Tabla de Contenidos:

DIRECCIÓN DE SALUD REPRODUCTIVA
Recepción y Análisis de Semen Nacional e Importado
Elaborado por: Dirección Salud
Reproductiva
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0. Tabla de Contenidos:
1.
Objetivo: ....................................................................................................................................................................... 1
2.
Alcance:........................................................................................................................................................................ 1
3.
Responsabilidad: ........................................................................................................................................................... 1
4.
Definiciones .................................................................................................................................................................. 2
5.
Abreviaturas y/o Siglas ................................................................................................................................................... 3
6.
Referencias ................................................................................................................................................................... 3
7.
Descripción ................................................................................................................................................................... 3
8.
Anexo: Flujograma ......................................................................................................................................................... 6
1. Objetivo:
1.1. Establecer los lineamientos a seguir para la evaluación macro y microscópica de semen congelado Nacional e
importado, de acuerdo a la regulación y normativa vigentes.
2. Alcance:
2.1. Aplica al material genético seminal Nacional e importado de las especies Bovina y Porcina.
3. Responsabilidad:
3.1. Personal técnico
3.1.1. Serán encargados de la recepción de la muestra utilizando el DSR-PG-010-RE-001 “Recepción de Muestra
(S) para Evaluación Macroscópica y Microscópica del Semen Congelado Nacional e Importado.
3.2. Departamento de Material Genético Animal
3.2.1. Será encargado de recibir, analizar y emitir resultados de las muestras, mediante el DSR-PG-010-RE-001
“Recepción de Muestra (S) para evaluación macroscópica y microscópica de semen congelado nacional e
importado”, el DSR-PG-010-RE-002 “ Evaluación Macroscópica y Microscópica de Semen Congelado Nacional e
Importado y el DSR-PG-010-RE-003 “Reporte de Resultados de Evaluación Macroscópica y Microscopia de
Semen Congelado Nacional e Importado”.
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3.3. Director de Salud Reproductiva
3.3.1. Delegar al personal del DMGA a realizar los análisis y resultados correspondientes mediante los registros,
DSR-PG-010-RE-001 “Recepción de Muestra (S) Para Evaluación Macroscópica y Microscópica de Semen
Congelado Nacional e Importado, el DSR-PG-010-RE-002 “Evaluación Macroscópica y Microscópica de Semen
Congelado Nacional e Importado y el DSR-PG-010-RE-003 “Reporte de Resultado de Evaluación Macroscópica y
Microscópica de Semen Congelado Nacional e Importado”.
3.3.2. Sustituir al personal del DMGA cuando este se encuentre ausente.
4.
Definiciones
4.1.
Baño María:
Recipiente térmico de acero inoxidable que funciona con electricidad y sirve para
controlar la temperatura del agua para el descongelamiento de una pajilla de
semen durante 30 segundos a 37 o C
4.2.
Calibrar:
Ajustar la escala de un instrumento de medida con la precisión deseada.
4.3.
Cubreobjetos:
Laminita de vidrio delgada de 22 x 22 milímetros de tamaño que se coloca sobre
una muestra para ser analizada microscópicamente.
4.4.
4.6.
Evaluación Macroscópica Análisis físico de la pajilla, para ver su estado, información impresa.
Seminal:
Evaluación Microscópica Análisis de una muestra de semen para verificar la calidad biológica de la misma.
Seminal:
Homogenizar:
Es agitar la muestra de semen para que su contenido sea igual al resto.
4.7.
Material Genético Animal:
Semen, óvulos y embriones de animales domésticos.
4.8.
Mesa Térmica:
Aparato para controlar temperatura constante de los portaobjetos y cubreobjetos.
4.9.
Microscopio:
Equipo con objetivos de diferentes aumentos que se usa para hacer el análisis
microscópico de una muestra de semen.
4.10. Nitrógeno Líquido:
Elemento líquido a temperatura de –196 °C que se usa para el congelamiento de
semen y/o
embriones, que se almacena en recipientes propios para su
conservación.
4.11. Pajilla:
Recipiente de plástico que se usa para almacenar semen resistente a bajas
temperaturas.
