elegida
Expresión y purificación
Levaduras
E.coli
Célula de
mamífero
Baculovirus (larvas de insecto)
Plantas
Inmunización de llama con proteína VP6 de
Rotavirus
30
100000
25
Título de Ac
1000000
10000
20
1000
15
100
10
10
5
1
0
7
14
21
25
28
32
35
39
60
Días post inmunización
81 109 145 246 250
NºCSA anti-RV/5 x 10^5 CMN
Título de Ac anti-VP6
Título de Ac anti-RV IND

 Título de Ac neutralizantes anti-RV IND
Se construyó una biblioteca de genes VHH anti VP6
0
Nº CSA anti RV/
5 x 10^5 CMN
27 CSA/5 x 10^5 mononucleares (CMN)
Los VHH anti VP6 reconocieron todas las cepas de
Rotavirus grupo A testeadas por ELISA
ABTS
anti IgG
bovina-HRP
anti RV
RV
VHH
anti His
1,8
1,6
2KA4
1,4
2KD1
Abs
1,2
1,0
3A6
0,8
3B2
0,6
Non-related VHH
0,4
0,2
0,0
IND
C486
B223
Wa
H2
Fecal sample
Cepas de Rotavirus
MA-104
PBS
Negative
fecal sample
Los VHH seleccionados reconocieron epitopes conformacionales
en formas multiméricas de VP6 por WB
A
anti
RV
170
120
100
70
RV Bovino
En condiciones no reductoras
RV Bovino
En condiciones reductoras
Non rel anti
anti
2KA4 2KD1 3B2 3A6 VHH
RV
VP6
VP2
VP4
55
VP5
40
VP6
35
VP7
VP2
VP4
muestra
Non rel Ac secundario
anti
2KA4 2KD1 3B2 3A6 VHH
VP6
Trímeros y
Oligómeros de
VP6
VP5
VP6 monómero
VP7
25
1
2
3
4
5
6
7
8
anti
RV
10
11
12
13
14
VP6 recombinante
bajo condiciones no reductoras
VP6 recombinante
bajo condiciones reductoras
B
9
anti 2KA4 2KD1 3B2 3A6 Non rel anti
RV
VHH
VP6
anti
VP6
2KA4 2KD1 3B2
3A6
muestra
Non relAc
VHH
170
120
100
70
secundario
Trimeros y
Oligómeros
De VP6
55
40
VP6 monomero
35
25
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
VHH anti VP6 neutralizaron in vitro cepas de Rotavirus de diferentes genotipos
100
90
80
RV + VHH
70
C486
60
(Subgrupo
I; P[1]G6)
50
40
30
Protección (%)
100 UFF
MA-104
IF
20
10
0
0.2
0.98
3.9
15.6
62.5
250
100
90
IND
80
(Subgrupo I;
P[5]G6)
70
60
50
40
30
20
10
MA-104
NEUTRALIZACION
MA-104
Infección
2KA4
0
0.2
0.98
3.9
15.6
62.5
250
2KD1
[VHH] (ug/ml)
3A6
3B2
VHH no
relacionado
VHH anti VP6 neutralizaron in vitro cepas de Rotavirus de diferentes genotipos
RV Bovino
Proteccion (%)
100
90
80
H2
(Subgrupo noI;
noII ; P[12]G3)
70
60
50
40
30
20
10
0
0.2
0.98
3.9
15.6
62.5
250
100
90
80
B223
(SbI;
P[11]G10)
70
60
50
40
30
20
10
0
0.2
0.98
3.9
15.6
62.5
250
[VHH] (ug/ml)
[VHH] (ug/ml)
2KA4
100
Proteccion (%)
Proteccion (%)
RV Equino
2KD1
90
80
3A6
70
Wa
(SbII; P[8]G1)
60
50
3B2
40
30
RV Humano
20
10
0
0.2
0.98
3.9
15.6
62.5
[VHH] (ug/ml)
250
VHH no
relacionado
VHH anti VP6 de Rotavirus: NEUTRALIZATION OF HUMAN ROTAVIRUS
100 FFU
ROTAVIRUS
INFECTION
NO
INFECTION
Nanoantibodies
+
Rotavirus
Virus neutralization (%)
100
90
2KA4
80
70
2KD1
Wa
(P[8]G1)
60
50
3A6
40
Human RV
30
3B2
20
Non related
VHH
10
0
0.2
0.98
3.9
15.6
62.5
[VHH] (ug/ml)
250
Protección contra la diarrea en un modelo ratón lactante
Ratones BALB/C de 4 días de vida
Desafío viral (intragástrico)
Day
0
1
2
3
4
5
VHH: 100ug (intragástrico).
