Universidad Latina de Panamá Facultad de Ciencias Médicas de la

Universidad Latina de Panamá
Facultad de Ciencias Médicas de la Salud
Licenciatura de Farmacia
Asignatura:
Microbiología
La Tinción
III Cuatrimestre
Elaborado por:
Estefany Zhong 8-881-1109
Indira Saab 049972793
Yessica Chan 8-861-2165
Erika Liu 8-857-411
Profesora:
Ricardo Vizuete
Septiembre, 2012
Introducción
En este laboratorio le explicaremos sobre las bacterias del yogurt, vinagre y sarro dental
sobre las ténicas de tinción.
Son técnicas que permiten observar microorganismo en función de la capacidad de los
mismos para retener o no determinadas sustancias colorantes, lo que depende de la
carga de la célula y lo del colorante. Los colorantes pueden ser de distintos tipos:
Catiónicos. Son sustancias que tienen cargas positivas. Penetran en el interior de las
células y las tiñen. Ejemplos: azul de metileno, cristal violeta y safranina.
Aniónicos. Con carga negativa. No penetran en el interior celular, de modo que no tiñen
las células, sino el entorno. En este caso se habla de tinción negativa. Ejemplo: eosina,
nigrosina.
Liposolubles. Se mezclan con los lípidos celulares y los tiñen. Ejemplo: negro sudán.
Objetivos
1. Realizar una tinción simple de bacterias procedentes de distintas muestras
naturales.
2. Realizar 2 tipos de fijación bacterianas y saber en qué casos se recomienda una u
otra.
3. Observar la morfología bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de
agrupaciones que existen.
4. Practicar con el microscopio al máximo aumento y con el correcto empleo del
aceite de inmersión.
Material
 Mechero Bunsen o de alcohol
 Asa de siembra o aguja enmangada
 Pinzas
 Portaobjetos
 Muestras bacterianas de origen natural: yogurt, vinagre, sarro dental, etc.
 Colorantes para tinción
a) Solución de cristal violeta al 1%
b) Solución de safranina al 0.5%
c) Azul de metileno al 1%
 Microscopio y aceite de inmersión.
Procedimiento del yogurt, vinagre y sarro dental
1. Extensión: realizar el frotis disolviendo una mínima porción de yogurt en una
pequeña gota de agua.
2. Fijación: fijar con metanol o xilol para eliminar parte de la grasa.
3. Teñir: apoyar el portaobjetos sobre el soporte de tinciones y añadir unas 3 gotas
de azul de metileno o con un colorante cualquiera de los indicados de arriba.
Dejan actuar por 2 minutos.
4. Lavar: sobre una charola escurrir el colorante y lavar la preparación con el
mínimo de agua, para ello inclinar el portaobjetos y en la parte superior aplicar
el agua con una piseta de manera que resbale sobre el frote.
5. Secar: colocar el portaobjetos inclinado sobre una toalla de papel absorbente y
dejar secar a temperatura ambiente o también pasar el porta objetos varias veces
por encima de la llama del mechero de alcohol, sin permitir que llegue a hervir,
hasta que se seque. Añadir una gota de glicerina y colocar el cubre objetos.
6. Observar: primero con el objetivo 40x; luego se añade aceite de inmersión y se
observa con el objetivo 100x.
Preguntas
1. El yogurt es un alimento más fácilmente digerible que la leche, ¿Por qué?
R/ Es debido a que los cultivos de bacterias que contiene el yogurt rompen las
cadenas de lactosa y la hacen más fácil de digerir. El proceso de hacer yogurt
también modifica las proteínas de la leche haciéndolas mas digerible.
2. En casos de intolerancia a la lactosa, ¿Qué alimento será más fácilmente
tolerado, la leche o el yogurt? ¿Por qué?
R/ El yogurt, porque es un derivado de la leche y se elabora mediante
la fermentación bacteriana de leche que transforma a los azucares
en ácidos, así la lactosa se convierte en ácido láctico. El menor contenido
de lactosa del yogurt con respecto a la leche, hace que sea mejor tolerado por
quienes no consumen leche habitualmente y además, permite comenzar a tolerar
la lactosa.
3. ¿Qué papel desempeña cada una de estas bacterias en la formación del yogurt a
partir de la leche?
R/ Tanto Lactobacillus bulgaris como Streptococcus thermophilus realizan
la fermentación del ácido láctico. Transforman los azucares presentes en la leche
(lactosa formada por glucosa y galactosa) en ácido láctico. Se trata de un
proceso anaeróbico que confiere acidez al yogurt.
4. ¿Qué otros procesos conoces en que se empleen bacterias para la elaboración de
algún producto alimenticio?
R/
Proceso
Organismo
Papel en proceso
Fabricación de
la cerveza
Saccharomyces
cerevisidae(levadura)
F. del pan
S. cerevisidae
F. del vinagre
Bacterias del ácido
acético
Fermentación
alcohólica y
carbonatación
Fermentación y
carbonatación
Oxidación aerobios
estrictos
Molécula
original
Glucosa i/o
fructosa
Producto
final
Etanol
+CO2
Azúcar
Co2
Alcohol
(etanol)
Acido
acético
Tinción Negativa
1. Colocar una pequeña gota de tinta china en el extremo de un portaobjeto, colocar
una gota de muestra.
2. Realizar frotis.
3. Dejar secar.
Bacterias del yogurt
El yogurt es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A
escala industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3- 4% de una
asociación de 2 cepas bacterianas: el Streptococus termophilus, poco productor de
ácido, pero muy aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta
preparación se podrán, por tanto, observar 2 morfologías bacterianas distintas (cocos y
bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas).
Además, el tamaño del lactobacilo (unos 30
Bacterias del vinagre
El vinagre es una solución acuosa rica en ácido acético, resultante de la fermentación
espontánea del vino o de bebidas alcohólicas de baja graduación. La acetificación del
vino es producidas por bacterias aeróbicas del ácido acético, principalmente
Acetobacter aceti, aunque también Gluconobacter. Se trata de bacilos rectos con
flagelos polares.
Conclusión
Durante este experimento pudimos observar las diferentes formas que tienen las
bacterias.
La mayoría de los estreptococos, cocos, bacilos, dicocos, tricocos y demás grupos o
genero microbianos son algunos patógenos y no patógenos, de estos se pueden preparar
fermentaciones, que mediante un largo proceso, llegan a ser elaboradas en productos
comestibles como el yogurt, garantizando la mayor seguridad al consumir ese producto
fermentado.
También aprendimos a teñir las muestra del laboratorio cuales eran los colorantes que se
les debió introducir a la muestra.