EXPERIENCIA DEL TAMIZAJE DEL VIRUS LINFOTRÓPICO HUMANO I / II EN DONANTES DE SANGRE DEL BANCO DE SANGRE DEL HOSPITAL SANTO TOMÁS Lic. Esmeralda Tuy de Lam (A.S.C.P.) M.D.S. Resumen En el Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás se realizan a los donantes de sangre, la prueba para detectar anticuerpos para el virus linfotrópico humano (HTLV I / II) como parte de las pruebas de tamizaje para detectar infecciones transmisibles por transfusión sanguínea. El deseo de conocer el porcentaje de seropositivos para anticuerpos HTLV I / II en la población de donantes de sangre, lleva a la realización de este estudio ya que la prueba para detectar anticuerpos HTLV I / II no se está realizando en todos los Bancos de Sangre. Para realizar este estudio se evaluaron serológicamente 4840 muestras de donantes de sangre que acudieron al Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás en el período comprendido entre agosto de 2004 y marzo de 2005. Se emplea la metodología de Ortho HTLV I / II Ab-Capture Elisa Test System. Al comparar el porcentaje de resultados positivos con los obtenidos en otras pruebas efectuadas a las sangres donadas, se observa que el rastreo de anticuerpos HTLV I / II ocupa un lugar significativo. Las muestras con resultados positivos son enviadas al 1 Laboratorio Central de Referencia de Salud Pública para su confirmación. Un informe adicional es remitido al Departamento de Epidemiología del Hospital Santo Tomás. Los resultados obtenidos en este estudio evidencian la necesidad de realizar la prueba de anticuerpos HTLV I / II a todas las unidades de sangre donadas. Palabras claves: Virus linfotrópico humano. Introducción La infección causada por el VIH ha cambiado la práctica transfusional en nuestros días. La necesidad de ofrecer a los pacientes transfusiones de componentes seguros, nos lleva a someter a las unidades de sangre donadas, a una mayor cantidad de estudios; para evitar el contagio de enfermedades a través de las transfusiones de componentes sanguíneos. El primer aislamiento de un retrovirus linfotrópico humano se reportó en Estados Unidos, en 1980; en un paciente con enfermedad agresiva de células T maduras. En Panamá los estudios para HTLV I / II se inician con el Dr. William Reeves del Laboratorio Conmemorativo Gorgas en 1983. Se determinó que la prevalencia en toda la República oscilaba entre 0.2% y 2%. (2) Los HTLV I / II al igual que el virus de la inmunodeficiencia adquirida pertenecen a la familia de los retrovirus. Son transmitidos por contacto sexual, exposición a sangre, (compartiendo agujas hipodérmicas y jeringuillas contaminadas), transfusiones de componentes celulares, transmisión de madre a hijo durante el período pre natal o a través de leche materna. El virus HTLV I entra en el cuerpo a través de linfocitos CD4+ infectados, mientras el HTLV II es encontrado predominantemente en las células CD8+. Una vez en el cuerpo el 2 virus puede penetrar e infectar cualquier tipo de célula. El virus linfotrópico humano puede permanecer en un individuo sin que éste presente manifestaciones clínicas. Entre 1-4% de las personas infectadas, generalmente entre edades de 30- 50 años pueden desarrollar la enfermedad, luego de un período de incubación que varía que oscila entre 10 a 40 años. (3) La infección por virus HTLV-I se caracteriza por estar distribuida en regiones geográficas definidas que aparentemente no se relacionan, aunque hay amplios estudios de migraciones que podrían explicar un pasado común. Es endémico en Japón, Caribe, África, América del Sur. Etiológicamente el HTVL I está asociado a la leucemia de células T del adulto (ATL) y diversos trastornos neurológicos de desmielinización que incluyen paraparesia espástica tropical (TSP) y/o mielopatía asociada a HTLV I (HAM), poliomiositis, artritis y dermatitis infecciosa. (4) El HTL II se asocia a casos de patologías linfoproliferativas como las leucemias de de células peludas. Se le asocia también a trastornos neurodegenerativos, aunque su papel etiológico todavía