Evaluación de la diarrea
A)Desafío con RV bovino C486
P[1]G6; 30 DD50
Diarrea en el 100% de los
ratones no tratados
B) Desafío con RV murino EC
P[16]G16; 316 DD50
Diarrea en el 100% de los
ratones no tratados
VHH anti VP6 de Rotavirus:
Protección frente al desafío viral en ratones lactantes
Excreción viral a las 96 horas post
desafío con RV murino ECw
100
1,4
90
1,2
80
Abs 405nm
RATONES CON DIARREA (%)
Diarrea por Rotavirus murino
70
60
#
50
40
#
#
1,0
#
0,8
0,6
0,4
#
30
20
0,2
#
0,0
10
3B2
0
0
24
48
72
Hs post challenge
2KA4
2KD1
3A6
3B2
Antiserum to RV C486
Normal antiserum
Non treated group
Non related VHH
3A6
2KD1
2KA4
96
El tratamiento con VHH
disminuye significativamente
la excreción viral
2KD1 no se detectó
antígeno viral
en intestino
por ELISA
VHH
sin
sin
no rel tratar
desafiar
Llama immunization with a Rotavirus highly
conserved protein (VP6)
Development of recombinant VHH with
unexpected properties
Broad neutralizing capacity: Neutralizes
Broad protective capacity
rotavirus infection independently of the viral genotype.
against rotavirus diarrhea in a suckling mouse model
1º Price Best work in Veterinary Virology.
10th Argentinean Virology Congress, Sep, 2008
Patent
TECNOLOGIA VHH
AT BE BG CHCZ DE DK EE ES FIFR GB GR
HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MT NL NO
PLPT RO SE SI SK TR IS CH RU USA ME BR
ARA PO7010331
“Alternative Heterologous Passive Immune Strategies to
Prevent Rotavirus Diarrhea: protection and impact on neonatal
B-cell responses in two animal models of Rotavirus infection
and disease”
L.J. Saif, V. Parreño, F. Fernández, A. Wigdorovitz, C. Vega, P. Chacana, M. Bok,
L. Garaicoechea, J.A. Escribano
Evaluación de distintos tratamientos pasivos orales para la
prevención de la diarrea por rotavirus humanos.

Estudio de la actividad inmunomoduladora de los anticuerpos
heterólogos versus los homólogos.

MODELO CERDO GNOTOBIÓTICO PARA EL
ESTUDIO DE RVA
Susceptibles a la infección por cepas de RVA Humano
Desarrollo de infección y diarrea por RVH
Dieta láctea, fisiología gastrointestinal y desarrollo de la respuesta inmune similar a las de infantes
humanos
Buena correlación entre la protección en este modelo y en niños.