4.12. Portaobjetos:
Laminilla de vidrio delgada de un milímetro de espesor de 25 x 75 milímetros de tamaño,
sobre la que se coloca una muestra de semen para ser analizada microscópicamente.
4.5.
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4.13. Semen Congelado:
Semen que ha sido sometido a procesos de crio preservación y controlado a
bajas Temperaturas.
4.14: Termo:
Recipiente metálico diseñado específicamente para almacenamiento de Material
Genético Animal en un medio de nitrógeno liquido a temperatura de -196 °C.
5. Abreviaturas y/o Siglas
5.1.
DMGA:
Departamento Material Genético Animal.
5.2.
DSR:
Dirección Salud Reproductiva.
5.3.
PT:
Personal Técnico
5.4.
DCA:
Dirección de Cuarentena Animal.
6. Referencias
6.1. Ley de Salud Animal N° 8495 Art 49.
6.2. Decreto N° 21858-MAG Arts. 176 y 177. Reglamento para la Evaluación y Aprobación de Productos y/o
Subproductos de Origen Animal Importados por Costa Rica
6.3. Reglamento N° 17550-MAG Capitulo V Art 25.
7. Descripción
7.1. Recepción de la muestra en las Instalaciones de la DSR.
7.1.1. En caso de semen Nacional, el Ganadero, el distribuidor de casas comerciales de semen congelado, el
inseminador o el particular solicita a la DSR realizar la evaluación microscópica de pajilla (s) con semen congelado
para diagnosticar si la muestra es apta o no apta para ser utilizada en inseminación artificial.
7.1.2. En caso de semen importado se comunica vía e mail y/o telefónica de parte de la DCA a la DSR, informando
el ingreso de la importación del material seminal, adjuntando la información que acompaña dicha importación.
7.1.3. Luego de que la DCA dé el visto bueno de la importación, el usuario trasladara el termo el cual viene con el
marchamo original a la DSR con el contenido del material seminal, la DSR tramitara el DSR-PG-010-RE-001
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“Recepción de Muestra (S) Para Evaluación Macroscópica y Microscópica de Semen Congelado Nacional e
Importado”; Entregando una copia del mismo al usuario. “DMGA” y “PT”.
7.1.3. Para el caso de semen importado, se trasladaran al termo de la DSR las muestras elegidas para analizar, en
caso de semen Nacional se traslada la muestra especifica que el usuario desea analizar “DMGA” y “PT”.
7.1.4. El termo y su contenido de material seminal quedara retenido en las instalaciones de la DSR hasta conocer
el resultado final de las muestras analizadas.
7.2 análisis de las muestras
El muestreo se realizará lote por cada animal
Las muestras se analizaran dentro de un término de 48 horas/ días/ hábiles, desde el momento de la recepción.
7.2.1. Descongelamiento, Evaluación Macroscópica, Montaje y Evaluación Microscópica de la Muestra
Antes de la Evaluación macroscópica y microscópica de la pajilla de semen congelado se procede a encender,
preparar y ajustar temperaturas a 37 o C, como se indica en DSR-PG-010-IN-001 Instructivo de Uso de Baño María
Minitub, DSR-PG-010-IN-002 Instructivo de Uso de Mesa Térmica Minitub HT 200 y el DSR-PG-010-IN-003
Instructivo de Uso de Microscopio Olympus CH 40 para el descongelamiento, montaje y evaluación microscópica
de la muestra. “DMGA” y “PT”
Se extrae con una pinza del termo de la DSR consecutivamente cada pajilla a evaluar, se sumerge en agua
inmediatamente dentro del baño maría por un tiempo de treinta segundos para su descongelamiento; se retira del
baño maría y se seca con una toalla de papel, luego se procede a la evaluación Macroscópica, la cual contempla
las siguientes variables:
Estado de la Pajilla
Volumen de la Pajilla
Identificación de la pajilla
tomando la pajilla entre el dedo índice y pulgar por el extremo del sello de llenado, se agita la pajilla tres veces con
movimiento de arriba hacia abajo y se repite el proceso dos veces más cambiando el extremo de la pajilla para
homogenizar el contenido de la misma, detectar posibles fugas y proceder a la lectura de la información impresa
en la pajilla que se analiza, la cual se anota en el DSR-PG-010-RE-002 Evaluación Macroscópica y Microscópica
de Semen Congelado Nacional e Importado, en el apartado Resultados de la Evaluación de la(s) Muestra(s).
