formacion de brotes adventicios en abeto douglas

INDICE
1
Introduccion
2
Resumen
3
Revisión de literatura
4
Concepto de fitohormonas
5
Metabolismo de las citoquininas
6
Receptores de las citoquininas
7
Sitio de síntesis y transporte de las citoquininas
8
Efectos de citoquininas sobre tallos y raíces
8.1 Efectos fundamentales de las citoquininas
8.2 Accion combinada de citoquininas con auxinas
9
Iniciacion de brotes adventicios
9.1 Formacion de brotes adventicios en abeto Douglas
9.2 Propagacion vegetativa en Orquídeas
9.3 Propagacion por yemas de brote vegetativo en orquídeas
9.4 Propagacion vegetativa del papayo
10
Conclusiones
11
Bibliografia
INTRODUCCION
La mayor parte de nuestros conocimientos sobre el papel de las citoquininas en el
crecimiento y desarrollo vegetal proviene del análisis de los niveles de citoquininas
endogenas y del estudio de la relación entre estos niveles y los cambios fisiológicos
observados en la plantas.En,la actualidad los genes disponibles de la síntesis de reguladores
de crecimiento ,por ejemplo el gen IPT de Agrobacterium Tumefasciens,pueden
introducirse en el genoma de la planta bajo el control de un promotor especifico,para poder
observar los efectos que produce el incremento de los niveles de la fitohormona sintetizada
sobre el desarrollo y el crecimiento vegetal.
Los estudios de transformacion son muy útiles para comprender la función de las
citoquininas .En estos estudios se puede relacionar el incremento endogeno de
citoquininas,bien constitivo (incremento permanente ),o bien transitorio,bajo el controlde
un promotor especifico .Estos procesos parecen estar afectados por los niveles de
citoquininas,como se ha observado en diversos estudios .
El presente proyecto comienza describiendo el metabolismo de las citoquininas en
relación a su biosíntesis ,transporte y absorción , y los mecanismos reguladores de la
actividad de las citoquininas en lasa plantas .A continuación se revisan los efectos
fisiologicos mas importantes de las citoquininas .Se discute un poco el modo de acción de
las citoquininas en relación a los receptores específicos y a la actividad de las citoquininas
en sus lugares de acción .
RESUMEN
Por : Sabina Huamanyauri Traslaviña
e-mail :[email protected]
Tema :citoquininas efectos en propagacion vegetal
En la decada del 40 Johannes Van Overbeer descubrio que el endospermo lechoso
de cocos inmaduros ,eran ricos en compuestos que provocaban la citocinesis y a principios
de 1950 .Folkeskoog y sus colaboradores encontraron que las celulas de secciones de
medulas de tallos rde tabaco se dividian con mucha mayor rapidez cuando se colocaba un
fragmento de tejido vascular sobre la medula superior comprobando los resultados de
Haberlandt que había descubierto el compuesto citoquinina en tejidos vasculares que
causaban formación del cambium del corcho y la cicatrización de heridas.
Las citoquininas son derivados de la adenina, poseen la propiedad específica de
provocar el crecimiento de cultivos de tejidos en forma de callocidad, y en algunas plantas
si se hacen flotar secciones o discos de hojas sobre soluciones de citoquininas en la
oscuridad, estas retrasan la pérdida de clorofila de la hoja. Los efectos de la citoquinina
sobre las plantas son las siguientes: Inducción de partenocarpio en algunos frutos,
activación de la división celular en algunos microorganismos, formación de yemas en hojas
separadas de la planta y en algunos musgos, estimulación de la formación de tubérculo en
la papa, inducción de iniciación del crecimiento en los tallos y ramas, rompimiento del
letargo de las yemas y semillas en muchas especies.
