I-Manula-Extraccion_de_Sangre

INSTRUCTIVO
EXTRACCIÓN DE MUESTRAS
DE SANGRE
Mérida, mayo 2008
Introducción.
La extracción de muestras de sangre es una de las actividades más importantes
en este trabajo ecoepidemiológico, ya que es a partir de las muestras de sangre,
por una parte, de niños, jóvenes y adultos, y por otra parte de perros, de donde se
obtienen los sueros para hacer el diagnóstico de la enfermedad de Chagas, y
entonces poder
determinar los índices de
seroprevalencia y de
transmisión
activa de la enfermedad.
Los sueros son determinantes para obtener resultados de alta calidad en el
diagnóstico de la enfermedad de Chagas. Esto significa que la extracción,
coagulación, preservación e identificación de las muestras de sangre debe
hacerse de forma muy cuidadosa y metódica, a fin de evitar hemólisis (lisis de
glóbulos rojos), contaminación (microorganismos), choques térmicos (lisis).
Nunca se debe usar anticoagulantes, ya que se evitaría la formación de coágulo y
en vez de obtener suero obtendríamos plasma después de centrifugar las
muestras. Sin sustancias anticoagulantes, la sangre rápidamente formara un
coágulo y el suero será fácilmente obtenido centrifugando las muestras a 1500
gravedades (g) por 10 min. Una vez obtenido el suero, este debe identificarse y
almacenarse a una temperatura de -20 ºC hasta su uso posterior. La identificación
de la muestra de suero debe hacerse con una etiqueta que contiene un código
diseñado para accesar toda la información relacionada con el individuo (persona o
perro) como lo son sus datos personales y de vivienda.
Es muy importante evitar el congelamiento y descongelamiento reiterado de los
sueros debido a que esto disminuye los títulos de anticuerpos. Recuerde que,
precisamente, las pruebas que se usarán para el diagnóstico de la enfermedad de
Chagas consisten en la detección de anticuerpos del Trypanosoma cruzi.
El Jefe del equipo regional debe cerciorarse de que la persona que tomará las
muestras de sangre (enfermera, bioanalísta, etc.) conoce bien las técnicas y podrá
realizar eficientemente este trabajo y de ser necesario debe dársele el
entrenamiento teórico y práctico, de manera que se garantice la calidad de las
muestras serológicas.
Una vez que el supervisor de campo le indique que puede empezar a tomar las
muestras de sangre, proceda primero con las personas y después con los perros,
de acuerdo a las siguientes indicaciones.
1. Métodos de análisis de sangre: ELISA y MABA.
Las muestras de sangre serán usadas para determinar anticuerpos del
Trypanosoma cruzi, con los métodos, ELISA y MABA.
2. Métodos para extraer muestras sanguíneas en humanos.

Punciones Venosas.

Punciones Capilares.

