Determinación de la presencia de anticuerpos a Neospora caninum

Determinación de la presencia de anticuerpos a Neospora caninum en
hatos lecheros de la sierra Centro Norte del Ecuador, por Prueba
Inmunoenzimática *
Edwin F. Lozada**
* Tesis de Doctor en Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Central del Ecuador. Julio 2004
** Correspondencia del Autor. E-mail: [email protected] Telf. 097 654 025
1.
Introducción
Neospora caninum, un parásito protozoario, es
considerado como el principal agente etiológico de
abortos en bovinos en muchos países desarrollados, y
muy importante causal de este problema en
Latinoamérica como Colombia, Brasil, Chile, México,
Perú, Paraguay y Argentina. Causa la enfermedad
llamada neosporosis fetal bovina o neosporosis abortiva
bovina.
Su historia comienza en 1984, cuando se reporta un
microorganismo causal de encefalomielitis y miositis en
perros, no es hasta 1988 cuando se lo identifica y nombra,
al año siguiente se lo asocia como causante de abortos en
bovinos en California y a partir de allí se lo ha
diagnosticado en todos los continentes. Sin embargo la
infección ha sido identificada en California por estudios
retrospectivos en perros desde 1957 y en bovinos desde
1974. En Australia y Nueva Zelanda se afirman que ha
estado presente al menos desde 1971 y 1972
respectivamente.
Es un parásito muy eficaz en su forma de transmisión.
También afecta a caballos, cabras, ovejas y ciervos.
Experimentalmente se han infectado primates pero no hay
evidencia que la infección sea transmitida al humano.
Su patogenia, ciclo biológico, transmisión, tratamiento y
verdadera situación mundial aún no han sido descritas
completamente. Los perros y coyotes son los
hospedadores definitivos conocidos hasta el momento y
ellos pueden transmitir la infección al ganado, pero la vía
tras placentaria es la principal forma de transmisión de la
enfermedad (por encima del 80% de los casos).
No existe tratamiento efectivo para la enfermedad, pero
actualmente hay alternativas para el control de la
trasmisión y de la infección.
2.
en las tasas de aborto de los hatos fue de 6,21% y
11.66% de reabsorción fetal.
Recolección y almacenamiento de muestras.- Se
tomaron muestras de sangre de la vena de la cola en
tubos de vidrio sin anticoagulante, posteriormente se
centrifugaron a 3000 rpm y se extrajo al menos 4 ml
de suero, éstos se almacenaron en congelación a –20
ºC.
Serología- Para determinar la presencia de
anticuerpos a N. caninum se utilizó un kit comercial
de
ELISA
(CHEKIT®-Neospora,
Bommeli
Diagnostics, Intervet) siguiendo el protocolo del
fabricante para ello. Se consideró positivos a aquellas
muestras que tras de la lectura de las densidades
ópticas mostraron un valor de >50%, negativas <40%
y sospechoso entre 40 y 50%.
Análisis.- Cualitativo.- Presencia de anticuerpos antiNeospora caninum en vacas de la zona centro norte
de la sierra ecuatoriana. Cuantitativo.- análisis
porcentual de los casos positivos, negativos y
sospechosos. Establecimiento de una posible relación
entre los casos positivos a N. caninum y abortos
3.
Resultados
Los resultados de laboratorio determinan que el 42%
de las muestras son positivos a la presencia de
anticuerpos anti-N. caninum, 2,8% es sospechosa y el
55,2% es negativo. ( Cuadro 1)
La seroprevalencia en vacas con antecedentes de
reabsorción fetal de un total de 27, 48.1% son
positivas, 51.9% negativas no hay sospechosas.
Materiales y métodos
Animales- 395 vacas adultas no preñadas o en el primer
tercio de gestación de 34 ganaderías lecheras de la zona
centro-norte de la sierra ecuatoriana con diferentes tasas
de abortos y reabsorciones. Todas con control vacunal
contra IBR, DVB, PI3, BRSV, leptospirosis y brucelosis,
o se las consideraba libre de alguna de ellas. El promedio
En 110 vacas con antecedentes de aborto el 71,8 %
son positivas, 25,5% negativas y 2,7% sospechosas.
De 17 Animales con antecedente de aborto y
reabsorción fetal el 76,5% son positivos, 23,5%
negativos y 0% sospechosos.