En una investigación se propagó vegetativamente in vitro yemas de plantas adultas
de la variedad PAUNA de papayo; se evaluó el efecto de la interacción de
Auxina/Giberelina; Auxina/Citoquinina y Auxina/Citoquinina/Giberelina encontrándose
que la interacción de 0.05 ppm de AIA, 0.25 ppm de BAP y 5.0 ppm de AG3
suplementadas con 100 ppm de sulfato de adenina, permiten el establecimiento in vitro de
explantes de papayo provenientes de campo. El crecimiento y desarrollo de las plántulas
puede lograrse al transferir a éstas a un medio que contenga 0.05 ppm de AIA y 0.5 ppm de
Kinetina suplementada con 100 ppm de ácido nicotínico.
Se han desarrollado distintos métodos de propagación por meristemas dependiendo
del tipo del explante y la especie a propagar, por ejemplo el tamaño ideal de los brotes
donantes de las yemas de brote vegetativo es de 0.15 cm para las orquídeas de las especies
Cattleya maxima Lindley y de Cattleya rex O’brien, los cuales fueron separados de la
planta madre haciendo un corte trasnversal al rizoma muy cerca de la base del pseudobulbo
más próximo incluyendo en algunos casos las raíces nuevas. Se enjuagan los brotes con
alcohol al 75% por 10 seg. para después esterilizarlos y adicionarles Tween-20 para
permitir un mejor contacto del esterilizante con la superficie del brote. Se observó que los
brotes de estas dos especies poseen dos o tres yemas basales y una yema apical, de ella se
aisló una región meristemática de aproximadamente 2 mm que incluye el meristema
propiamente dicho con algunas hojas envolventes y un cubo de tejido basal. Luego del
aisalmiento del explante fue sembrado en medio de cultivo líquido sin agitación, por lo cual
el explanta se hinchó hasta que a las 6-8 semanas aparecieron estructuras semejantes a
protocormos. Se pudo comprobar que se obtiene mayores protocormos con 1.0 mg/Lt de
ANA y 1.0 mg/Lt. de kinetina.
-HARTMANN,H.T,D.E,Kester ,F.T.Parites, Geneve.1997.Plant Propagation :principles
and practices 6ta ed. Prantice Hall Englewood.Cliffs.N:J
-ROJAS
GARCIDUEÑAS,
Manuel,
1990.Fisiologia
vegetal
aplicada.
4ta
ed.Interamericana Mc Graw-Hill Mexico.D, F
-BARCELLO
COLL,Juan.1995.Fisiologia
Vegetal
.7ma
ed.
Ediciones
Piramide
S:A.Madrid, España.
-www.florida plants.com/CR/Cytokini.htm
-http/prfholnt.upol.cz:81/growthreg/publ.htm
-www.gov.on.ca/OMAFRA/english/researchfund/agfooddocs/ag2042.htm.
REVISION DE LITERATURA
Hacia 1913,Gottlieb Haberlandt, en Austria, descubrió que un compuesto
desconocido presente en los tejidos vasculares de diversas plantas estimula la división
celular que causa la formación del cambium del corcho y la cicatrización de las heridas en
tubérculos cortadas de papa. En la década del 40 Johannes Van Overbeek descubrió que el
endospermo lechoso de cocos inmaduros también es rico en compuestos que provocan la
citocinesis. A principio de la década de 1950,Folkeskoog y sus colaboradores, que entonces
se interesaban en el estimulo por auxinas en plantas que crecen en cultivos tisulares,
encontraron que las células succionan de medulas del de tallos de tabaco se dividían con
mucha mayor rapidez cuando se colocaba un fragmento de tejido vascular sobre la medula
superior, comprobando los resultados de Haberlandt.
F.C.Steward, empleando técnicas de cultivo de tejidos en la década de 1950
encontró en la leche de coco varias citoquininas que favorecen la división celular en los
tejidos de zanahoria. D.H.Lethan (1974)demostró que la más activa de ellas estaba
constituida por compuestos a los que antes se dieron los nombres comunes zeatina y
ribosido de zeatina. En 1964 Carlos Miller y Letham identificaron la zeatina casi de manera
simultáneamente, empleando el endospermo lechoso del maíz (Zea mays) como fuente.
