DESARROLLO DEL APARATO DIGESTIVO DE LECHONES DESTETADOS ALIMENTADOS CON SUBPRODUCTOS LÁCTEOS Aguilera BAa, Reis STa, Mariscal LGb y Cervantes HJGa a Lincenciatura en Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Querétaro Av. de las Ciencias s/n, Juriquilla, Delegación Santa Rosa Jáuregui, Querétaro, Qro. 76230 México. [email protected] b CENI-Fisiología. INIFAP. Km1 Carretera a Colón, Ajuchitlán Colón, Querétaro. 76280. México RESUMEN El destete es un proceso largo y tardío en el que el s istema digestivo del lechón se adapta progresivamente a mayores cantidades de alimento sólido con una concentración mayor de proteína vegetal y cantidades menores de leche. Al destete temprano los lechones presentan una menor maduración de la función digestiva, ya que no produce todas las enzimas necesarias para una digestión normal a base de sólidos. El objetivo fue evaluar el desarrollo del aparato digestivo durante el posdestete de lechones alimentados con subproductos lácteos (SL), empleándose 66 lechones destetados, alimentados con una dieta conteniendo SL. El día 0, 2, 7, 14, 21 y 28 posdestete (dpd) los lechones se sacrificaron, colectándose y pesándose los órganos digestivos. En la mucosa intestinal se midió la actividad de la lactasa y en el páncreas de la amilasa, lipasa y proteasas. A los 2 dpd el peso de los órganos mostraron una depresión, en todos los casos se presentó un despunte máximo a los 28 días. La actividad de la lactasa y la lipasa disminuyó, la amilasa se incrementó y las proteasas no mostraron cambios con respecto a los dpd. Los SL promovieron un desarrollo del aparato digestivo a partir de los 14 dpd. 1. INTRODUCCIÓN En condiciones naturales el destete es un proceso largo y tardío en el que el sistema digestivo se adapta progresivamente a mayores cantidades de alimento sólido, con una concentración mayor de proteína vegetal y cantidades menores de leche. Los destetes artificiales ocurren de manera temprana cuando los lechones presentan un menor grado de maduración de la función digestiva debido a la naturaleza de su alimentación. El estrés ocasionado por los cambios psicológicos y nutricionales a los cuales son sometidos los lechones durante el proceso del destete, provoca alteraciones en la fisiología del aparato digestivo, originando modificaciones en las secreciones digestivas y en la estructura de la mucosa intestinal reduciéndose la altura de las vellosidades intestinales, lo que provoca una disminución en la capacidad para digerir y absorber nutrientes (Campabadal y Navarro, 1996). La mayoría de las enzimas digestivas ya están presentes en el páncreas del feto porcino, pero en un nivel muy bajo, ellas pasan un proceso de maduración con la edad, particularmente importante después del destete (Lindemann et al., 1986). Durante la lactancia, el sistema enzimático del lechón está adaptado para digerir los nutrientes de la leche, y la absorción de proteínas lácteas, lactosa y lípidos de cadena corta (Roppa, 2002). Sin embargo, en el destete el lechón sufre una disminución en su actividad enzimática, debido a la caída de consumo de alimento. Por lo tanto, los animales necesitan un periodo de tiempo para madurar el proceso de producción de sus propias enzimas, debido a que su sistema digestivo no produce cantidades apreciables de lipasa, amilasa y otras enzimas que degradan los nutrientes contenidos en materias primas empleadas en el destete y posdestete. La utilización de alimentos de origen animal, como los subproductos lácteos, en la formulación del alimento de iniciación tiene un efecto positivo sobre el crecimiento de lechones. La lactosa es el componente principal del suero de leche dado que es un azúcar fácilmente asimilable por el organismo siendo una excelente fuente de energía (Cole y Sprent, 2001). El objetivo de este trabajo fue evaluar el desarrollo morfofisiológico del aparato digestivo durante las cuatro semanas posdestete en lechones alimentados con dietas complementadas con subproductos lácteos. 