MODELO CERDO GNOTOBIÓTICO
Suplementación de la leche
a partir de las 24hs de vida
durante 9 días
Inoculación viral
72hs de vida/RVH Wa:
106.7UFF
Histerectomía
Estudio de la respuesta inmune
a los 21 dpi
Estudio de la infección y
toma de muestras
Registro de diarrea y excreción
Dieta libre de anticuerpos
T R ATA M I EN T O PA S I VO C O N V H H A N T I
V P 6 D E RVA
Producción de anticuerpos monoclonales recombinantes VHH anti VP6 en larvas de
insecto
Generación de larvas de T. ni infectadas con
baculovirus recombinantes portadores del
inserto del VHH
Obtención del extracto proteico total
estéril conteniendo el VHH anti VP6
Diarrea y excreción viral
Diarrhea
b,e
Virus shedding
Treatment
Group
n
VHH
5
5/5
A
ND
A
ND
IgY
4
0/4
B
1.8
B
4.0
CL
4
0/4
B
2.0
B
IgG
6
4/6
AB
4.0
C
NT
5
0/5
B
2.2
B
p-value
-
<0.05
N°
Protected
d
Animals
Mean
Onset
(PID)
0.0214
Mean
Duration
(days)
ND
% Infected
Animals
Mean
Onset
(PID)
Mean
Duration
(days)
AUC
(FFU/ml
*day)
A
5/5
2.6
3.0
AB
6.1 x 10
BC
ABC
4.2
AB
2.3 x 10
5 BC
5.2
AB
2.1 x 10
5 BC
4.9
AB
8.3
BC
4/4
1.8
5.3
C
9.3
C
4/4
1.8
4.0
AB
4.0
B
5/6
3.0
1.6
A
1.9 x 10
C
15.6
5/5
2.2
5.6
C
1.8 x 10
-
-
6.8
<0.0001
C
<0.0001
0.0012
Mean
Peak Titer
(log FFU)
4 AB
BC
4.5
0.7
A
Mean
Cumulative
c
Score
a,e
Mean
Shed Virus
(log FFU)
0.8
1.3
1.0
AB
B
AB
4A
3.4
A
0.5
A
6C
5.7
B
1.2
B
0.0055
0.014
0.0012
Diferentes letras en la misma columna indican diferencias significativas. Test de ANOVA seguido por análisis de
Comparaciones de Bonferroni, p<0.05 / Test de proporciones de Fisher, p<0.05
Diarrea y excreción viral
Duración de la diarrea
Duración del tratamiento
Respuesta al tratamiento
VHH 3B2: Estudio de la actividad neutralizante de cepas de rotavirus
grupo A representantes de las principales variantes que circulan en
humanos
Concentración de VHH
(µg VHH/ml)
Cepa de RVA
3B2 VHH
VHH No relacionado
Wa (G1 P[8] I1)
0.06
Neg
DS1 (G2 P[4] I2)
0.24
Neg
SA11 (G3 P[1] I2 )
15.63
Neg
Gottfried (G4 P[6] I1)
0.24
Neg
ST3 (G4 P[6] I1)
0.98
Neg
H1 (G5 P[7] I5 )
0.98
Neg
69M (G8 P[10] I2)
0.98
Neg
F45 (G9 P[8] I?)
0.06
Neg
Arg720 (G12 P[9] I?)
3.91
Neg
Diluciones base 4 del clon 3B2 o de un VHH no relacionado se mezcló con igual volumen conteniendo 100
(FFU) de cada cepa de RVA. Se expresan la concentración minima de VHH que reduce en un 80% o más el
numero de focos fluorescentes. Neg = ausencia de antividad neutralizante eh la mayor concentración
analizada (62.50 µg VHH/ml)
Producción de los
Nanoanticuerpos
en larvas de insecto
NEUTRALIZACION IN VITRO
Infección
Por rotavirus
Nanoanticuerpos
+ Rotavirus
Expresión
de niveles óptimos de
nanoanticuerpos
Ausencia de
infección
Los nanoanticueros
expresados en larvas
conservan la propiedad
de
Neutralizar la infección
por RV
purificación
Ensayos en el modelo
cerdo gnotobióticos de
infección y diarrea por
ROTAVIRUS HUMANO
100
80
60
40
20
0
3B2
2KD1
2KD1+3B2
TRATAMIENTO CON
NANOANTICUERPOS
no neutralizante