Desde entonces se han identificado otras citoquininas con estructuras semejantes a la
adenina, parecidos a la cinetina y a la zeatina en diversas partes de semillas vegetales.
Ninguna de esos citoquininas esta presente en el DNA, ni son productos de descomposición
del DNA, pero en algunas se presenta en moléculas de RNA de transferencia. En semillas,
levaduras, bacterias y hasta en los promotores, y más de 30 se presentan en citoquininas sin
combinar. Libres.
FITOHORMONAS VEGETALES
Las hormonas son factores estimulantes del desarrollo, pero este es uno de sus
efectos y no su acción fundamental. En realidad, las moléculas directamente reguladoras de
los procesos del desarrollo son, como es comunes el metabolismo las enzimas. Las
hormonas son mensajeras cuyo papel seria el de un intermediario entre el estimulo (a
menudo la luz o la temperatura)y la respuesta de la planta (germinacion, floración, etc.)
conforme al esquema.
Estimulo-------Sensor ---------------Intermediarios----------Efector----------Respuesta
(molécula receptora)
(hormona)
(molécula operativa)
Los estímulos que ponen en marcha el proceso, así como el tipo de respuesta que
provocan, son muy variados; pero los sensores y efectores parecen ser específicos al menos
en algunos casos, este hecho queda oscurecido por las complicaciones, interrelaciones que
existen entre las hormonas. La acción fundamental de las hormonas es bastante similar en
los diversos grupos; actuar sobre los ácidos nucleicos para reprimir o estimular genes, al
nivel de la transcripción al pasar el mensaje del DNA al RNA al de la transduccion (al
operar el mensaje del RNA seriando los aminoácidos.
No se conoce bien la acción fundamental de la citoquinina de manera bien
fundamentada, se supone que se adhiere al RNA de transferencia y, cuando sucede en
determinados sitios, provoca el funcionamiento de ciertos codones, controlando así la
síntesis de algunas proteínas o enzimas. Esta comprobado que induce la actividad de las
amilasas y proteasas ,y la sintesis de tiamina y auxina .La citoquinina es poco móvil
aplicada en forma exógena, si se aplica en una yema, solo actúa en el lugar de aplicación.
La citoquinina endogena parece tener transporte polar basipetalo, pero se desconocen el
mecanismo y velocidad. Un efecto es producir mayor actividad en el ritmo de la mitosis
celular, por lo que se le llama hormona de la división celular, así como la auxina hormona
del alargamiento, esta caracterización no es absoluta ya que la citoquinina promueve un
poco el alargamiento. El otro efecto es el retardo del envejecimiento o senescencia de los
órganos y los fenómenos a que esta da lugar como amarillamiento y caída de las hojas ,sea
por acción sobre el DNA o porque la presencia de citoquinina hace afluir, por un
mecanismo no conocido, auxina y nutrientes a las hojas.
METABOLISMO
Chong-Maw Chen y D.K.Malitz(1979) demostraron que los tejidos del tabaco
contienen una enzima llamada isopentenil AMP sintasa que forma 5’-fosfato de isopentenil
adenosina (isopentenil AMP)a partir de AMP y un isómero del pirofosfato de isopentenilo
.Este ultimo compuesto isómero del pirofosfato de isopentenilo. Este ultimo precursor es un
producto de la ruta del mevalonato y es un precursor importante de esteroles , giberelinas,
carotenoides y otros compuestos isoprenoides.