tiene que establecerse plenamente. El HTLV II es endémico en algunas poblaciones de indios americanos. El presente estudio es el resultado de la experiencia obtenida del trabajo en equipo al realizar las pruebas de HTLV I / II a donantes del Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás. Objetivos Conocer la seroprevalencia de HTLV I / II en los donantes del Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás. Comparar la seroprevalencia de HTLV I / II con las observadas en otras pruebas de tamizaje viral realizadas a las unidades de sangre donadas en el Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás. 3 Materiales Micropipetas Pipeta multicanal Lavador automático marca Tecan Micro lector marca Sunrise Reactivo Ortho HTLV I / HTLV II Ab capture ELISA Test System Método: Se realizó el tamizaje para anticuerpos HTLV I / II a 4840 muestras de donantes que acuden al Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás, en el período comprendido desde agosto de 2004 hasta marzo de 2005. La metodología empleada para el tamizaje de donantes, es un inmunoensayo enzimático cualitativo para la detección de anticuerpos frente al virus linfotrópico de células T humanas I y/o II en suero o plasma humanos. (5) Se utiliza para el tamizaje de HTLV I / II una prueba de inmunoensayo enzimático (ELISA), que utiliza como fase sólida pocillos revestidos con cuatro antígenos recombinantes HTLV I y HTLV II. El conjugado utilizado consiste en una mezcla de los cuatro antígenos HTLV I y HTLV II recombinantes conjugados con peroxidasa de rábano. Si hay presencia de anticuerpo anti-HTLV I / II se forma un complejo antígeno anticuerpo al cual se pega el conjugado para luego ser detectado y medido colorimétricamente. (5) 4 Resultados y discusión De los 4840 muestras estudiadas, 19 resultaron positivas por HTLV I / II lo que representa el 0.40% del total de muestras. Las pruebas de las muestras positivas fueron repetidas y enviadas al Laboratorio Central de Referencia de Salud Pública para su confirmación; resultando todas positivas. De dichas muestras 16 correspondían a donantes de sangre de sexo masculino y 3 al sexo femenino. La tabla No. 1 muestra los resultados de las pruebas para anticuerpos HTLV I / II para el período entre agosto de 2004 a marzo de 2005. TABLA No. 1 Resultados obtenidos en tamizaje para HTLV I / II en donantes de sangre para el período comprendido entre agosto de 2004 a marzo de 2005 PRUEBAS POSITIVAS PREBAS NEGATIVAS CANTIDAD CANTIDAD CANTIDAD DE MES DONANTES % % Agosto 2004 484 1 0.2 483 99.8 Septiembre 2004 622 2 0.6 620 99.4 Octubre 20 04 774 1 0.1 773 99.9 Noviembre 2004 496 3 0.6 493 99.4 Diciembre 2004 749 6 0.8 743 99.2 Enero 2005 661 3 0.4 658 99.6 Febrero 2005 538 2 0.4 536 99.6 Marzo 2005 516 1 0.2 515 99.8 TOTAL 4840 19 0.4 4821 99.5 5 FUENTE: REGISTROS DE BANCO DE SANGRE HOSPITAL SANTO TOMÁS. AGOSTO 2004 A MARZO DE 2005. Los resultados positivos para HTLV I / II presentados en porcentaje pueden observarse en la GRÁFICA No. 1. El mes de diciembre de 2004 muestra el mayor porcentaje de resultados positivos 0.8%. El mes de octubre de 2004 presenta el menor porcentaje de resultados positivos 0.1%. GRÁFICA No.1 Porcentajes de pruebas de HTLV I / II positivas en donantes de sangre PORCENTAJE DE PRUEBAS DE HTLV I / II POSITIVAS EN DONANTES DE SANGRE DEL HOSPITAL SANTO TOMÁS % POSITIVAS 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 Aug04 Sep04 Oct04 Nov04 Dec04 Jan05 Feb05 Mar05 MES FUENTE: REGISTROS DEL BANCO DE SANGRE DEL HOSPITAL SANTO TOMÁS. AGOSTO 2004 A MARZO DE 2005. Si comparamos el porcentaje de pruebas para HTLV I / II obtenido con los porcentajes de las otras pruebas virales que se realizan a las unidades de sangre donadas, el HTLV I / II (0.4%) muestra una frecuencia de positividad mayor que el VIH (0.3%) y la Hepatitis B 6 (0.1%) (TABLA No.2). El mayor porcentaje de resultados positivos corresponde a la prueba de HBc (2.3%). CANTIDAD DE PRUEBAS REALIZADAS POSITIVOS % DE POSITIVOS HBc 108 2.2 HCV 54 1.1 HTLV I / II 19 0.4 