Si se presentaran fugas se procederá a tomar muestras subsecuentes que se consideren necesarias para emitir un
resultado final. Si la identificación de la pajilla no concuerda con la información anotada en el certificado veterinario internacional que
ampara la importación, se da por suspendido el análisis de dicha importación, se anotaran las observaciones pertinentes del caso en el registro
DSR-PG-010-RE-002 y un funcionario de la DSR trasladara el termo marchamado a la DCA para que se realice su respectivo tramite; si todo
concuerda se continuara con el análisis seminal.
Luego se corta la pajilla por el extremo del sello de llenado y se coloca una gota de semen de tamaño moderado en
un portaobjetos temperado en mesa térmica a 37 o C, se repite el proceso cortando la pajilla a la mitad y al otro
extremo. Se colocan las tres gotas separadas en el mismo portaobjetos para cubrir cada una con su respectivo
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cubreobjetos; montando luego el portaobjetos en el microscopio para su evaluación microscópica, la cual
contemplara las siguientes variables:
Porcentaje de espermatozoides con motilidad progresiva.
Porcentaje de espermatozoides vivos
Los resultados de la muestra se anotaran en el DSR-PG-010-RE-002 Evaluación Macroscópica y Microscópica de
Semen Congelado Nacional e Importado
7.3 Resultados de la(s) muestras(s)
En caso de que el resultado de la muestra sea apta, se dará por aceptado todo el lote como apto.
En caso de que el resultado de la muestra sea no apta, se tomara una segunda muestra del mismo lote, si esta
sale apta, se procederá a tomar una tercera muestra la cual es la que define si el lote está apto o no.
7.3.1 Resultado de la(s) muestra(s) apta(s)
Si el resultado final de todos los lotes muestreados es apto, se procederá a entregar el documento original DSRPG-010-RE-003 “Reporte de Resultado de Evaluación Macroscópica y Microscópica de Semen Congelado
Nacional e Importado” y el termo con el material seminal al importador.
7.3.1.1 El valor de los análisis será cancelado en la DSR por el importador, de acuerdo con el Decreto Nº 32285.
7.3.2 Resultado de la(s) muestra(s) no apta(s)
En caso de que el resultado de los lotes muestreados sean No aptos, se procederá a realizar el documento DSRPG-010-RE-003 “Reporte de Resultado de Evaluación Macroscópica y Microscópica de Semen Congelado
Nacional e Importado”, reportando dicho resultado a la DCA y al Importador para definir el destino de dicho material
seminal de acuerdo a lo estipulado en el apartado 11.1 de los requisitos Sanitarios de la DCA.
7.3.2.1. De acuerdo al apartado 11.1 de los Requisitos Sanitarios para la importación de Semen de la DCA, el cual
dice textualmente, cuando se determine que se incumple con lo citado en los apartados 10.1 o 10.2, se procederá a
devolver el semen al país de origen. El importador deberá llevar un termo con el nivel adecuado de nitrógeno
líquido para que la DSR almacene el material seminal apto, y el no apto quedara en el termo de la importación para
regresarlo a la DCA marchamado para su respectivo trámite de acuerdo a lo citado en el apartado 11.1.
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8. Anexo: Flujograma
Recepción de muestra y revisión documental en la DSR
CUMPLE
Llenado de formulario de recepción de la muestra
Análisis Macroscópico de la Muestra
Análisis Microscópico de la Muestra
NO CUMPLE
Se regresa el termo y la documentación a la DCA
Se Suspende análisis y se regresa el termo y la
Documentación a la DCA
Se documenta como muestra no apta y se
comunica al importador y a la DCA para
que definan el destino de la misma
Emisión de resultados 48 horas/ días/ hábiles
Entrega del termo y documento al importador
que indica que el Material seminal es apto
para su uso en la Inseminación artificial
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