El isopentenil AMP que se forma en esta reacción puede convertirse después en
isopentenil adenosina por eliminación hidrolitica del grupo fosfato mediante una enzima
fosfatasa y la isopentenil adenosina se puede convertir luego en isopentenil adenina por
eliminación hidrolitica del grupo ribosa .Además, la isopentenil adenina se puede oxidar a
zeatina mediante el reemplazo de un H por un OH en un grupo metilo del lado de la cadena
de isopentenilo. La dihidro zeatina se forma entonces a partir de la zeatina por reducción
(con NADPH) del doble enlace de la cadena lateral de isopentenilo. Las concentraciones
celulares de citoquinina también son influidas por su degradación y por su conversión en
derivados probablemente inactivos, diferentes de los nucleosidos y nucleotidos. La
degradación es efectuada principalmente por la citocinina oxidasa, un sistema enzimático
que extrae la cadena lateral de cinco carbonos y libera la adenina.
RECEPTORES DE LAS CITOQUININAS
En diversos vegetales , se ha demostrado que existen proteínas que se unen a las
citoquininas .Estas proteínas ,en principio ,podrían funcionar como receptores de
citoquininas .Una de ellas ,la proteína CBFI(cytokinin binding factor I) de los embriones
del trigo,pero presentan una baja afinidad de unión a la zeatina .La función de esta proteína
parece ser que inhibe la transferencia de citoquininas desde el endospermo al embrion de la
semilla .
En hojas verdes de cebada,en brotes de maiz y en hojas de tabaco,se ha demostrado
la presencia de otras proteínas como es el CBP(cytokinin binding proteins) que parecen ser
mejores candidatos para el papel de receptor de citoquininas .A un nivel celular,las
citoquininas también parecen poseer un efecto directo sobre los niveles de DNA celular y
sobre la sintesis de proteínas .En meristemos de mostaza ,las citoquininas también
promueven la división celular,al menos parcialmente .afectando la replicaron del DNA.
SITIO DE SINTESIS Y TRANSPORTE DE CITOCININA
En, general los niveles de citocinina son máximos en órganos jóvenes (semillas,
frutos y hojas) y en las puntas de las raíces. Para las puntas de raíces, casi con seguridad
interviene la síntesis porque si las raíces se cortan en forma horizontal, exudan citocininas
(debido a la presión de raíz) desde el xilema de las partes inferiores restantes por periodos
de hasta 4 días. No es probable que estas partes inferiores puedan almacenar las suficientes
citocininas derivadas de alguna otra fuente, y así actuar como fuente a plazo bastante largo
para el dilema.
Hechos como estos han conducido a la idea difundida que las puntas de las raíces
sintetizan la citocinina y las transportan a través del xilema a todas las partes de la planta.
Esto podría explicar su acumulación en hojas jóvenes frutos y semillas en los que ocurre.
Transporte por xilema, pero en general el floema es un sistema de suministro más eficaz
para órganos que tienen transpiración limitada, aunque es probable que las puntas de las
raíces si representen una fuente importante de citocinina para diversas partes de la planta.
Plantas pequeñas sin raíces de tabaco convierten eficazmente adenina reactiva en diversas
citocininas, La adenina radiactiva fue convertida en varias citocininas no solo por raíces de
chícharos, sino también por tallos y hojas de esa planta. Se investigo también a las raíces de
zanahoria, y los resultados indicaron que fueron principalmente las regiones cambiales de
la raíz las que sintetizaron las citocininas.
El transporte de varios tipos de citocininas ciertamente se realiza en el xilema ,pero
los tubos cribosos también contienen, como lo demuestra la presencia de estas en la
mielecilla de los afidos los experimentos con hojas desprendidas de dicotiledoneas dan mas
evidencias de transporte en el floema, cuando se corta una hoja madura de plantas de
determinadas especies y se mantiene húmeda, las citocininas se mueven a la base del
peciolo y se acumula ahí. Este movimiento probablemente se realiza por el floema no por el
xilema, porque la transpiración favorece mucho el flujo por el xilema, desde el peciolo
hacia la hoja. La acumulación de citocinina en el peciolo implica que las hojas maduras
pueden suministrar citocininas a las hojas jóvenes y a otros tejidos jóvenes a través del
floema, siempre que por supuesto, esas hojas puedan sintetizar citocininas o recibirlas de
las raíces.