Punciones con lancetas

A través de Catéteres Centrales.
Véase el apéndice uno (1) para mayores detalles sobre cada una de estas
técnicas.
3. Métodos para extraer muestras sanguíneas en perros.
Se pueden usar diferentes técnicas para extraer la muestra de sangre de un
perro, sin embargo, siempre puede hacerse mediante punción venosa. Véase
el apéndice dos (2) para mayores detalles sobre esta técnica.
4. Equipo para la extracción de las muestras de sangre.
Antes de comenzar la tarea de tomar las muestras de sangre asegúrese de
tener consigo lo siguiente:
-
La planilla P-05, Examen serológico de las personas.
-
La planilla P-06, Examen serológico de los perros.
-
Una tabla de números aletorios.
-
Etiquetas autoadhesivas rotuladas con el código de la vivienda.
-
Un (1) marcador con tinta indeleble.
-
Guantes desechables, estériles.
-
Capilares de microhematocrito.
-
Plastilina para sellar los capilares.
-
Papel de filtro especial (3MM Whatman).
-
Palomillas con sistema de vacío números 21, 23, 25.
-
Campana o adaptador para extracción por vacío tipo Vacutainer®.
-
Tubos microtainer® para recogida de muestras.
-
Tubos de vacío para analítica.
-
Jeringas estériles de 5 ml. y 10 ml.
-
Lancetas.
-
Torundas de algodón /Gasas estériles.
-
Alcohol de 70%.
-
Tubos para el depósito de la sangre.
-
Bozal para perros.
-
Soga para sujetar el animal
Instrumento para rasurar.
-
Bolas plásticas para depositar los materiales de desecho.
-
Gradillas para los tubos para el depósito de la sangre
-
Hielo seco
-
Cava tipo Coleman para guardar las muestras serológicas.
5. Identificación de planillas Forma P-05 y Forma P-06.
El control de las muestras de sangre para personas y de los perros se efectúa
mediante las planillas Forma P-05 y Forma P-06.. La información registrada
en estas planillas estará relacionada con el resto de la base datos mediante el
código que identifica unívocamente la vivienda dentro del país.
Para identificar una planilla tome una etiqueta autoadhesiva rotulada con el
código de la vivienda actual y péguela en la parte superior derecha de la
planilla, en el espacio identificado como código de vivienda. La referida
etiqueta autoadhesiva solamente está rotulada con seis (seis) dígitos, debido a
que solo seis son necesarios para identificar la vivienda. El resto de la etiqueta
debe quedar sin rellenar.
La planilla Forma P-05 (EXAMEN SEROLÓGICO DE LAS PERSONAS)
permite registrar información para 10 personas solamente, en caso de ser
necesario debe utilizarse una planilla adicional. Por ejemplo, si hubiese 12
personas en la vivienda Ud. debe utilizar dos planillas. En la primera planilla
debe indicarse que es la primera de dos, es decir, debe leerse
PLANILLA: 1 DE 2.
La segunda planilla debe estar identificada igual que la primera con una
etiqueta autoadhesiva rotulada con el número de la vivienda y debe leerse en
su parte superior derecha como PLANILLA: 2 DE 2.
La planilla Forma P-06 (EXAMEN SEROLÓGICO DE LOS PERROS) permite
registrar máximo cuatro (4) perros, pero uno o dos son suficientes para los
objetivos de esta investigación.
Agregue a las planillas, con letra de imprenta, la información sobre entidad
federal, municipio, parroquia, centro poblado, urbanización o barrio, calle o
avenida o vereda y nombre o número de la vivienda.
6. Toma de Muestras de Sangre de las Personas.
El supervisor de campo le indicará el momento de iniciar la tarea de tomar las
muestras de las personas y le entregará las planillas Forma P-05 (EXAMEN
SEROLÓGICO DE LAS PERSONAS) y Forma P-00 (Composición del hogar
y caracteristicas individuales). Esta última planilla, contiene la lista de las
personas que habitan en esa vivienda. Sin embargo, no necesariamente todas
las personas listadas en esta planilla estarán presentes en ese momento para
poder tomarles la correspondiente muestra de sangre.
Para cada una de las personas listadas en la Forma P-00, y en ese mismo
orden, asegúrese de que la información registrada en la última columna de
la planilla es correcta. En la planilla debe indicar un dos (2) si la persona no
está disponible en ese momento para poder tomar la muestra de sangre,
en caso contrario, la planilla debe indicar uno (1).
En caso de estar disponible la persona, tome una etiqueta autoadhesiva
rotulada con el código de la vivienda y escriba, enseguida del código de la
vivienda, con el marcador indeleble, el mismo número de dos (2) dígitos
que aparece en la primera columna de la planilla Forma P-00,
correspondiente a la persona de turno. Además marque una equis (x) en el
recuadro correspondiente a la persona.
Ahora tome un tubo de deposito de sangre y péguele la etiqueta
autoadhesiva y proceda a extraer la muestra de sangre, de acuerdo al las
instrucciones dadas en el apéndice uno (1).
Una vez extraída la muestra de sangre e introducida en el tubo
correspondiente, proceda a registrar los datos de la persona en la planilla
Forma P-05, es decir, número de persona, nombre y apellido, y el género.
El ítem Nº de persona debe indicar exactamente el número anotado en la
etiqueta autoadhesiva que identifica al tubo que contiene la muestra de
sangre de esa persona.
Al finalizar con la extracción de sangre de todas las personas disponibles
en la vivienda, anote en la primera columna de la(s) planilla(s) Forma P-05
utilizada(s), el total de muestras de sangre tomadas en esa vivienda y
entréguela(s) al supervisor de campo.
7. Toma de muestras de sangre de perros.
El supervisor de campo le indicará el momento de iniciar la tarea de tomar las
muestras de los perros indicará
y le entregará la planilla Forma P-06
(EXAMEN SEROLÓGICO DE LOS PERROS).
Si en la vivienda habitan más de dos perros, el supervisor de campo elegirá,
mediante un procedimiento aleatorio, entre un mínimo de 2 y un máximo de 4
perros para tomarles las muestras de sangre.
Para cada uno de los perros elegidos para tomarles la muestra de sangre,
tome una etiqueta autoadhesiva rotulada con el código de la vivienda y escriba,
seguida del código de la vivienda, con el marcador indeleble un número de dos
(2) dígitos, con el cual se identificará el perro. Además marque una equis (x)
en el recuadro correspondiente a perro.
Ahora tome el tubo de muestras de sangre y péguele la etiqueta autoadhesiva
y proceda a extraer la muestra de sangre, de acuerdo al las instrucciones
dadas en el apéndice uno (2).
Una vez extraída la muestra de sangre e introducida en el tubo
correspondiente, proceda a registrar los datos del perro en la planilla
Forma
P-06. Es decir, número del perro, el nombre del perro y el género del perro. El
ítem
Nº de de perro debe indicar exactamente el número anotado en la
etiqueta autoadhesiva que identifica al tubo que contiene la muestra de sangre
del perro.
Al finalizar con la extracción de sangre de los perros elegidos en la vivienda,
anote en la primera columna de la planilla Forma P-06, el total de muestras de
sangre de perros tomadas en esa vivienda y entréguela al supervisor de
campo.
Apéndice 1:
Extracción de muestras de sangre.
INTRODUCCIÓN
Los distintos análisis de laboratorio nos dan información muy valiosa acerca del
estado de los niños, jóvenes y adultos, ayudándonos en el diagnóstico y a la hora
de administrar tratamientos en el caso de que alguna persona salga positiva para
la enfermedad de Chagas.
En la sangre venosa se pueden hacer diversos y diferentes estudios analíticos, ya
sean desde el punto de vista bioquímico, hematológico, microbiológico y
serológico.
El sitio de punción en el paciente varía dependiendo de la edad y tamaño de la
persona, así como de la accesibilidad de la vena. En niños mayores puede
utilizarse cualquier vena accesible, de forma similar al paciente adulto, mientras
que en recién nacidos y lactantes las venas superficiales del cuero cabelludo y de
las extremidades dístales pueden servir para la extracción de sangre.
La persona que realiza la técnica es la enfermera y/o bioanalista. La auxiliar de
enfermería colabora en todo momento con ella.
Se puede contar con diferentes técnicas para obtener muestras sanguíneas:

Punciones Venosas.

Punciones Capilares.

Punciones con lancetas

A través de Catéteres Centrales.
OBJETIVO
Obtener una muestra de sangre de manera adecuada para efectuar su análisis:

Serológico para determinar anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi, con dos
métodos: ELISA y MABA.
EXTRACCIÓN DE MUESTRAS POR PUNCIÓN VENOSA: Consiste en recoger
muestras sanguíneas para el análisis del suero en el laboratorio.
Sitios de punción:

Axila: Vena axilar.

Antebrazo: Vena radial, cubital y mediana.

Mano: Venas dorsales de la mano.

Tobillo: Safena interna y externa.

Pie: Venas dorsales del pie.
Recursos Humanos:

Enfermera y/o bioanalista

Auxiliar de enfermería
Recursos Materiales.

Guantes desechables/ Guantes estériles

Palomillas con sistema de vacío números 21,23,25

Campana o adaptador para extracción por vacío tipo Vacutainer®

Tubos de vacío para analítica

Jeringa

Torundas de algodón /Gasas estériles

Alcohol de 70%

Tubos depósitos de la sangre

Etiquetas identificativas
Descripción de la técnica:

Preparar el material

Identificar la persona

En caso de tratarse de un niño explicar a la madre el procedimiento que
vamos a realizar. También podemos hablar con el niño adaptando
nuestras explicaciones a su edad y nivel de comprensión

Lavado de manos con agua y jabón

Colocarse los guantes desechables

Colocar cómodamente e inmovilizar al niño

Colocar compresor por encima del sitio de punción, para producir
ingurgitación de la vena

Seleccionar el vaso mediante el tacto, así determinaremos la
profundidad, calibre, elasticidad, etc. También se puede localizar la vena
por inspección (color azulado). Abrir y cerrar el puño, en niños mayores,
puede ayudar a distender las venas de los miembros superiores

Desinfectar el punto de punción con torundas impregnadas de alcohol
de 70%

Pinchar la piel y posteriormente la vena en dirección contraria al flujo
sanguíneo, con un ángulo entre 15º y 30º respecto a la piel, con el bisel
de la aguja hacia arriba

Sacar la aguja y aplicar presión suave hasta lograr hemostasia.