De las muestras analizadas 241 animales no tienen
antecedentes de abortos o reabsorción fetal, la
seropositividad es de 25,3%, 3,3% son sopechosos y
71,4% negativos a anticuerpos anti N.caninum (Cuadro 2
y Gráfico 1)
Gráfico 1 Porcentaje de positividad en vacas con
antecedentes de abortos, reabsorciones, abortos y
reabsorciones, y sin antecedentes
Positivos (%)
Negativos (%)
Sospechosos (%)
90
De 166 animales seropositivos, 63,3% han tenido alguna
vez, al menos, un aborto y/o reabsorción, y el 36,7% no
tuvieron dichos antecedentes (Cuadro 3).
71,8
60
48,1
50
25,5
30
Lugar Hda.
# muestras
analizadas
Alóag
200
11
4
36,4
1
9,1
6
54,5
Alóag
217
10
2
20
0
0
8
80
Alóag
365
10
7
70
0
0
3
30
Alóag
460
10
8
80
0
0
2
20
Alóag
80
10
1
10
1
10
8
80
Alóag
44
20
6
30
0
0
14
70
Amaguaña
160
10
2
20
0
0
8
80
Cayambe
97
10
6
60
0
0
4
40
Cayambe
102
10
6
60
0
0
4
40
El Chaupi
120
10
4
40
3
30
3
30
El Chaupi
171
10
6
60
0
0
4
40
El Murco
77
10
2
20
0
0
8
80
Ibarra
160
13
10
76,9
0
0
3
23,1
Ibarra
160
6
6
100
0
0
0
0
Ibarra
160
11
9
81,8
0
0
2
18,2
Ibarra
170
10
9
90
0
0
1
10
Lasso
174
20
5
25
0
0
15
75
Machachi
165
10
3
30
0
0
7
70
Machachi
178
11
10
90,9
0
0
1
9,1
Machachi
191
10
7
70
1
10
2
20
Machachi
163
10
7
70
0
0
3
30
Machachi
180
10
4
40
1
10
5
50
Machachi
380
10
3
30
0
0
7
70
Machachi
380
11
2
18,2
0
0
9
81,8
Mulaló
120
17
8
47,1
0
0
9
52,9
Nanegalito
61
10
8
80
1
10
1
10
Patichubamba
160
10
1
10
0
0
9
90
Píllaro
75
6
2
33,3
0
0
4
66,7
Píllaro
86
18
3
16,7
2
11,1
13
72,2
Píllaro
111
17
3
17,6
0
0
14
82,4
Píllaro
110
16
4
25
0
0
12
75
Tambillo
91
18
2
11,1
1
5,6
15
83,3
Tambillo
200
10
4
40
0
0
6
60
Tambillo
200
10
2
20
0
0
8
80
TOTAL
5768
395
166
PROMEDIO
11
42
218
2.8
55.2
Fuente: Lozada E. FMVZ. UCE
Cuadro 2. Seroprevalencia de vacas con antecedentes
de abortos y/o reabsorción, y vacas sin antecedentes
Aborto
Reabsorción
Antecedentes de: fetal
Aborto y
reabsorción
110
71,8
25,5
2,7
27
48,1
51,9
0
17
76,5
23,5
0
Sin antecedentes
241
25,3
71,4
3,3
Fuente: Lozada E. FMVZ. UCE.
10
2,7
0
3,3
0
0
Aborto
Reabsorción fetal
Aborto y
reabsorción
Sin antecedentes
Fuente: Lozada. FMVZ. UCE
Cuadro 3. Vacas seropositivas a N. caninum, y con
antecedentes de abortos, de reabsorción,
reabsorción y aborto, y sin antecedentes.
Aborto
Reabsorción
AB + RB
Sin Antecedentes
TOTAL
Nº
%
79
13
13
61
166
47,59
7,83
7,83
36,75
100
Suma %
63,3
36,7
Fuente: Lozada E. FMVZ. UCE
El análisis estadístico para determinar
correlación entre las tasas de aborto y la
seroprevalencia estableció una diferencia
significativa al 1 y 5%, pero un coeficiente
de variación de 56,8% y 60,7%
respectivamente.
No
hay
diferencia
significativa entre la tasa de reabsorciones y
la seropositividad. (Gráfico 2)
Gráfico 2 Dispersograma entre tasas de abortos y
reabsorciones (x), y seropositividad (y). La línea
de tendencia estima la correlación, que es mayor
para la relación aborto-seropositividad.