Sin embargo, sise agrega una citocinina radiactiva a la superficie de una hoja, muy
poca de la que se absorbe se transporta hacia afuera. Estos resultados y muchos mas indican
que las citocininas no se distribuyen con facilidad en el floema .
EFECTOS DE LAS CITOQUININAS SOBRE TALLOS Y RAICES
Se piensa que para el crecimiento normal de tallos y raíces se necesitan citoquininas
,pero las cantidades rara vez son limitantes. Como resultado, la aplicación de citoquininas
exógenas no contribuye al crecimiento de la hoja a partir de plantas sin raíz. Sin embargo,
supongamos que detenemos el suministro de citoquininas (y de giberelinas) de las raíces al
sistema aéreo eliminando las raíces. ,por ejemplo en el girasol y el chícharo no tuvo éxito la
restauración del crecimiento ,pero si lo tuvo en la soya. Otro método para determinar la
importancia de las citoquininas en el crecimiento normal de tallos y raíces es cortar
secciones y hacerlas crecer en vitro, como se hizo en experimentos con auxinas y
giberelinas En tales experimentos la hipótesis es que las citoquininas de las secciones se
agotaran cuando estas se separen de las puntas del tallo o de la raíz, que se supone
representan fuentes de hormonas. Cuando se hacen crecer secciones de raíz o tallo in vitro
con una citoquinina exógena, casi siempre se retarda la elongacion respecto a la de
secciones testigo. Es interesante el hecho de que si bien se inhibe el alargamiento, las
secciones del tallo en general se hacen mas gruesas por expansión radial de las células, de
modo que el peso fresco global de las secciones tratadas no es muy diferente del de las
secciones testigo.
Podríamos decir que los tallos y raíces en elongacion no necesitan citoquininas. O
también que, aunque esos órganos podrían necesitar las hormonas para su alargamiento
pueden ya contenerlas en cantidad suficiente. En ambos casos podríamos argumentar que
las citoquininas exógenas inhiben el crecimiento in vitro originando concentraciones
internas excesivas. Parece que no hay un método fácil de resolver este problema sin medir
las concentraciones internas de citoquininas en secciones cortadas, en especial en las
células epidérmicas que probablemente limitan la velocidad general de alargamiento.
Sin embargo, se conocen dos casos en los que la aplicación de citoquininas si
produce un alargamiento: secciones de coleoptilos de trigo e hipocotilos intactos de sandia.
En los coleoptilos de trigo, la promoción del crecimiento solo se presenta si los tejidos son
todavía jóvenes y todavía ocurre división celular, pero se encontró que las citoquininas
causan el crecimiento promoviendo la elongacion celular y no la división.
EFECTOS FUNDAMENTALES
-Inducción de iniciación del crecimiento en los tallos y ramas.
-Rompimiento del letargo de las yemas y semillas en muchas especies.
-Un efecto sobre el fenómeno de dominancia apical, aunque este es muy complejo y parece
depender de un balance entre citoquininas, giberelinas y auxinas, Es importante que existe
un equilibrio auxina/citoquinina, pues la auxina induce diferenciacion de la raíz y la
citoquinina diferenciación del tallo. La citoquinina influye sobre el transporte de nutrientes
tal vez como efecto de la activación del metabolismo.
-Inducción de la partenocarpia en algunos frutos.
-La activación de la división celular en algunos microorganismos.
-La activación de la formación de yemas en hojas separadas de la planta y en algunos
musgos.
-Estimulación de la perdida de agua por transpiración en algunas plantas.
-Estimulación de la formación de tubérculos en la papa.
-Estimulación del crecimiento en algunas especies de algas.