Colocar apósito en el sitio de punción

Etiquetar los tubos
para su envío al laboratorio, con la petición
correspondiente

Retirar el material usado

Lavado de manos

Registrar el procedimiento en la historia (encuesta)
Complicaciones:

Sangrado excesivo por el punto de punción

Formación de hematomas

Infecciones por pérdida de integridad de la piel

Punciones múltiples para localizar las venas

Laceración de arteria o nervio adyacente

Trombosis o embolia en punción de grandes vasos

Desmayo o sensación de mareo
Observaciones:

Mantener asepsia durante la extracción.

Provocar el menor traumatismo posible en el sitio de punción.

Cambiar de aguja en caso de fallo en la punción.

No extraer sangre de una vena donde esté canalizado un goteo, ya que
la muestra estaría diluida y no daría valores reales.

No pinchar en zonas con infección local o hematomas.

No pinchar venas profundas en niños con alteraciones de coagulación.

Presionar unos 5 minutos hasta hacer hemostasia, en la zona de
punción, tras de la extracción.

Vigilar inflamación, calor o sangrado en el sitio de punción.
Extracción de muestras de sangre con lanceta en niños pequeños.
Sitios de punción:

Lateral externo o interno del talón

Caras laterales de las falanges dístales de los dedos de la mano
Recursos Humanos:

Enfermera y/o bioanalista

Auxiliar de enfermería
Recursos Materiales:

Guantes desechables

Lanceta

Capilares de microhematocrito

Plastilina para sellar los capilares

Tubos microtainer® para recogida de muestras

Papel de filtro especial (3MM Whatman)

Torunda con alcohol de 70º

Apósito/ Gasas

Batea con agua caliente

Etiquetas identificativas
Descripción de la técnica:

Lavado de manos con agua y jabón

Colocarse los guantes

Calentar el pie del cual se va a extraer sangre introduciéndolo en una batea
con agua templada a 41º, con el fin de producir vasodilatación
incrementando así el flujo sanguíneo

Sujetar el talón con los dedos pulgar e índice

Secar con una compresa y desinfectar con torundas impregnadas en
alcohol de 70º

Puncionar con una lanceta enérgica y perpendicularmente al lateral externo
o interno del talón

Presionar de forma intermitente el talón para favorecer la formación de la
gota de sangre

Rellenar los capilares de microhematocrito (evitando burbujas de aire), tubo
de micromuestra o papel filtro tomando sangre de la gota que se forma
espontáneamente

Limpiar y comprimir el sitio de punción

Colocar apósito o gasa anudada al talón

Sellar los capilares de hematocrito con plastilina en un extremo ó tapar el
tubo de micromuestra

Etiquetar las muestras para su envío al laboratorio correspondiente

Retirar el material usado

Lavado de manos

Registrar el procedimiento en la encuesta
Complicaciones:

Infecciones de tejidos blandos

Infecciones en el hueso (osteomielitis)

Celulitis por formación de abscesos

Sangrado excesivo por el punto de punción

Formación de hematomas
Observaciones:

Evitar zonas frías de punción.

No pinchar en la curvatura posterior del talón, la distancia entre el hueso
y la piel es mínima pudiéndose lesionar el hueso.

No pinchar en zonas con infección local o hematomas.

No pinchar con vasoconstricción periférica o cianosis.

No pinchar en niños edematosos.

En preescolares y escolares se elegirá preferentemente los laterales de
los dedos como zona de punción.

No presionar junto a la punción, al producirse hemólisis se mezclan
fluidos intersticiales e intracelulares con la sangre alterando los
resultados.

Evitar el uso de esparadrapo en niños prematuros y sustituir por una
gasa anudada, para no producir agresiones en la piel.
OBSERVACIONES GENERALES EN EL SANGRADO DE NIÑOS:

Tranquilizar y generar confianza en el niño consciente para aliviar el
nerviosismo.

La presencia y el contacto físico con los padres puede ayudar durante el
procedimiento.

Inmovilizar
al
niño
correctamente
para
evitar
lesionar
otras
estructuras.

Conocer los requisitos previos a la prueba (forma de recogida de la
muestra y conservación de la misma).

En ayunas, generalmente la muestra es más homogénea y ofrece
valores más precisos.

Identificación correcta de la muestra.

Conservar la muestra de la manera apropiada si no se lleva al
laboratorio antes de 5 minutos.