control negativo
Los VHH expresados en
larvas
protegen de la diarrea
por Rotavirus a ratones
lactantes
Porcentaje de lechones
con DIARREA
Porcentaje de ratones
con DIARREA
Ensayos
de protección
en ratones
100
80
60
40
20
0
3B2
VHH
Anti VP6 de
Rotavirus
Neutralizante
no neutralizante
IgY
convencional
Anti VP6 de
Rotavirus
No neutralizante
control negativo
Control
no
tratado
Los VHH expresados en
larvas protegen de la
diarrea por Rotavirus
humano
Premio INNOVAR 2011
Investigación Aplicada
Proyecto 10251
Desarrollo y producción de nanonaticuerpos
para profilaxis y diagnóstico
Parreño, Garaicoechea, Vega, Bok, Barbieri, Asenzo, Marcoppido, Franco, Kahl, Escribano, Saif y Wigdorovitz
INCUINTA – Instituto de Virologia, CICV y A, INTA Castelar
Algenex, España
The Ohio State University, USA
Para el recuerdo…
Estudio del mecanismo de neutralización y efectos
en la estructura viral del VHH anti VP6 de Rotavirus
Dra. Lorena Garaicoechea
Instituto de Virología, INTA Castelar
Baylor College of Medicine
Se logró obtener una población de particulas enriquecida en TLPs
Y otra poblacion de particulas enriquecida en DLPs
Gradiente de
Cloruro de Cesio
TLPs
Wa
DLPs
TLPs 1x109 UFF/ml
DLPs 1x107 UFF/ml
Observación por Microscopia Crioelectrónica
TLPs Wa
TLPs Wa + 3B2
DLPs
DLPs + VHH 3B2
DLPs sin VHH
1h 37 C
VHH 3B2 + DLP
24hs 4 C
¿Qué cantidad de
anticuerpos VHH son
necesarios para
producir el efecto en
las DLPs?
No VHH
Indic magn: 15000X
Total magn: 131748
No VHH
Indic magn: 25000X
Total magn: 222082
No VHH
Indic magn: 20000X
Total magn: 181374
No VHH
Indic magn: 40000X
Total magn: 362812
No VHH
Indic magn: 30000X
Total magn: 262319
No VHH
Indic magn: 60000X
Total magn: 544218
Sin VHH
Incubación ON a 4C
0.001ng/10ul
Indic magn: 15000X
Total magn: 131748
0,001 ng VHH/10u
0.001ng/10ul
Indic magn: 25000X
Total magn: 222082
0.001ng/10ul
Indic magn: 25000X
Total magn: 222082
0.001ng/10ul
Indic magn: 50000X
Total magn: 453515
0.001ng/10ul o 0.01
Indic magn: 50000X
Total magn: 453515
0.01ng de VHH/10ul
Indic magn: 15000X
Total magn: 131748
0.05ng de VHH/10ul
Indic magn: 15000X
Total magn: 131748
0.05ng/10ul
Indic magn: 25000X
Total magn: 222082
0.1ng/10ul
Indic magn: 15000X
Total magn: 131748
0,1 ng de VHH/10 ul
0.1ng/10ul
Indic magn: 50000X
Total magn: 453515
1ng de VHH/10ul
Indic magn: 15000X
Total magn: 131748
Interacción y complementariedad entre las entidades del consorcio
INTABIO AF para la producción de leche funcional
I&D
Control de calidad
Nanoanticuerpos
VHH
Unidad experimental
de camélidos
sudamericanos
Box de bioseguridad
P2 para ensayos
de eficacia en
Modelos animales
Desarrollo de nanoanticuerpos VHH
Desarrollo
Manufactura
Comercialización
leche funcional
para prevenir
la diarrea por Rotavirus
Control de funcionalidad de nanoanticuerpos
en las diferentes etapas de elaboración de los
biofármacos y alimentos funcionales con VHH
I&D
Alimento funcional
Control de Eficacia de producto terminado