ACCION COMBINADA DE LA AUXINA CON CITOQUININA
Las auxinas usadas junto con las citoquininas pueden estimular o suprimir la
embriogenesis in vitro .La adición de auxinas tales como AIA y 2,4 –D al medio de cultivo
en concentraciones elevadas ,suprimen significativa o totalmente la embriogenesis mientras
que los inhibidores de síntesis de auxina (7 azi-indol y 5-HNB) estimulan este proceso al
igual que las altas concentraciones de citoquininas ,especialmente cinetina y
benzilaminopurina .Uno de los ejemplos más claros de la actividad de la citoquinina ocurre
en la germinación de gérmenes.El endospermo de los gérmenes del monocotiledon ,tales
como el maíz ,contiene almacenes grandes del precursor zeatin ,cuando el núcleo del maíz
germina, los movimientos del zeatin del endospermo a la raíz se inclinan donde se estimula
mitosis vigorosa.
INICIACION DE LOS BROTES ADVENTICIOS
Se pueden iniciar nuevos ápices de ramas o brotes ya sea:
1)Directamente del explante
2)indirectamente del callo que se forma en la superficie cortada del explante.
Los dos factores más importantes que afectan la iniciación de brotes adventicios son:
1)la relación del explante
2)El régimen de hormonas que se suministran a las plantas.
Entre los tipos de explantes hay los siguientes;
Porciones de hojas que se usan en plantas como Saintpaulia y rábanos picantes que
de manera natural se regeneran de esta forma. Se utilizan explantes de puntas de tallos en
varias especies como en orquídeas, y helechos en los cuales se desarrollan masas de tejidos
de tipo callo y regeneran a un gran numero de brotes, con el tiempo las plantas iniciadas de
puntas de callos con el propósito inicial de brotes axilares, pueden revertir a formar alto
porcentaje de brotes adventicios.
Cotiledones ,hipocotilos y otras estructuras de plantulas han sido en particular útiles
como material inicial para coníferas en las cuales se puede usar segmentos de cotiledones
separados para regenerar nuevos brotes, en presencia de citoquininas,
Se han usado fascículos de agujas de jóvenes procedentes de arboles coníferos
viejos para regenerar tallos. Los explantes obtenidos de tejidos vegetales que han sido
rejuvenecidos a un estado juvenil han sido en particular responsivos .
Los discos de tejidos de tubérculos de papa, separado de la corteza justo en el
interior o exterior del anillo vascular tienen capacidad para regenerar brotes adventicios,
pero no así de aquellos procedentes de la medula.
La iniciación directa principia con células de parenquima que están situadas ya sea
en la epidermis o justo abajo de la superficie del tallo; algunas de esas células se vuelve
meristemoides las cuales aparentemente se originan de células individuales, sin embargo, la
respuesta de los explantes depende de la concentración de hormonas
FORMACION DE BROTES ADVENTICIOS EN ABETO DOUGLAS
En un estudio de la iniciación de brotes adventicios en cotiledones de Abeto
Douglas se necesito la citoquinina (BAP 5mM), para inducir la formacion de yemas
adventicias, pero resultaron 3 patrones de respuesta, dependiendo del nivel de auxina
también proporcionado. Con baja proporción de auxina (NAA 5mM)solo se desarrollaron
brotes .Con cantidades mayores de auxina los cotiledones produjeron callo y muchos
brotes. Cuando se añadió solo auxina (NAA 5mM) solo se formo callo.
El desarrollo indirecto de brotes adventicios implica, primero la iniciación de callo
basal de los brotes separados en cultivos, Los brotes se originan en la periferia del callo e
inicialmente no están conectados al tejido vascular del explante, de manera similar, en
plantas intactas, si se aplica citoquinina en bloques de agar cilíndrico pueden originarse de
brotes del callo formado en el ápice de epicotilos decapitados. En general la formación de
brotes adventicios puede conducir a tasas muy elevadas de multiplicación, mas altas que los
que se obtienen de ramas axilares. Por otra parte, los brotes adventicios pueden aumentar
las tasas de producción de plantas aberrantes, resultantes de la partición de quimeras que en
algunos cultivares resulta en la perdida de la variegacion y en reversiones a una condición
más juvenil, cuando se use este sistema las plantas producidas deben evaluarse
cuidadosamente respecto a la posible variación.