2. METODOLOGÍA Se utilizaron 66 lechones cruzados Landrace x Duroc de ambos sexos, destetados a los 21 días de edad. 60 lechones se repartieron entre dos dietas experimentales a las cuales se adicionó diferente fuente de lactosa: suero de leche o lactosa cristalina. Las dietas se formularon para dos fases productivas (Fase 1 del destete hasta los 14 días y Fase 2 de los 15 a los 28 días posdestete (dpd)), sustituyéndose la proteína de la leche (caseína) durante la lactancia por fuentes de origen vegetal (pasta de soya, concentrado de proteína de soya, aislado de proteína de soya, sorgo) (Cuadro 1). Las dietas fueron isocalóricas e isoproteicas. Seis lechones se sacrificaron el día del destete y los demás a los 2, 7, 14, 21 y 28 dpd. Para evaluar el desarrollo de los órganos digestivos y de la actividad enzimática se sacrificó a los lechones adormeciéndolos con CO2 y por degollación. Posteriormente, se procedió a la apertura de la cavidad abdominal para la colecta de los órganos digestivos (páncreas, hígado, estómago, intestino delgado e intestino grueso) los cuales fueron separados, vaciados de sus contenidos y pesados. Inmediatamente después de la colecta el páncreas se congeló en nitrógeno líquido y posteriormente se conservó a -70 °C hasta que se midió la actividad específica (UI/mg proteína) de las enzimas amilasa (Métais y Bieth, 1968), lipasa (Rathelot et al., 1975), tripsina (Reboud et al., 1962), quimotripsina (Bergmeyer, 1974) y carboxipeptidasas A (Bradshaw et al., 1969) y B (Folk.et al., 1960). En el intestino delgado se realizó un raspado de la mucosa, la cual se introdujo inmediatamente en nitrógeno liquido y posteriormente se conservó a -70 °C para cuantificar la actividad específica de la lactasa (Dahlquist, 1964). Los resultados se analizaron empleando el paquete estadístico SAS (1982) de acuerdo a un diseño factorial 2 x 6, siendo el factor uno la fuente de lactosa de la dieta (suero de leche o lactosa cristalina) y el factor dos los dpd (0, 2, 7, 14, 21 y 28) (Steel y Torrie, 1980). Cuadro 1. Dietas experimentales para lechones Suero de leche Lactosa cristalina Fase 1 Fase 2 Fase 1 Fase 2 Sorgo 41.7 54.3 46.7 56.6 Lactosa cristalina 0.0 0.0 17.5 8.8 Pasta de Soya 12.0 20.0 12.0 20.0 Suero de leche ácido 25.0 12.5 0.0 0.0 Concentrado de proteína de soya 12.9 0.0 11.2 0.0 Aislado de proteína de soya 0.0 4.8 ------5.6 Aceite de maíz 4.0 4.0 4.0 4.0 Plasma porcino 0.0 0.0 4.0 0.0 Otros1 4.37 4.42 4.64 5.0 1 Vitaminas, minerales, sal, aminoácidos, óxido de zinc, antibiótico, carbonato de calcio y ortofosfato. Materias Primas 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN El peso vivo y el peso absoluto de los órganos digestivos a excepción del estómago no tuvieron diferencias (P>0.05) con respecto a la fuente de lactosa. Lo que nos indica que cualquiera que sea la fuente de lactosa suministrada a los lechones, va a estimular en la misma magnitud el desarrollo de los órganos digestivos. Para el caso del estómago (P<0.05), la lactosa cristalina promovió el desarrollo de este órgano (de 52 a 55 g) con respecto a la lactosa del suero de leche. Esta respuesta, aunque pequeña, se debe probablemente a que la presencia de la lactosa cristalina estimula la actividad fermentativa de los microorganismos de los lechones con una mayor producción de ácido láctico, lo que provocó una hipertrofia de estos órganos (Xu y Cranwell, 1992). A los dos dpd el peso de los órganos, así como el peso vivo mostraron una depresión causada por el destete (Makkink et al., 1994), sin embargo, en todos los casos se presentó un despunte hasta alcanzar un máximo desarrollo (P < 0.05) a los 28 días (Cuadro 2). La disminución del ritmo de crecimiento en el peso de los órganos al día 2 posdestete en relación al día del destete, aunque no fueron significantes (P > 0.05), se debe al cambio de una dieta líquida a una sólida, donde el consumo es muy bajo y por ende el lechón sufre un estrés nutricional, sumado al estrés psicológico (Funderburke y Seerley, 1990). Cuadro 2. Efecto de los días posdestete sobre el desarrollo de los órganos digestivos en lechones destetados. Días posdestete* Pesos EEM 0 2 7 14 21 28 d d d c b a Peso vivo (Kg) 5.7 5.1 5.6 6.7 8.3 10.1 0.12 Peso absoluto (g) Páncreas 6.4d 5.8d 8.8c 13.2b 14.6b 17.3a 0.32 cd e de c b Hígado 149 125 134 161 231 322a 3.02 Estómago 28d 27d 38c 64b 67b 97a 1.21 Intestino delgado 171d 130e 182d 345c 450b 589a 5.34 Intestino grueso 56e 50e 90d 124c 192b 232a 3.12 a,b,c,d,e Promedios con literales diferentes en cada columna difieren estadísticamente (P<0.001). EEM = Error estándar de la media. El desarrollo observado en todos los órganos digestivos se debe a que en el destete se requieren relativamente grandes capacidades digestivas para digerir los nuevos alimentos de las dietas sólidas del destete, conjuntamente al crecimiento normal por edad. Las dimensiones físicas y de peso del aparato digestivo cambia con la edad y el peso corporal (Pekas, 1991). Los resultados de la actividad enzimática específica de la lactasa intestinal, así como de la amilasa, lipasa, tripsina, quimotripsina y carboxipeptidasas A y B pancreáticas no tuvieron diferencias significativas (P > 0.05) con respecto a las dietas experimentales a base a subproductos lácteos (suero de leche y lactosa cristalina). En el cuadro 3 se muestran los resultados de la actividad de