Prob 2

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PROBLEMAS TEMA II
1. Si una molécula circular de ADN se digiere con una
enzima de restricción que corta a la molécula en un solo
punto, ¿cuántos fragmentos se producen?
a) 1
b) 2
c) 3
d)4
e) ninguna es correcta
2. Si una molécula circular de ADN se digiere con una
enzima de restricción que corta a la molécula en dos
puntos, ¿cuántos fragmentos se producen?
a) 1
b) 2
c) 3
d)4
e) ninguna es correcta
3. Si una molécula lineal de ADN se digiere con una enzima
de restricción que corta a la molécula en un solo punto,
¿cuántos fragmentos se producen?
a) 1
b) 2
c) 3
d)4
e) ninguna es correcta
4. Si una molécula lineal de ADN se digiere con una enzima
de restricción que corta a la molécula en dos puntos,
¿cuántos fragmentos se producen?
a) 1
b) 2
c) 3
d)4
e) ninguna es correcta
5. Si una molécula lineal de ADN se digiere con una enzima
de restricción que corta a la molécula en n puntos,¿cuántos
fragmentos se producen?
a) n-1
b) n
c) n+1
d)n+2
e) ninguna es correcta
6. Ha recuperado un segmento de ADN clonado de 1.300 bp.
Para caracterizar a este segmento clonado, ha aislado el
inserto y decidido construir un mapa de restricción.
Utilizando las enzimas I y II, y después de la
electroforesis en un gel, determina el número y tamaño de
los fragmentos producidos por las enzimas I y II, solas y
combinadas, que son los siguientes:
enzimas
tamaño de los fragmentos de restricción
I
350bp + 950bp
II
200bp + 1.100bp
I + II
150bp + 200bp + 950bp
Con estos datos construya un mapa de restricción, mostrando
las posiciones relativas de los sitios de restricción, y
las distancias entre ellos en pares de bases.
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7. La secuencia de ADN 5´-CCGAATTCTACGCCTAC-3´ (solo se
muestra una de las cadenas)contiene una secuencia
palindrómica de 6 bases que funciona como un sitio de
reconocimiento y corte para una enzima de restricción.
Consultando la tabla 12.1, indique
a. ¿cuál es esa secuencia palindrómica?
b. ¿cuál es la enzima que corta a esa secuencia?
c. ¿cuántos fragmentos se forman?
d. ¿tienen los extremos romos o protuberantes?
e. escriba los fragmentos de ADN cortados
8. Un gen muestra el siguiente mapa de restricción con
EcoRI y con HindIII
EcoRI
EcoRI
3 Kb
4Kb
1Kb
HindIII
2Kb
4,5Kb
HindIII
1,5Kb
a. Dibuje los patrones de fragmentos de ADN esperados al
separarlos mediante electroforesis en un gel e indique
el tamaño de cada uno:
Muestra 1: fragmento sin digerir
Muestra 2: fragmentos digeridos con EcoRI
Muestra 3: fragmentos digeridos con Hindi
Muestra 4: fragmentos en una digestión doble
9. Se digiere un fragmento de ADN por separado con HindIII
y SmaI, y conjuntamente con las dos enzimas. Se obtienen
los siguientes fragmentos:
HindIII
2,5 Kb + 5,0 Kb
SmaI
2,0 Kp + 5,5 Kb
HindIII y SmaI
2,5 Kb + 3,0 Kb + 2,0 Kb
a) dibuje el mapa de restricción
b) Cuando la mezcla de fragmentos producida en la digestión
con las dos enzimas se digiere con EcoRI, se observa la
perdida del fragmento de 3,0 Kp y la aparición de una banda
de 1,5 Kb (en un gel de agarosa teñido con bromuro de
etidio). Sitúe el punto de corte de la enzima EcoRI en el
mapa de restricción.
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10. En el siguiente esquema se muestran los resultados de
las huellas moleculares del DNA de una madre (M), del
supuesto padre (P) y del hijo (H), utilizando diferentes
sondas. Basándose en estas sondas, ¿podría concluir que P
es el padre de H?
M
H
P
11. Se ha secuenciado por el método de los
didesoxinucleótidos un fragmento de DNA. A continuación se
presenta una parte del autorradiograma del gel de
secuenciación
ddA ddG ddT ddC
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a. Deduzca la secuencia de la cadena de ADN sintetizada a
partir del cebador. Indique los extremos 5´y 3´
b. Deduzca la secuencia de la cadena de ADN utilizada como
molde. Indique los extremos 5´y 3´