Las diferentes plantas pueden responder en un modo distinto a las diversas
citoquininas y auxinas a parte debido a su control hormonal natural. Una secuencia
apropiada de hormonas es de importancia particular en cuanto que una hormona puede
tener un efecto inductor pero debe estar ausente o en cantidad reducida para que crezca el
órgano. Por ejemplo las concentraciones elevadas de citoquininas estimularon la iniciación
de yemas ramales en los cotiledones de abeto Douglas, pero tuvo que ser removidos para el
desarrollo subsecuente de los brotes.en forma similar la auxina estimula la iniciación de
raíces en tallos, pero puede inhibir o reducir el crecimiento subsecuente de las raíces. La
secuencia debe ser establecida empíricamente para las diversas especies de plantas.
PROPAGACION VEGETATIVA O CLONAL EN ORQUIDEAS
Se han desarrollado distintos métodos de propagación por meristemas dependiendo
del tipo de explante y la especie a propagar. En la propagación por meristemas de yemas de
brotes vegetativos se utilizan como fuente de explante brotes vegetativos en crecimiento,
los cuales son esterilizados en hipoclorito de calcio o de sodio al 4% por 20-30 min. Luego
se enjuagan en agua destilada estéril y se procede al aislamiento y siembra de los
meristemas o de las yemas. Otro tipo de propagación vegetativa se lleva a cabo utilizando
las yemas de los brotes de vara floral, esta técnica ha sido aplicada con éxito en Cymbidium
y Phalaenopsis.Consiste en el corte de los nudos que contienen yemas dormantes, su
esterilización, enjuague y siembra en medios de cultivos con hormonas que inducen la
formación de nuevas plantillas a partir de esas yemas.
PROPAGACION POR YEMAS DE BROTE VEGETATIVO EN ORQUIDEAS
En las especies se observo que el tamaño optima de los brotes dormantes de las
yemas de brotes vegetativo es de 10 a 15 cm.los brotes fueron separados de la planta madre
haciendo un corte transversal al rizoma, muy cerca de la base del seudobulbo más próximos
incluyendo en algunos casos las raíces nuevas, los cortes mas arriba de los puntos indicados
pueden excluir algunas yemas útiles. Previo a la esterilización es conveniente un enjuague
del brote con alcohol al 75% por 10 seg. Lo que contribuye a eliminar la capa cerea que
dificulta la acción superficial del hipoclorito y la adición del tween 20 permite un mejor
contacto del esterilizante con la superficie del brote. Se encontró que los brotes de Cattleya
máxima Lindley y de Cattleya rex o’brien poseen 2 o 3 yemas basales y una yema apical.
De ellos se aisló una región meristematica de aproximadamente 2mm,que incluye al
meristema propiamente dicho con algunas hojas envolventes y un cubo de tejido basal.
Luego del aislamiento del explante fue sembrado en medio de cultivo liquido sin agitación,
el explante se hincho hasta que a las 6 a 8 semanas aparecieron estructuras semejantes a
protocormos con 1.0mg/l de ANA y 1.0mg/l de kinetina.