120%
100%
Seropositividad
Muestras
25,3
23,5
20
Positivos Negativos Sospechos
(%)
(%)
os (%)
Vacas
51,9
40
RESULTADOS
Positivos Sospechos Negativos
Nº
%
Nº
%
Nº
%
# animales
en la
hacienda
71,4
70
%
Cuadro 1. Casos Positivos, negativos y sospechosos a
N. caninum en la Sierra Centro Norte del Ecuador
76,5
80
80%
60%
40%
20%
0%
0
5
10
15
20
25
Tasa %
2
Aborto R = 0,4375
Lineal (Aborto)
Fuente: Lozada E. FMVZ. UCE.
2
Reabsorción R = 0,1089
Lineal (Reabsorción)
4.
Discusión
La actividad serológica mundial de Neospora caninum
revelan valores tan altos como 60% en Estados Unidos y
bajos como 3,9% en República Checa, el muestreo
general de este trabajo muestra una seropositividad de
42%
Estudios serológicos en vacas con antecedentes de aborto
en países latinoamericanos demuestran seroprevalencia
entre el 34,8% a 62,1% de los casos, este estudio revela
la seroprevalencia de anti-N. caninum en vacas lecheras
con antecedentes de aborto de 71,8% (79/110) y sumando
aquellas que además de aborto tuvieron antecedentes de
reabsorción fetal es 72,44 % (92/127) de positivas.
En países donde se han controlado eficientemente las
tasas de abortos por causas infecciosas y nutricionales, la
neosporosis bovina es la primera etiología de muerte fetal
y abortos (como Suiza, Alemania, Estados Unidos, Nueva
Zelanda etc). Ecuador debe su tasa de abortos a muchas
etiologías, entre ella IBR, DVB, leptospirosis, brucelosis,
aftosa, problemas nutricionales y metabólicos, de manejo,
entre otras, que son mucho más agresivas en su
presentación que Neospora caninum .
El alto valor en el coeficiente de variación demuestra lo
heterogéneo que son las tasas de abortos en las haciendas
de la zona, esto se debería a diferentes formas de manejo
en cada hacienda (nutrición, sanidad, instalaciones etc..) a
pesar que todas se manejaban bajo sistemas de pastoreo.
Este estudio no pretende buscar una prevalencia de la
enfermedad a nivel de la zona, pero si demostrar un rol de
Neospora caninum en la causa de abortos en ciertas
ganaderías, y además llamar la atención en términos de
investigación a esta nueva entidad biológica, y su
epidemiología en el Ecuador.
5.
Conclusiones
Si bien la presencia de anticuerpos anti- N.caninum no
pueden ser asociados directamente a la tasa de abortos, es
una excelente demostración de la exposición al parásito, y
el posible rol que implica en la etiología de los mismos.
No se puede concluir un valor cierto de seroprevalencia
en la región, debido a que las muestras no se tomaron al
azar, sino en grupos de vacas con antecedentes de abortos
y/o reabsorciones y vacas sin estos antecedentes.
La seropositividad en vacas con antecedentes de abortos o
reabsorciones es significativamente más alta que aquellas
sin antecedentes, lo que indicaría un potencial rol de
Neospora caninum en la etiología de abortos en
haciendas donde llevan control vacunal contra IBR,
DVB, leptospirosis y brucelosis.
6.
Recomendaciones
En Ecuador hay múltiples agentes etiológicos que causan
aborto, en muchos casos no se conoce la causa real del
mismo, y es una labor del veterinario el reconocerlo.
Sería recomendable entonces, el realizar el diagnóstico
histopatológico de fetos abortados para así dar un
diagnóstico definitivo de la presencia de Neospora
caninum.
Evaluar niveles de seropositividad en terneros recién
nacidos para estimar la eficiencia de la transmisión
vertical y estudiar la correlación entre presencia de
perros y la prevalencia de N. caninum para estimar el
rol de la transmisión horizontal (posnatal) en nuestro
medio. Con ello se pueden implementar más
eficazmente programas de control.
Actualmente existe una vacuna para control de
abortos por neosporosis bovina, su uso se recomienda
en casos donde se estime que la tasa de abortos en la
ganadería se debe principalmente a esta etiología,
caso contrario deberá llevarse primero un control
para los otros entes patológicos que están presentes
como IBR, DBV, Leptospirosis y brucelosis.
AGRADECIMIENTOS
A las empresas INTERVET, VETFARM y
PRONACA, y en especial a los doctores Fabián Pita,
Rafael Matute, Fernando Salas, Alejandro Torres,
Richard Mancheno, Luis Freire y Marcelo Almeida
por su colaboración imprescindible en la realización
de este trabajo.
Y a la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
de la Universidad Central del Ecuador.
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