enzimas digestivas con respecto a los dpd. La lactasa intestinal presenta su máxima actividad específica el día del destete seguido de un decremento los días 2 y 7 dpd (P<0.05) y un incremento a los 14 dpd (P<0.05). A los 14 días, al realizar el cambio de dieta en la fase 2, la actividad mostró un descenso a los 21 y 28 dpd (P<0.05). La lactasa es una enzima muy sensible a la presencia de su sustrato, por lo que al reemplazarse la leche por otros alimentos su actividad disminuye. La actividad de la lactasa decrece linealmente con respecto a la edad del animal (Salgado et al, 2002). La actividad específica de la amilasa pancreática disminuyó en los días 2 y 7 dpd (P<0.05) con respecto al día del destete. En los días 14 y 21 dpd empezó a incrementarse su actividad, hasta alcanzar la máxima a los 28 dpd (P<0.05). El consumo de alimento después del destete estimula la actividad de la amilasa (Roppa, 2002). Para la lipasa pancreática en el día 2 posdestete se llegó al máximo de actividad específica con respecto al destete y los demás días (P<0.05). A los 7 dpd la actividad disminuyó (P<0.05), manteniéndose estable durante los 14, 21 y 28 días. El lechón nace con la suficiente lipasa para degradar la grasa de la leche, cuando se desteta, su actividad tiende a disminuir por la cantidad y tipo de grasa contenida en la dieta. Los lechones lactantes digieren los nutrientes de la leche de la cerda muy eficientemente, y se ha reportado una digestión aparente de grasa del 96%, la cual declina en el destete de 65 a 80% (Jensen et al., 1997). La actividad específica de la tripsina presentó un ascenso a los 7 y 14 dpd (P<0.05), disminuyendo ligeramente para los 21 y 28 dpd (P>0.05) y la de quimotripsina mostró pocos cambios con respecto a la edad posdestete (P>0.05). La actividad de la CA sufrió un despunte en el día 2 posdestete (P<0.05), seguido de un decremento a los 7 dpd (P<0.05), permaneciendo constante hasta los 28 dpd, no difiriendo a la del día del destete (P>0.05). Por otro lado, la AE de la CB, entre el destete y el segundo día posdestete mostró un incremento, permaneciendo constante hasta los 28 dpd. Las actividades de la tripsina, quimotripsina, CA y CB no se alteraron con la sustitución de proteína de la leche (caseína) durante la lactancia por fuentes de origen vegetal (pasta de soya, concentrado de proteína de soya, aislado de proteína de soya, sorgo) ni por la edad posdestete de los lechones, lo que nos indica que el lechón tiene la capacidad de degradar sin mayor problema este tipo de alimentos proteicos. Cuadro 3. Efecto de los días posdestete sobre la actividad específica de enzimas pancreáticas e intestinales de lechones destetados. Actividad Días posdestete específica, EEM 0 2 7 14 21 28 UI/mg de proteína Lactasa 3.0a 2.2b 0.9c 2.4b 0.6c 0.6c 0.05 b c c b b Amilasa 2078 1073 1513 2519 2442 3334a 79.7 Lipasa 24.5b 35.7a 19.8c 19.6c 20.4c 19.7c 0.6 Tripsina 41.2b 41.9b 52.5a 50.7a 48.9ab 49.5ab 1.2 Quimotripsina 973bc 1066abc 984abc 1235a 913c 1185ab 37.3 Carboxipeptidasa A 179b 259a 182b 186b 196b 188b 5.1 b a a a a Carboxipeptidasa B 107 148 158 158 153 147a 3.6 a,b,c Promedios con literales diferentes en cada columna difieren estadísticamente (P<0.001). EEM = Error estándar de la media. 4. CONCLUSIONES La adición de lactosa cristalina como fuente de lactosa en la dieta posdestete promovió el desarrollo del estomago con respecto a la lactosa del suero de leche. A los 2 días posdestete todos los órganos, así como el peso vivo mostraron una depresión causada por el destete. La fuente de lactosa no afectó la actividad de las enzimas digestivas. El desarrollo de la lactasa y lipasa decreció y el de la amilasa se incrementó con respecto a los dpd, demostrándose que su actividad está estrechamente relacionada a la concentración y/o tipo de sustrato. La actividad de las proteasas no está influenciada por la fuente de sustrato ni por los dpd. El conocimiento del desarrollo del aparato digestivo en el proceso digestivo de lechones destetados dará las bases para un manejo adecuado de la alimentación en esta época crítica de la producción del cerdo. BIBLIOGRAFÍA 1. H.U. Bergmeyer, “Methods of enzymatic análisis”. Ed. Academia Press. New Cork, 1974. Bradshaw et al., 1969. 2. R. Bradshaw, L. Ericsson, K. Walsh, H. Neurath, “The amino acid sequence off bovine carboxypeptidase A”. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., Vol. 63, 1969, pp. 1389. 3. C. Campabadal, G.H. Navarro, “Alimentación del lechón al destete”. Asociación Americana de Soya A.N. No. 146, 1996, pp. 26. 4. M. Cole, M. Sprent, “Protein and Amino Acid Requirements of Weaner Pigs”. 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