Técnicas Histológicas Técnicas Ultraestructurales Muestra
Anuncio
Muestra Fijación Grosor Fijador Tiempo Cantidad Acción Función Deshidratación Agente Tiempo Cantidad Función Aclaramiento Agente Tiempo Cantidad Función Impregnación e Inclusión Agente Tiempo Cantidad Función Corte Grosor Instrumento Tinción/ Contrastado Sustancia Función Montaje Sustancia Técnicas Histológicas Técnicas Ultraestructurales No mas de 1 cm (3-5 mm) Formaldehído , ácido acético, a. ósmico, metanol Hasta 24 horas 10 a 20 veces Insolubilizar constituyentes celulares, ya sea por coagulación o por formación de enlaces cruzados Conferir estabilidad y preservar estructuras No mas de 1 mm3 Glutaraldehído y Tetróxido de Ósmio 1 a 2 horas 50 veces el volumen de la muestra Etanol, Acetona 1 a 2 horas en cada alcohol 10 a 20 veces; 5 o 7 alcoholes con concentraciones crecientes Extraer el excedente de agua extra e intracelular Fuera de las funciones de la fijación, aumenta el contraste (Tetróxido de Ósmio) Etanol Extraer el excedente de agua extra e intracelular Xileno, Tolueno, Cloroformo. Benceno No más de 2 o 3 horas 10 a 20 veces Óxido de Propileno Eliminar y reemplazar el alcohol por un líquido soluble en parafina Parafina, celoidina, gelatina 2 a 3 horas 20 a 25 veces Ocupar espacios interticios tisulares y dar firmeza a la muestra 3 a 5 micras Microtomos: deslizamiento, minot, rotatorio, crióstato H-E, tricrómicos, colorantes fluorescentes, etc Diferenciar las estructuras por sus diferencias de coloración Bálsamo de Canadá Eliminar y reemplazar el alcohol por un líquido soluble en parafina Resinas Epoxi Ocupar espacios interticios tisulares y dar firmeza a la muestra 20 a 100 nm Ultramicrotomo Acetato de uranilo y Citrato de plomo Aumentar el contraste por el recubrimiento con sales de metales pesados que favorecen el paso de electrones