PROPAGACION VEGETATIVA IN VITRO DEL PAPAYO
Para ello se hizo una investigación y se busco establecer un medio optimo para la
propagación vegetativa in vitro de yemas de plantas adultas hembras o hermafroditas del
papayo, mediante la utilización del medio de Murashige y Skoog al cual se adiciono
diferentes concentraciones de auxinas, citoquininas y giberelinas .Para tal fin se empleo
yemas de plantas adultas de la variedad PAUNA y se evalúo el efecto de la interacción
auxina/citoquinina , auxina/giberelina , auxina /giberelina/citoquinina; encontrándose que la
interacción de 0.05ppm de AIA ,0.25ppm de BAP y 5.0 ppm de AG3suplementada con 100
ppm de sulfato de adenina ;permiten el establecimiento in vitro de explante de papayo
proveniente del campo .El desarrollo y crecimiento de las plantulas puede lograrse al
transferir a estas ,a un medio que contenga 0.05 ppm de AIA y 1.5 ppm de kinetina
suplementada con 100 ppm de ácido nicotinico.
CONCLUSIONES
-Para iniciar nuevos ápices de ramas o brotes pueden ser:directamente del explante o
indirectamente del callo que se forma en la superficie cortada del explante .
-Para iniciar brotes adventicios es importante seleccionar bien el explante y el régimen d
hormonas a que se sometan las plantas .
-los discos de tejidos de tubérculos de papas separado de la corteza justo en el interior o
exterior del anillo vascular tienen capacidad para regenerar brotes adventicios .
-Las concentraciones elevadas de citoquininas estimulan la iniciacion de yemas ramales en
los cotiledones de abeto Douglas .
-Se obtienen mayores protocormos con 1.0mg/l de ANA y 1.0mg/l de kinetina en Cattleya
maxima Lindley y Cattleya rex’obrien.
BIBLIOGRAFIA
-ASCON BIETO ,J y TALON M.1993.Fisiologia y bioquimica vegetal .1ra
edicion.Interamericana-Mc Graw-Hill.Madrid, España.
-HARTMANN,H.T,D.E,Kester ,F.T.Parites, Geneve.1997.Plant Propagation :principles
and practices 6ta ed. Prantice Hall Englewood.Cliffs.N:J
-ROJAS
GARCIDUEÑAS,
Manuel,
1990.Fisiologia
vegetal
aplicada.
4ta
ed.Interamericana Mc Graw-Hill Mexico.D, F
-BARCELLO
COLL,Juan.1995.Fisiologia
Vegetal
.7ma
ed.
Ediciones
Piramide
S:A.Madrid, España.
-ROJAS RAMIREZ, M.1987.Control hormonal del desarrollo de las plantas .1ra
ed.Editorial Limusa. México D.F
-WEAVER, M.1983.Reguladores de crecimiento de las plantas en la agricultura .4ta
edición. Reimpresion.Editorial Triller México.
-ALVARADO JARAMILLO,Maria Luisa .1992.Propagacion vegetativa in vitro del
papayo (tesis UNALM). Lima.Peru
-SALINAS ORDOÑEZ ,Roxana.1988.Cultivo in vitro de embriones de camote .(Tesis
UNALM) Lima.Peru
-VEJARANO , A.C; MARTINEZ 1982.Reguladores vegetales del crecimiento y desarrollo
Universidad Nacional Agraria La Molina .Dpto de Biologia.Lima.Peru
-www.florida plants.com/CR/Cytokini.htm
-http/prfholnt.upol.cz:81/growthreg/publ.htm
-www.gov.on.ca/OMAFRA/english/researchfund/agfooddocs/ag2042.htm.
-www.conncoll.edu/academics/departments/botanygrowth/tsld014.htm
-www.munksgaard.dk/plantarum/abs/pp100312.html.
-www.ulg.ac.be/cedevit/cytokinins.htm.
-http://koning.ecsu.ctstateu.edu/plant-physiology/cytokinins.html.
-www.nalusda .gov/ttic/tektran/data/0000090737html.
-www.nalusda.gov/ttic/tektran/data/000008/48/0000084818.html
-www.pacific-hydro.com/hormones.html.
-www.plant-hormones.bbsrc.ac.uk/education/kenc.htm