- Modelos animales para Rotavirus:
I&D
Bovinos trangénicos
Biofarmacos
Manufactura
Comercialización
Desarrollo de bovinos trangénicos que
expresen nanoanticuerpos en leche
Planes Sociales
Ministerio Salud
2006
Desarrollo
De biblioteca
VHH anti-VP6
de RVA
Personal INTA
en EMBL
2006-2008
Caracterización in vitro
Capacidad neutralizante
de amplio espectro
Estudios iniciales de
estabilidad
2009-2010
Comparación de los VHH obtenidos en E
coli vs larva de insecto
Evaluación de protección en modelo
ratón lactante
*Gomez Sebastian y col. enviado BMC
Biotechnology, 2012
Protección ratón lactante
*Garaicoechea, Olichon y col,
JV 82 (19) 9753-68,2008
Premio IX Congreso
Argentino de virologia, 2008
Expresión periplasma
E coli*
SISTEMA DE
EXPRESIÓN
ACTIVIDADES - RESULTADOS
Evolución del desarrollo de VHH anti VP6 de Rotavirus
Evaluación de eficacia en cerdos
gnotobioticos desafiados
con rotavirus humano G1P[8]
Vega, Bok y col, 2011, Premio
X Congreso Argentivo de virologia,
2011
Expresión larvas de insecto
Infectadas con baculovirus
(Algenex)*
2011
Estudios iniciales de
mecanismo de
neutralización viral
Capacitación L. Garaicoechea
En lab Dr. Prasad, Baylor
College, Houston Texas, USA
2012
Inicio de desarrollo
de vaca trangénica
*Lenzt y col, Planta, 2012
PREMIO INNOVAR
2011 a la plataforma
Expresión en transplatómicas
de Tabaco (INGEBI)*
Expresión en leche de
Bovino Trangénico
Expresión en levaduras
(Biomanay SRL)
FINANCIACIÓN
Hitos
Convenio
Cooperación
Bilateral
SecyT-BMBF
30,000€
Solicitud PATENTE
INTA-Algenex
100,000 €
Subsidio R03 Fogarty Foundation
INTA-Algenex-FAHRP
25,000 €
PICT Jóvenes 2010
8,000 €
Proyecto Especifico
Incuinta res. 790/09
20,000 €
Subsidio FONARSEC
INTA-BIO AF
2,100,000 €
Tecnologia VHH
Publicaciones
Figure 7
Taller de capacitación
desarrollo de bibliotecas VHH
(6-17 de Octubre de 2014)
Dr. Serge Muydermans
Dr. Cecile Vincke
Universidad Libre de Bruselas
Bélgica
Pipeline de Desarrollo de Nanoanticuerpos VHH
Desarrollo - Descubrimiento
Norovirus humano GI.1 / GII.4
Infuenza H1N1 H3N2 B
E coli
E coli
E coli
PATENTE
E2 Virus de la diarrea viral bovina
Ecoli
PUBLICACIOON
Prueba de Ppcio
APLICACIONES
Modelo Animal
Inicio de
Kit
BioFármaco
No roedor
Desarrollos Diagnostico
PUBLICACIOON
si
bovinos
transgenicos
TESIS
DOCTORA
L
VIRUS
VP6 Rotavirus A
PATENTE
PUBLICACIOON
Expresión
Caracterización
Bioquímica
Funcional
Rendimiento
TESIS
DOCTORAL
Selección
VHH
Prueba de Ppcio
Cambio
Modelo Animal Plataforma de
rodedor
expresión
baculovirus
si
modelo Cerdo
gnotobiotico
Alimento
Funcional
Participantes
INTA
EMBL
ALGENEX
FAHRP
bivalentes
INTA
bivalentes
PUBLICACIOON
Inmunización Desarrollo
Biblioteca
llamas
Escalado
no
Arroz
modelo Cerdo
transgenico gnotobiotico
INTA
NIH
VirginaTech
INTA
Algenex
Influenza m2e
HRSV
Lengua azul
INTA
IgG dif. especies
Células sistema inmune
Proteinas
amiloides
INTA
NYU
Tecnologia VHH
Muchas gracias por su atención!!