HIV 15 0.3 CHAGAS 14 0.3 HBsAg 7 0.1 TABLA No. 2 Resultados de pruebas de tamizaje para detectar infecciones transmisibles por transfusión en muestras de donantes de sangre del Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás. FUENTE: REGISTROS DE BANCO DE SANGRE DEL HOSPITAL SANTO TOMÁS. AGOSTO 2004 A MARZO DE 2005. Estudios realizados por la Dra. Patricia Vásquez, presentados en la Revista Chilena de Infectología; muestran que la seroprevalencia del HTLV I comparada con otras pruebas para detectar infecciones de transmisión vía transfusión; ocupa un lugar importante. Tabla No. 3. (6) En el mismo estudio la autora señala la seroprevalencia del HTLV I en otros países como Estados Unidos: Los Angeles 0.1%, en Washington: 0,06%. En Japón: 0 a 20% y en Jamaica: 6%. (6) 7 TABLA No.3 % pruebas para detección de vía transfusión en el Banco Salvador. Chile. 2003 Seroprevalencia de infecciones transmisibles PRUEBA POSITIVOS CHAGAS 0.6 HTLV 1 0.3 HCV 0.25 HIV 0.075 HBsAg 0.05 de Sangre del Hospital Del FUENTE: ARTÍCULO: HTLV 1 ¿ALGO MÁS QUE DECIR? REVISTA CHILENA DE INFECTOLOGÍA. AÑO 2003. Estudios sobre seropositividad al virus HTLV I / II en donantes del Banco Municipal de Sangre de Caracas muestran que 0.2% de las donaciones de sangre resultaron como indican 8 ellos repetidas reactivas (RR). La Tabla No. 4 muestra los porcentajes de seroprevalencia de otras pruebas para detectar infecciones vía transfusión realizadas en el Banco Municipal de Sangre de Caracas. De acuerdo a la Dra. León “El hecho de que la infección por el HTLVI / II puede transmitirse por una transfusión, aunque pueda no acarrear consecuencias de linfoma o leucemia de células T del adulto, es razón suficiente para establecer su tamizaje en los TABLA No. 4 PRUEBA HBsAg HTLV 1 / 2 SÍFILIS HCV CHAGAS HIV % POSITIVOS 6.0 0.2 1.43 0.86 0.69 0.41 bancos de sangre”. Seroprevalencia de pruebas para detección de infecciones transmisibles vía transfusión en el Banco Municipal de Sangre de Caracas FUENTE: REVISTA PANAMERICANA DE SALUD PÚBLICA. AÑO 2003. Conclusiones Al finalizar el presente estudio podemos concluir en que: El porcentaje de pruebas positivas para HTLV I / II entre donantes de sangre en el Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás, es significativo si lo comparamos con 9 los obtenidos con los observados en otras pruebas realizadas para detectar enfermedades de transmisión por transfusión. La frecuencia de resultados positivos observada entre los donantes estudiados, el hecho de que el HTLV I / II es capaz de ser transmitido vía transfusión; evidencia la necesidad de implementar el tamizaje para HTLV / II como prueba viral de rutina a realizar a los donantes de sangre. RECOMENDACIONES El porcentaje de resultados positivos para HTLV I / II en el Banco de Sangre del Hospital Santo Tomás, hace necesario se realice esta prueba en forma obligatoria; a todas las unidades de sangre donada en la República de Panamá. BIBLIOGRAFÍA 1. American Asssociation of Blood Bank. 1987. Transfusion-transmitted viruses: epidemiology and pathology. 1a Edición. AABB. Arlington. 2. Armien, B. 1997. Epidemiología de la infección por el Virus Linfotrópico Humano de células T tipo II (HTLV II) entre indígenas Guaymíes (Ngöbe) de Bocas del Toro. 3. Catalan-Soares,B., A. Carneiro-P. et al. 2004. Human T-cell.lymphotropic virus in family members of seropositive blood donors: silent dissemination. Revista Panamericana de Salud Pública. Vol 16. Nº 6. Washington 10 4. León, G., Quirós A. et al. 2003. Seropositividad al virus linfotrópico de células T humanas tipos I y II en donantes del Banco Municipal de Sangre de Caracas y factores de riesgo asociados. Revista Panamericana de Salud Pública. Vol.13 No. 2/3.Washington 5. Ortho- Clinical Diagnostics, Inc. Ortho HTLV I/II Ab Capture Elisa Test System. 2003.Ratitan, New Jersey. 6. Vásquez T., P . HTLV I (Human T-cell lymphotropic virus) ¿algo que decir? [ON LINE]. 2003. www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttex&pid=S0716 [citado 10 abril de 2005] 11